注射用通栓欣粉针对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制

1、注射用通栓欣粉针对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制【摘要】目的观察注射用通栓欣粉针对脑缺血保护作用及其作用机制。方法通过不完全性脑缺血模型观察注射用通栓欣粉针对大鼠脑血管通透性、脑组织形态学、超氧化物岐化酶(SD)活性及丙二醛(DA)含量的影响;通过血小板黏附、ADP诱导血小板聚集试验观察注射用通栓欣粉针对大鼠血小板功能的影响。结果注射用通栓欣粉针可明显降低不完全性脑缺血大鼠脑血管通透性，使缺血脑组织病变程度减轻，脑组织发生病变的动物数减少，DA含量明显降低、SD活性明显升高;可明显降低血小板黏附百分率，抑制血小板聚集。结论注射用通栓欣粉针可抑制血栓的形成，对实验性大鼠脑缺血损伤具有保护作用。

2、【关键词】注射用通栓欣粉针;脑缺血;作用机制三七panaxntglnseng(Burk)F.H.hen为五加科人参属植物，由其根提取的总皂苷制成的血塞通注射液广泛应用于临床，为了充分利用三七的地上资源，降低原料本钱，本研究对三七叶中总皂苷进展别离纯化，制成通栓欣粉针剂，并观察了通栓欣粉针对脑缺血保护作用。1材料与方法1.1材料1.2方法1.2.1对大鼠不完全性脑缺血模型的影响1.2.1.2脑组织形态学检测动物分组给药同前。末次给药后15in同前述方法结扎双侧颈总动脉，造成动物不完全性脑缺血。4h后将动物断头处死，取脑组织同一部位，于10%福尔马林中固定，做病理检查。1.2.1.3脑组织超氧化物

3、岐化酶(SD)活性及丙二醛(DA)含量检测动物分组、给药、造模方法同上。4h后将动物断头处死，立即取脑，在4下匀浆、离心，提取SD，并测定其活性;同时测定DA含量2。1.2.2血小板功能测定1.2.2.1血小板黏附性检测取50只大鼠，随机分为5组：空白对照组，血塞通注射液(57.0g/kg)组，通栓欣粉针31.0、15.5、7.8g/kg三个剂量给药组。每天1次，连续给药3d。末次给药后15in，于动物腹腔注射戊巴比妥钠(35g/kg)麻醉，在腹静脉采血1.5l/只，按玻球瓶法计算血小板黏附率3。1.2.2.2ADP诱导血小板聚集实验取45只大鼠，动物分组给药同上。末次给药后15in，腹腔注射

4、水合氯醛300g/kg麻醉，主动脉采血2.7l/只，缓缓注入装有0.3l3.8%枸椽酸钠溶液的试管中，混匀，离心，别离PRP和PPP，按文献方法测定ADP诱导血小板最大聚集率，计算聚集抑制百分率3。1.3统计学处理数据用xs表示，采用t检验。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1对大鼠不完全性脑缺血模型的影响2.1.1对脑血管通透性的影响各组伊文思蓝含量为：空白对照组(27.910.87)g，缺血模型组(29.94.93)g，血塞通注射液组(25.38.01)g，注射用通栓欣粉针31.0g/kg组(20.65.82)g，15.5g/kg组(20.55.76)g，7.8g/kg组(20.98.11)

5、g。注射用通栓欣粉针可明显降低不完全性脑缺血大鼠脑中伊文思蓝含量，与缺血模型组比拟有统计学差异(P0.05，P0.01)。血塞通注射液给药组伊文思蓝含量亦有降低趋势，但无统计学差异。2.1.2对脑组织形态学的影响见表1。空白对照组动物脑组织神经细胞正常，血管周围腔隙狭窄;缺血模型组动物脑组织发生病理性改变，神经细胞及血管周围的腔隙增宽;而血塞通注射液和注射用通栓欣粉针三个剂量给药组均可使大鼠缺血性脑组织病变程度减轻，发生组织病变的动物数减少，尤以注射用通栓欣粉针高剂量给药组作用明显。表1注射用通栓欣粉针对各组大鼠脑组织形态学的影响2.1.3对脑组织SD活性及DA含量的影响见表2。大鼠脑缺血后，

6、脑组织中DA含量明显升高，SD活性显著降低，与空白对照组比拟差异显著(P0.01);而注射血塞通和通栓欣粉针的动物脑组织中DA含量明显较模型组降低，同时SD活性明显升高。表2注射用通栓欣粉针对各组大鼠脑组织中DA含量及SD活性的影响与空白对照组比拟：1)P0.01;与模型组比拟：2)P0.0012.2对血小板功能的影响2.2.1对血小板黏附性的影响各组血小板黏附率分别为：空白对照组(36.20.15)%，血塞通注射液组(20.90.12)%，通栓欣粉针31.0g/kg组(16.20.10)%，15.5g/kg组(19.60.12)%，7.8g/kg组(31.50.17)%。血塞通注射液和通栓欣

7、粉针高、中剂量组均可明显降低血小板黏附率，与对照组比拟有明显差异(P0.05，P0.01)。2.2.2对ADP诱导血小板聚集率的影响见表3。注射用通栓欣粉针高剂量组可明显抑制血小板聚集，其聚集率与对照组比拟明显降低;阳性药血塞通注射液也使动物血小板聚集百分率有降低的趋势。表3注射用通栓欣粉针对大鼠血小板聚集的影响3讨论血塞通注射液即为三七总皂苷制成的注射剂，目前在临床上广泛用于治疗脑血栓，疗效确切。以往的三七总皂苷都是从三七根中提获得到的，茎叶常作为废弃物扔掉。本课题组经多年研究认为三七叶地上局部含有与根中一样的有效成分。实验结果显示，注射用通栓欣粉针对结扎双侧颈总动脉造成的不完全性脑缺血有明显的缓解作用，抑制脑水肿的发生，拮抗脑组织神经细胞损伤。在脑缺血时，自由基去除酶活性降低，自由基产生急剧增多。SD能去除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤，DA常可以反映机体内脂质过氧化的程度4。因此测定SD的活性及DA的含量可反映机体内自由基引发的脂质过氧化反响的程度。本研究发现，大鼠脑缺血后，脑组织SD活性降低，DA含量升高，给予通栓欣粉针后能明显降低缺血区脑组织DA含量，升高SD活性，显示出其去除过多自由基的才能，减轻由氧自由基介导的脂质过氧化反响，从而可使大鼠缺血性脑组织病变程度减轻，发生组织病变的动物数减少，对实验性大鼠脑缺血损伤具有保护作用。脑缺血时无氧糖酵解增加，导