老年人龋坏组织中变形链球菌和乳酸杆菌的致龋特点

1、老年人龋坏组织中变形链球菌和乳酸杆菌的致龋特点【摘要】目的讨论老年人龋坏组织中变形链球菌S和乳酸杆菌LB在致龋过程中的特点。方法136例龋坏组织样本按患者年龄、患牙龋坏程度和龋坏活泼性分组，利用选择性培养基对S及LB行别离、培养和鉴定。统计两种细菌在不同组别中细菌菌落形成单位FU计数及两种细菌致龋样本例数。结果在老年龋组、严重龋组中、深龋和活动期龋组中，S与LB的FU计数均显著升高(均P0.05)；S与LB共同致龋样本数在老年龋组中显著升高(P0.05)，并随龋坏程度的加重而升高(P0.05)。结论在老年龋病及中、深龋中，S与LB为互生关系，有明显共同致龋作用。【关键词】变形链球菌；乳酸杆菌；

2、老年人；龋坏组织变形链球菌S和乳酸杆菌LB与龋病的形成和开展亲密相关。S是口腔主要致龋菌，对其在细菌毒力、致龋机制方面已有研究1，而有关LB的致龋作用颇有争议，有学者认为LB是龋坏的结果而不是龋坏的原因2；另有研究认为在致龋初期LB并不致龋，而在龋坏进入深层时，LB由于其较强的耐酸性而大量繁殖并产酸，协同S致龋3；有人指出LB有可能因抑制龋病病原菌的繁殖而抑制龋病的开展45。本研究通过别离、培养及鉴定136例龋坏组织样本中的S和LB，讨论S与LB的致龋特点及老年龋病患者龋坏组织中的菌与龋病严重程度的关系。1材料与方法1.1细菌培养基与鉴定方法细菌培养基采用改进轻唾琼脂培养基(S)6与Rgasa

3、培养基(LB)7，分别采用DentultS法和DentultLB法鉴别S和LB致龋活泼性。1.2方法1.2.2细菌接种及孵化将样本混匀后，分别取20l接种于两种培养皿，20%2、80%2、37恒温条件下培养48h。1.2.3细菌形态学及专用培养基鉴定S菌落为透明、边缘略整齐、中心微隆起似雨滴状菌落；LB菌落乳白色、边缘略不整齐、中心微隆起菌落。随机法，将本实验别离获得的两种细菌分别二次克隆后接种于DentultS与DentultLB上培养，生长良好,证明本实验培养两种菌为目的菌。1.2.4菌落计数136例样本中，共120例检出S和(或)LB，对两种培养皿中菌落行盲法计数(每皿计数3次，最后取均

4、数)。本实验设定：如S的FU计数对数值S的FU计数对数值的单侧90%下限值P10(S)，且LB的FU计数对数值LB的FU计数对数值的单侧90%下限值P10(LB)，那么该样本所对应病例中S为主要致龋细菌；如S的FU计数对数值P10(S)，且LB的FU计数对数值P10(LB)，那么该样本所对应病例中LB为主要致龋细菌；如S的FU计数对数值P10(S)，且LB的FU计数对数值P10(LB)，那么该样本所对应病例中S与LB共同致龋。如S的FU计数对数值P10(S)，且LB的FU计数对数值P10(LB)，那么该样本不进入细菌相关致龋病例数统计。2结果2.1S和LB的FU计数对数值S的FU计数对数值为4

5、.57120.7228；LB的FU计数对数值为4.47560.7419。计算P10(S)为3.644，P10(LB)为3.524。在本实验中有10例S的FU计数对数值P10(S)，且LB的FU计数对数值P10(LB)，因此不同细菌相关致龋病例数为110。2.2不同组别中FU计数均数对数值比拟各年龄组别中，老年组两种细菌FU计数均数对数值均升高(P0.05)表1；不同龋坏程度组中，S与LB的FU计数均数对数值分别随着龋坏程度加重而升高(P0.05)表2；不同龋病活泼性组中，活动期组两种细菌FU计数均数对数值均升高(P0.05)表3。2.3与不同细菌相关龋坏病例数比拟老年组两种细菌共同致龋病例数均

6、升高(2=12.3285，P0.05)表1；两种细菌共同致龋病例数随着龋坏程度的加重而升高210.170，P0.05)表2；活动期组与静止期组两种细菌共同致龋病例数差异无统计学意义2=2.298，P0.05表3。表1不同年龄分组中S及LB的FU均数对数值表2不同龋坏程度分组中S及LB的FU均数表3龋病活泼性分组中S及LB的FU均数转贴于论文联盟.ll.3讨论龋病在临床上具有明显的年龄特征。第三次全国口腔安康流行病学调查结果显示：我国5岁儿童乳牙龋病患病率为66、6574岁的老年人龋齿患病率高达98。这除了与不同年龄对口腔卫生的重视程度、饮食习惯不同外，还与口腔组织的增龄变化有关。周学东等8发现

7、老年人釉质与青少年釉质对龋损形成的敏感性没有明显的差异，提示因年龄增长导致的牙体硬组织成分、构造变化并不能完全解释龋病的成因。本研究发如今老年组龋坏组织中，两种细菌共同致龋作用增强明显P0.05，说明老年组龋坏组S和LB是互生关系，即致龋过程中，两种微生物间互相受益。这可能与老年人的唾液腺增龄性萎缩，唾液的流速和缓冲才能均降低有关。细菌的致龋才能主要是因为能黏附至牙面并发酵蔗糖产酸和耐酸。S最适生长pH值为6.5，而LB最适pH值较低，在5.56.2之间，两者都能在pH值很低，甚至在pH值3.5的环境中生长。S对牙面有蔗糖非依赖性黏附和蔗糖依赖性黏附两种黏附机制，其中，蔗糖依赖性黏附可高度促进

8、S在牙面的黏附和聚集9。凭借这种黏附机制，S附着于光滑牙面的致龋作用较强10。有学者发现LB对型胶原蛋白具有强亲和力；当龋洞形成以后，由于部分微生态的差异、唾液的冲洗和缓冲才能减弱、缺乏磷灰石的缓冲等原因，更为LB提供了适宜的条件，因此，随着龋坏程度的严重，LB参与了成龋的过程。理论上，这两种菌间存在协同或竞争和拮抗等关系11。本研究结果显示，浅龋中S与LB的共同致龋作用并不明显，但随着龋坏程度的增加，二者的致龋过程有可能存在协同作用。本研究结果显示，龋病处于活动期时，S和LB的FU计数均数均明显升高，龋病处于静止期时，S和LB的FU计数均数均明显降低(P0.05)。当龋病处于活动期时，四联因素充分发挥作用，有利于两种细菌的繁殖，细菌的繁殖在数量上明显增多，而静止龋因龋损外露或开放，原有致病条件发生了变化，不利于两种细菌的繁殖，细菌总数也随之减少。对于两种细