《分解纤维素的微生物的分离》名师导学

1、PAGE7课题3分解纤维素的微生物的分离【学习目标】1通过阅读纤维素与纤维素酶相关资料，结合教材内容，能够简述纤维素酶的种类及作用。2通过认识从土壤中分离出分解纤维素的微生物，能够说出这类微生物的应用。3通过进行实际的实验操作，能够掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。【新知预习】一、纤维素与纤维素酶1纤维素的化学组成：三种元素，是一种糖。2纤维素的分布：是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。3纤维素酶的作用：纤维素酶是一种，一般认为它至少包括三种组分，即酶、酶酶，前两种酶使纤维素分解成，第三种酶将纤维二糖分解成。二、纤维素分解菌的筛选1筛选方法：染色法。

2、2筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以为中心的透明圈，我们可以通过来筛选纤维素分解菌。三、试验设计分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下：梯度稀释1土壤取样：采集土样时，应选择富含的环境。2选择培养：阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：【思考1】纤维素分解菌选择培养基属于培养基，原因是什么？【思考2】该培养基选择作用机制是什么？【思考3】若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？（1）目的：增加纤维素分解菌的，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。（2）制备

3、选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。（3）选择培养：称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养12d，直至培养液变。也可重复选择培养。（4）梯度稀释：依次将培养液稀释101107倍。思考是如何操作的（5）将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上制备培养基：参照课本旁栏中的比例。倒平板操作。涂布平板：将稀释度为104106的菌悬液各取涂布在平板培养基上，30（6）刚果红染色法：挑选产生的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。【思考4】本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？3刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种【阅读资料三“刚果红染色

4、法”，比较两种染色法的各自的优缺点】（见“疑难点拨”3）【思考5】为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物（见“疑难点拨”4）四、结果分析与评价1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行实验，纤维素酶的发酵方法有发酵和发酵。2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的含量进行定量测定。【检测与反馈】（课堂完成）1在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是（）A分解尿素的细菌B硝化细菌C分解纤维素的细菌D乳酸菌答案：C2关于选择培养叙述正确的是（）A可以增加纤维素分解菌的浓度B可以减少纤维素分解菌的浓度C所用培养基是固体培养基D所用培养基是平板培养基答案：A3下列材料中纤维素含量最高的

5、是（）A杨树B小麦C玉米D棉花答案：D4纤维素酶能够分解（）A纤维素的微生物B淀粉的微生物C纤维素D淀粉答案：C5下列哪种生物能产生纤维素酶（）A纤维素分解菌B牛C羊D兔答案：A6选择培养时应将锥形瓶固定在（）A桌子上B温箱里C窗台上D摇床答案：D7选择培养的结果是培养液变（）A清澈B混浊C红色D产生透明圈答案：B8刚果红染色时，加入刚果红可在（）制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时培养基上长出菌落时ABCD答案：C9两种刚果红染色法的结果是（）A均会出现透明圈B均不会出现透明圈C方法一出现方法二不出现D方法一不出现方法二出现答案：A10鉴别纤维素分解菌的培养基中碳源为（）ACMC-NaB木聚

6、糖C纤维素D裂解酶答案：A11下列生物能分解纤维素的是（）人兔牛蘑菇纤维杆菌ABCD答案：C12在加入刚果红的纤维素培养基中出现透明圈的菌落是（）A分解尿素的细菌B硝化细菌C乳酸菌D分解纤维素的细菌答案：D【疑难点拨】1分离分解纤维素的微生物的实验流程与稀释液的取样培养流程图有何异同它们的区别是：稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本相同。2将滤纸埋在土壤中有什么作用你认为滤纸应该埋进土壤多深将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解

7、菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌的生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。3两种刚果红染色法的比较刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，在本课题中我们给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂的问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成