动物细胞培养(三佰)课件

1、细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过 或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。按操作对象分植物细胞工程动物细胞工程研究的水平研究的目的细胞水平一、概念动物细胞工程：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础选修3 现代生物科技专题教学目标重点难点问题探讨教学过程知识结构教学反馈课后习题教学参考2.1 动物细胞培养问题讨论烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？取该

2、患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植情景导入畅想动物细胞培养 从动物机体中取出相关的组织或器官，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。原理：细胞增殖概念结果：获得细胞群1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）3、温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）补充合成培养基中缺乏的物质动物细胞培养条件防止代谢产物积累对细胞自身造成危害 温热的盐水：满足细胞对水分、温度和无机盐的要求，同时，无机盐离子对维持

3、细胞生存所必需的渗透压平衡，离子平衡，PH恒定都起着重要作用。动物血清：提供基本的营养物质，如：氨基酸、维生素、无机物、脂质、核酸衍生物等，它们都是细胞生长所必需的物质，还可以提供激素和各种生长因子，如：胰岛素、肾上腺皮质激素、血小板生长因子等。鸡胚浸出液：与动物血清相似，含有多种促进细胞生长的营养物质 培养器皿动物细胞培养请同学们阅读课本后，简述动物细胞培养的基本过程？ 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养培养过程思考题1、为什么选用动物胚胎或幼龄动物的组织、器官做动物培养材料？2、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？3、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？4、胰蛋白

4、酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用胰蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质思考题5、细胞膜的主要成份是什么？6、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？7、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？8、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近思考题11、如何理解原代培养和传代培养？12、传代培养的细胞能有些为何能一直传下去？上述过程中，在

5、第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养发生突变，朝着癌细胞方向发展动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎过程：细胞株细胞系遗传物质未改变遗传物质已改变细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培

6、养。解答概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。解答概念原代培养传代培养时间机体取出后立即培养将原代细胞分瓶继续培养培养代数110代 10代以后遗传物质是否改变不改变改变，并有癌细胞特点细胞名称细胞悬浮液细胞株、细胞系（1）生产蛋白质生物制品：酶、生长因子、病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。（2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。（3）用于检测有毒物质和药物。（4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据动物细胞培养技术的应用知识小结动物细胞培养细胞培养的应用和概念细胞培养的过程细胞培养的条件细胞培养技术的应用教学参考 1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 细胞间的成分主要是蛋白质。胃蛋白酶适宜的PH约为2，当PH6时，胃蛋白酶就会失去活性，而胰蛋白酶作用的适宜环境PH为7.2-8.4，多数动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。 2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞