926生物典题学生

1、1（8分）研究人员用四倍体马铃薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病的马铃薯。（1）研究人员用四倍体马铃薯的叶片探究原生质体制备条件，结果如表所示：组别酶的种类酶的浓度（%）原生质体产量（106个/g）镜检结果1纤维素酶1.00.4未解离的细胞团多果胶酶0.52纤维素酶1.00.08有许多碎片果胶酶1.03纤维素酶0.51.5未完全解离果胶酶0.54纤维素酶0.53.4解离较好，细胞破碎严重果胶酶1.05纤维素酶0.418.8解离充分，碎片少果胶酶0.7据表分析，制备原生质体的最佳组合是第_组，叶片解离程度主要取决于_的浓度。制备的原生质体应置

2、于浓度_马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。（2）为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的_（填“叶片”或“幼根”）为材料制备的原生质体进行融合。把两种原生质体置于加入_的溶液中促融。（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行_后用碱性染料染色并制片，显微镜下对_期的细胞进行染色体计数。（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行_抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种。1.（8分）（1）5 果胶酶 略高于（2）幼根 PEG（或“聚乙二醇”）（3）解离、漂洗 有丝分裂中 青枯病2.（8分）

3、为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是_。制备的培养基常用_法进行灭菌。K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4琼脂0.1g0.5g3g0.01g2g15g加至1L（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行_，用_法接种于固体培养基上。接种后的培养基_状态放入培养箱。 （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和_直径的比值，

4、筛选果胶酶高产菌株。（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的_（填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将_与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。2.（8分）（1）果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌（2）梯度稀释 （稀释）涂布 倒置（3）水解（或“透明”） 上清液 等量失活的粗提果胶酶3（8分）抗体的结构如右图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。 （1）抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为_。（2）取免疫后小鼠的B淋巴细

5、胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_检测以获得具有_特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入_培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的_区和人抗体的_区组合而成。（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的_序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于_工程的产物。3.（8分）（1）p=a-

6、4（或“a=p+4”） （2）抗体 能无限增殖并产生专一（特定）抗体 CO2（恒温）（3）V C （4）氨基酸 蛋白质4（7分）嗜热土壤芽孢杆菌产生的-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：利用大肠杆菌表达BglB酶PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 。温度对BglB酶活性的影响据

7、图1、2可知，80保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。A50 B60 C70 D80利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽孢杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。A仅针对bglB基因进行诱变BbglB基因产生了定向突变CbglB基因可快速累积突变DbglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变4（7分）（1）嗜热土壤芽孢杆菌（2

8、）Nde BamH（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶（4）失活 B（5）A、C5. （9分）菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。图11是获得转基因菊花的技术流程，请据图回答：（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感。）图图11（1）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用_处理土壤农杆菌，使其处于感受态。（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够_，并将 转移至受体细胞的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的_上，最终形成转基因植株。（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和_的培养基中，在适

9、宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。（4）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据_的核苷酸序列设计特异引物，以_为模板进行第一轮扩增。（5）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。组别死亡率（%）实验组转基因植株160.00转基因植株253.33对照组13.33对照组应饲喂等量的_。据表分析，_差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。5.（9分）（1）Ca2+（或“CaCl2”） （2）感染菊花（或“植物”）细胞 T-DNA 染色体DNA（3）卡那霉素（4）抗虫基因（目的基因） 转基因菊花的DNA（或“含目的基因的

10、菊花DNA”） （5）非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物 实验组与对照组死亡率 6.核基因编码的蛋白质在细胞内的运输取决于自身的氨基酸序列中是否包含了信号序列以及信号序列的差异，如下图所示。（1）研究发现，经过程进入内质网的多肽，在内质网中折叠成为具有一定_的蛋白质，过程输出的蛋白质并不包含信号序列，推测其原因是_。经过程形成的蛋白质经过途径送往溶酶体、成为膜蛋白或_。（2）在内质网中未折叠或错误折叠的蛋白质，会在内质网中大量堆积，此时细胞通过改变基因表达减少新蛋白质的合成，或增加识别并降解错误折叠蛋白质的相关分子，进行细胞水平的_调节。（3）某些蛋白质经、过程进入线粒体、叶绿体时，需要膜

11、上_的协助。线粒体和叶绿体所需的蛋白质部分来自、过程，部分在_的指导下合成。（4）某些蛋白质经过程进入细胞核需要通过_（结构），这一过程具有_性。（5）除了图中以外，送往不同细胞结构的蛋白质具有_，这是细胞内蛋白质定向运输所必须的。6.（1）空间结构 信号序列在内质网中被（酶）切除（水解） 分泌蛋白（或“分泌至细胞外”）（2）反馈（3）蛋白质（或“膜蛋白”） 线粒体或叶绿体基因（DNA）（4）核孔 选择（5）不同的信号序列7.(2010江苏高考,27)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题: (1)一个图1所示的质粒分子经Sma切割前后,分别含有 个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造,插入的Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma切割,原因是 。 (4)与只使用EcoR相比较,使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以 防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。 (5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。 (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 (7)为了