高效液相色谱仪验证方案

1、LC-10AT高效液相色谱仪验证方案一、概述LC-10AT型高效液相色谱仪为岛津公司生产的产品，为了确保使用该仪器检 测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划 对该仪器进行必要的验证。二、验证目的确认LC-10AT高效液相色谱仪的运行、性能确认符合相应的要求，为日常 检验提供准确的检测结果。三、验证依据及标准药品GMP指南2010年版LC-10AT型高效液相色谱仪标准操作规程中国药典2010年版二部附录四、验证判断标准：运行确认判断标准：安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该 仪器运行正常。性能确认判断标准：符合中国药典2010年版二部附录要求。五、验证确认

2、1、再确认仪器名称：型号：生产厂家：所在部门和房间：1.1检查有关资料完整性。名称是否齐全存放处LC-10AT高效液相色谱仪使用说明书SPD-10AV紫外-可见光检测器使用说明 书柱恒温控制箱使用手册合格证保修卡备件清单检定合格证仪器使用记录1.2安装场地项目要求检查情况位置应无强震动源，无强电磁干扰源，通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度2030。，全天温度变化较小相对湿度20 85%电电源AC220V22V、50HZ+1HZ路接地应接地单项结论：检测人：日期：年 月 日复核人：日期：年 月 日2、运行确认：严格按LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪

3、器进行 运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作步骤合格标准结果打开/关闭电源按下电源开关“打开”电源，再次按下电源开关“关闭”电源首次打开电源开关，显示矩阵中所有点，所有指示灯亮起自动检测内存，通过后，短暂显示控制程序版本（ROM版本）显示ROM版本后，出现初始屏幕，状态指示灯变绿色以上程序完成后，可对仪器进行操作操作前准备仪器出厂前，使用氮对泵和泵内部的管路进行清洗并已干燥。在最 初使用（安装后）前，必须先使用甲醇运行一段时间泵，以排出泵流 路中的空气，然后才可以接收用于分析的流动相。将约100ml甲醇倒入量杯中；将吸滤头放入量杯中；将SUS管一 端连接到泵出样口，另一端放入

4、量杯中；将排液管一端连接到排液 管连接出入口，另一端放入废液瓶中打开电源，仪器自动完成初始化将排液阀旋钮逆时钟旋转180以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min, 顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀按“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”， 泵停止，泵指示灯灭以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值在开始操作前检查压力上下限的值将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180，按“CE”返回初始屏幕，检查显示压力值是否在-0.

5、3至0.3MPa之间检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求按“ purge ”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵 停止，泵指示灯灭单项结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日3、性能确认3.1高压恒流泵3.1.1流量准确度可执行标准：V3% （以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动 相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0ml/min六段，在 流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查 表，即得。

6、流量设定值（ml/min）0.51.01.52.02.53.010分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积（ml）实际每分钟流出量（ml/min）流量准确度（%）3.1.2流量精确度可执行标准：V0.3% （0.997ml/min1.003ml/min，以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。次数1234510分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积（ml）实际每分钟流出量（ml/min）流量精确度（%）结论：检测人

7、：日期：年 月 日复核人：日期：年 月 日3.1.3压力范围可执行标准：0.2MPa设定值测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲 管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。设定值分别为：10.0Mpa、20.0Mpa、30.0Mpa结论：检测人：日期：年 月日复核人：日期：年 月日3.2柱温箱3.2.1温度准确度可执行标准：V2C测试方法：将两个数显式温度计的探头放置于柱温箱内（约为安装色谱柱的 进口及出口位置），探头导线由输液管路位置引出，盖上箱盖，分别依次设定温 度25C、40C后待温度稳定后读取示值。温定设定值25 C40 C显示温度（

8、C）实际测得温度（C）温度准确度（C）结论：检测人：日期：年 月日复核人：日期：年 月日3.2.2温度精密度可执行标准：V1，C测试方法：将两个数显式温度计的探头放置于柱温箱内（约为安装色谱柱的 进口及出口位置），探头导线由输液管路位置引出，盖上箱盖，分别依次设定温度40C后待温度稳定每小时后读取示值一次。温定设定值40 C时间显示温度（C）实际测得温度（C）温度准确度（C）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日3.3 SPD-10A紫外可见光液相色谱检测器 3.3.1噪声与漂移可执行标准：噪声 V 1.0 X 10-2mv（250nm）, 漂移 V 5.0 X 10-2mv/hr 测

9、试方法：将仪器各部连接好，紫外检测器调至250nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min,待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间半小时，观察并记录 测试结果。测试图谱见基线漂移测试。结论：检测人：日期：年 月日复核人：日期：年 月日3.3.2进样精密度和残留可执行标准：精密度（峰面积）RSDl%,（峰高）RSD2.0%残留（峰面积）0.2%,（峰高）0.4%测试方法：流动相以甲醇：水=10： 90 ,检测波长：254nm,流速：1.0ml/min , 进样量：20p 1，柱温:35C。精密称取阿昔洛韦对照品25mg于25ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液2.5m 1使溶液，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml于100ml结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日3.3.3最小检出量可执行标准：检出量为1.0X 10-8g/ml,以萘为样品测试方法：精密称定萘适量用甲醇溶解并稀释成 流动相，精密量取20p