动物细胞培养课件

1、动物细胞培养动物细胞培养一、动物细胞培养的概念：1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.一、动物细胞培养的概念：1、概念：动物细胞培养就是从动物有机2、概念分析原理：材料：相关动物组织培养前处理：分散成单个细胞培养结果：大量相同细胞细胞增殖（有丝分裂）动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、概念分析原理：材料：相关动物组织培养前处理：分散成单个细_二、动物细胞培养的过程：细胞悬液用_处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释动物组织块适宜

2、条件下培养加培养液稀释剪碎胰蛋白酶细胞贴满瓶壁_细胞悬液_处理胰蛋白酶分瓶培养_二、动物细胞培养的过程：细胞悬液用_二、动物细胞培养的过程：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释二、动物细胞培养的过程：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释1、取材：选用动物幼嫩的组织好还是衰老的组织好，为什么？常选动物胚胎或幼龄个体的器官、组织为材料幼

3、嫩的组织。因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强。2、材料处理：培养前将组织细胞分散成单个细胞是为了扩大细胞与培养液的接触面积，利于细胞吸收营养。（1）将组织分散成单个细胞时为什么要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理？三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培小资料：动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。胰蛋白酶可以将动物组织细胞间的蛋白质成分酶解，使细胞分散开，获得单个细胞。在用胰蛋白酶处理组织时应注意什么？控制好时间！长时间处理会损伤细胞。（2）用胰蛋白酶处理会不会对所培养的细胞造成损伤？细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培

4、养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释三、动物细胞培养过程分析：细胞膜的成分是什么？蛋白酶的作用是什么？小资料：动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释（1）营养：成分方面：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等-液体合成培养基通常还需加入血浆、血清等天然成分。3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪

5、碎3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释成分方面：（2）气体：氧气是细胞代谢必需的； CO2维持培养液的PH。 “95空气+5CO2”的混合气体培养箱。3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释（3）温度和pH：适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度

6、为36.50.5。适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4理化性质方面：3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释（4）无菌无毒的环境其它方面：3、动物细胞培养的条件三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎接触抑制4、细胞增殖过程原代培养传代培养原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养：分瓶继续培养的过程。三、动物细胞培养过程分析：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单

7、个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释贴壁生长特点在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。接触抑制4、细胞增殖过程原代培养传代培养原代培养：人们通常将思考题？问题1：依据动物细胞培养条件分析，将动物细胞分散成单个细胞为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？思考题？问题1：依据动物细胞培养条件分析，将动物细胞分散问题2：根据资料分析，动物细胞进行培养时通常要添加血清？材料：因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%20%

8、的血清。（1）血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。（2）血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）， 血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质。（1）提供必须的及未知的营养物质；（2）提供能促进细胞的生长、增殖和贴附的物质思考题？问题2：根据资料分析，动物细胞进行培养时通常要添加血清？材料总结：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培养液稀释细胞贴满瓶壁动物组织块适宜条件下培养胰蛋白酶

9、处理细胞悬液分瓶培养加培养液稀释结束总结：细胞悬液剪碎、用胰蛋白酶处理转入培养瓶培养单个细胞加培用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A. 容易产生各种变异 B具有更强的全能性 C. 取材十分方便 D分裂增殖的能力强D结束用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物在动物细胞培养过程中遗传物质肯定发生改变的细胞是 -（ ） A原代细胞 B10代以内的传代细胞 C10-50代地细胞株 D50代后具有无限传代能力的细胞D结束在动物细胞培养过程中遗传物质肯定发生改变的细胞是 -关于动物细胞培养的错误叙述是 ( ) A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞会全部衰老死亡D结束关于动物细胞培养的错误叙述是 ( ) A.用于培养的