罗氏试剂盒说明书 S10012177293001V5

1、12177293001V5S100 2007-08, V 5 中文 6/6 Elecsys 和 cobas e 分析仪03175243 190 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：S100的检测结果与检测方法密切相关。因此实验室结果报告应注明检测方法。不同检测方法间的结果不能直接比较，以免引起临床解释的错误。在疗效观察过程中，如果检测方法变动，必须使用原检测方法同时平行测定。主要用途用于体外定量检测人血清中S100(S100A1B和S100BB)。临床可应用于

2、. 恶性黑色素瘤的辅助治疗（Elecsys S100检测作为恶性黑色素瘤的诊断指标不可靠）。. 结合临床症状和影像学检查辅助评价脑损伤的可能性。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。临床应用S100是隶属于钙结合蛋白多基因家族的一种二聚体蛋白，分子量约为10.5kD的。1，2。S100A1()和S100B（）是首先发现的成员，最初由Moore作为牛脑中的一种不能化学分离的混合物，由于能够100饱和溶于硫酸铵溶液中，故命名为S100。至今已至少有21种不同的S100家族成员被鉴定。4S100A1和S100B由中枢神经系统细胞表达，特别是星型神经胶

3、质细胞，黑色素瘤细胞和其它一些组织也能有一定程度的表达。这种由A1和B1的异型或同型二聚体组成的蛋白质，具有多种调节细胞内、外活性的功能。1，5，6恶性黑色素瘤患者，特别是II、III和IV期患者，血清S100浓度升高可预示其疾病的进展情况。连续检测对于疗效的评估非常有用。7,8,9,10,11,12,13此外多种类型的大脑损伤，CSF(脑脊液)中S100的浓度会升高，并能释放到血循环中。多种疾病导致的脑损伤，如脑外伤14，15,16,17,18,19或中风的患者血清中能检测出S100。20，21，22检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：20l标本、生物素化的S100单克隆特

4、异性抗体和钌（Ru）a标记的S100特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒

5、，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗S100抗体（灰盖），每瓶，9ml；生物素化的抗S100单克隆抗体（小鼠），浓度1.0mg/L，磷酸缓冲液50mmol/L，pH 7.2；防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗S100抗体（黑盖），每瓶，9ml，钌标记的抗S100单克隆抗体（小鼠）复合物，浓度1.0mg/L，磷酸缓冲液50mmol/l，pH7.2；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1

6、和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys S100试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析仪Elecsys 1010上4周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时）样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集

7、。不能使用血浆标本。稳定性：15-25可保存8小时；2-8可保存2天；-20可保存3个月。20选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。添加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”17章节。需要的物品（未提供）货号032898

8、34, S100 CalSet, 规格4 x1 ml货号03330648, PreciControl S100，规格2 x2ml，分别为PreciControl S100 1和2实验室基础设备Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346, Elecsys SysWash, 1 x 500

9、mL 附加洗液货号11933159, SysClean 适配器 货号11706829, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反应管或者货号11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反应管货号11706799, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023141, PC/CC杯, 12个用于在检

10、测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137,反应杯/吸头 组合装84反应杯/吸头 组合装48盒,废物袋 货号03023150, WasteLiner,废物袋 货号03027651,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息

11、可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱。定标溯源性：该检测方法可溯源至S100 /蛋白称量法。每套Elecsys S100试剂的条码标签上均含

12、有其批特异的定标信息。使用Elecsys S100定标液可调整预设置的定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控可使用Elecsys PreciControl S100 1和2进行质量控制。其他合适的质控品也适用。各浓度质控至少每24

13、小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位是mg/L，ng/mL或pg/mL。干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素428mol/L或25 mg/dL）, 溶血（血红蛋白0.621mmol/L或 1.0g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 1500mg/dL)和生物素50ng/mL或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。检测结果不受类风湿因子影响（RF1000 IU/ml）。

14、S100检测不受hook效应影响（S100浓度10 ug/mL）体外对18种常用药物进行试验未发现会影响检测结果。由于使用鼠源性的单克隆抗体，接受鼠源性单克隆抗体诊疗过程的病人会造成错误结果。少数病例中高浓度的钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.005-39g/L（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告39g/L。稀释高于检测范围的标本可用Elecsys S100 Cal1或S100阴性血清稀释。不推荐使用Elecsys通用稀释液。建议1:5手工稀释。稀释标

15、本的S100浓度必须高于1g/L。手工稀释结果应乘稀释倍数。期望值表面健康人群和恶性黑色素瘤患者使用Elecsys S100检测表面健康人群、恶性黑色素瘤患者以及不同肿瘤分期随访的结果如下表：b)95%表面健康人分布位点的样本量c)无肿瘤诊断依据脑损伤的成年患者发生轻微颅脑外伤（格拉斯哥昏迷计分GCS：13-15分）并且至少有一种临床症状表现的患者在3小时内进行Elecsys S100测定。并且6小时内必须进行CCT（头颅计算机X线断层摄影术）检查。以表面健康人群的95%位点作为cutoff值，通过与CCT参考比较获得以下结果：NPV（阴性预期值）99.7%，PPV（阳性预期值）11%，灵敏度

16、98.8%，特异度32.9%（95% 可信区间为：NPV 99.1-100%，PPV 8.8-13.3%,灵敏度 96.5-100%，特异性 30-35.9%）。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清样本和质控品验证重复性，按照NCCLS的EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。批内精密度由MODULAR ANALYTICS E170分析仪完成，n=21。下面是获得的结果。分析灵敏度（最低检出限）0.005

17、g/L最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床恶性黑色素瘤患者的血清标本比较Elecsys S100 检测（y） 和Liamat Sangtec100(X1)和Liamat Sangtec100(X2)的检测结果，相关性数据如下：Passing/Bablok23 Elecsys/Liamat(X1)y = 0.550 x1 +0.025 T = 0.729样本数：934 样本比较的浓度范围约为0.009.87g/L。Elecsys/Liamat(X2)y = 0.783x2 +0

18、.003 T = 0.857样本数：379 样本比较的浓度范围约为0.012.08g/L。分析特异性与S100A1（）二聚体的交叉反应率1%。功能灵敏度0.02g/L功能灵敏度是指批间变异系数（CV）为20时所对应的分析物最低浓度。参考文献1. Donato R. S100: a multigenic family of calcium-modulated proteins of the EF-hand type with intacellular and extracellular functional roles. Int J Biochem Cell Biol 2001;33:637-6

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