免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义

1、免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯抗体。实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切

2、片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决胞内抗原形成醛键、羧

3、甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行定簇隐蔽。所以要求在进行IHC 染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。常用的抗原修复方法有微波修复法，高间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是 压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是 pH6.0 的 0.01 mol/L 的柠檬酸盐缓冲液。免疫组化常用的染色方法根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化液。免疫组化常用的染色方法根据标记物的不同

4、分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原性更高，有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素抗生物素染色法最常用。法最常用。一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记AE1/AE3 最常用，胞浆阳性着色，细丝状，与低、中分子量角蛋白反应，肝细胞为阴性，CK8 和CK18CAM5.2 Pagets Mallory 小体；EMA 细胞膜/细胞浆阳性着色，上皮标记的替代品， 浆细胞阳性，很好的内对照，用于染滑膜肉瘤

5、 、大细胞分化不良性淋巴瘤 、L&H 富于淋巴细胞的结节状何杰金、脑膜瘤EMA（+）AE1/AE3（）、浆细胞瘤；CK7 和 CK20CK7常常在胃肠道的癌为阴性，CK20 只有胃肠道癌和Merkel 间皮细胞标记Calretinin 和肥大细胞阳性，用于鉴别间皮瘤和腺癌常加 CEA，鉴别梭形细胞间皮肉瘤和其他的浆膜腔肉瘤鉴别胸、腹水中的癌细胞和间皮细胞，确定为间皮细胞，如大网膜 内陷。白细胞标记非何杰金淋巴瘤大致分类怀疑T 细胞淋巴瘤者加LCA B 几乎所有的白细胞T 细胞淋巴瘤（- ），经典Hodgkin 的R-S 细胞以往浆细胞瘤现（+），HE 下明确的淋巴瘤不必要染。B 细胞相关标记C

6、D20（L26）胞膜阳性着色，浆阳者不可判为阳性，各阶段B 细胞阳性，除了原始的前B 和非常成熟的浆母、浆细胞 ，用于染B 细胞淋巴瘤，除了小细胞、淋巴母细胞（不恒定）和浆细胞瘤常 ，梭形细胞胸腺瘤 B 细胞标记，包括浆母和浆细胞，标记滤泡中心比mantle 和滤泡间B 要弱，比CD20 贵/B /白血病，浆细胞瘤常CD20而CD79a 50% 。T 细胞相关标记T CD43 不同，髓系细胞和组织细胞不着色，极好的T 细胞和NK 淋巴瘤标记，虽然有些T （MT1） T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性，一部分浆细胞瘤阳性，小B 细胞淋巴瘤阳 B 细胞阳性；UCHL-1（CD45RO

7、）细胞膜阳性着色，有时 Golgi 阳性，弥漫性胞浆阳性者非真阳性 ，阳性：正常/ 反应性的T T B 细胞淋巴瘤 细胞阳性，但极少B 性白血病和Mantle 淋巴瘤，而MALToma Marginal Zone 淋巴瘤阴性，用于鉴别胸腺癌（CD5+）和其他癌瘤。与激活相关的标记只有膜染色和Golgi Kikuchi 淋巴结炎等、浆细胞也阳性，用于大细胞分化不良性淋巴瘤、一些传统的大细胞淋巴瘤、外周T 和B 细胞淋巴瘤中的一些单个大细胞、经典何杰金病中的R-S 细胞，但非L&H 细胞、淋巴瘤样丘疹病等皮CD30+的淋巴增生疾病、一些浆细胞瘤、胚胎性癌。组织细胞标记CD68（PGM1）胞浆内颗粒

8、状阳性着色，较好的组织细胞和单核细胞（包括浆样单核细 胞）瘤样恶纤组等，髓系细胞标记；Myeloperoxidase 胞浆阳性着色，常呈颗粒状，髓系细胞及其肿瘤的高度特异且敏感的标记，奇怪的是在Kikuchi 淋巴结炎和狼疮性坏死性淋巴结炎中，其中的组织细胞myeloperoxidase 也为 阳性。与淋巴瘤相关的标记ALK-1(Anaplastic lymphoma 胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤ALK1+ B 阳性而阴性，但IgA 在核周围区阳性着色，在正常淋巴结，生发中心阴性，但和滤泡间细胞强阳性，在滤泡性淋巴瘤，（80% 病例）生发中心强阳性，阴性不能排除滤泡性淋巴瘤，

9、也用于鉴别单核样B 细胞增生（-）和单核样B 细胞淋巴瘤（+），有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤；Cyclin-D1 核阳性着色，主要用于Mantle 区淋巴瘤，几乎所有病例均为阳性，有些可能为弱阳性。与分化阶段相关的标记Tdt 细胞核阳性着色，不成熟的T 或B 淋巴细胞标记，前T 前B / 白血病，诊断胸腺瘤（富于不成熟的T 细胞）。肌原性标记Desmin / ,desmoplastic small cell tumor；MSA（Muscle-specific 血管原性标记CD31 / / 浆细胞瘤阳性病 ；CD34 +/-/血小板 +但特异性差，多种肿瘤CD34 阳性。血管原性标记Factor

10、 VIII related antigen (F-VIII) / 血 细胞浆阳性着色，是神经和神经内分泌细胞很好的标记，特异性和敏感性均好，包括： ParagangliomaPheochromocytomaNeuroblastomaOlfactory neuroblastomaGanglioneuroma、GanglioneuroblastomaPNET 等；CgA 胞浆内颗粒状着色，染神经内分泌细胞的分泌小泡， Merkel 细胞癌、甲状旁腺腺瘤fibrillary acidic 胞浆阳性着色， 星+/-细胞浆阳性着色，核阳性着色为必 胞浆内颗粒状着色，恶性黑色素瘤和交界痣，而正常的痣细胞常为胞浆内颗粒状着色，阳性表达的细胞包括：黑色素细胞、肾上腺皮质、性索gra