弧菌属Vibrio pacini的检验

1、弧菌属Vibrio pacini的检验1、菌体大小与形态:G-，菌体短小，直或弯杆菌（0.5-0.8m 1.4-2.6m），以1根或几根极生鞭毛运动，无荚膜，无芽孢。2、培养特性与代谢特征:多数在普通培养基上生长良好；兼性厌氧，具呼吸和发酵两种代谢类型。所有的种可在25生长，多数在30生长。pH值6.0-9.0。Na+刺激所有种生长，并且为多数种所必需。氧化酶阳性。不产色或产黄色。可代谢D-葡萄糖和其他碳水化合物，产酸不产气。还原硝酸盐(产气弧菌、梅氏弧菌和病海鱼弧菌除外)。多数种发酵麦芽糖、甘露糖和海藻糖。多数对弧菌抑制剂O/129敏感。生态特性:发现于各种盐度的水生生境，最常见于海、海岸、

2、海面和海生动物的消化道，有的在淡水中也有发现。有的是人病原菌，有的对海洋脊椎和无脊椎动物致病。 最重要的人病原菌：霍乱弧菌（V.cholerea）可引起霍乱；副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）污染过的鱼和贝类引起人食物中毒；创伤弧菌（V.vulnificus）可引起高致死性的败血症。弧菌检验方法：（一）霍乱弧菌 (V. cholerae)分型：霍乱弧菌血清学分型生物学性状：革兰阴性 弯曲弧形或逗点状，首尾相接鱼群样平行排列单端极鞭毛，有普通菌毛和性菌毛悬滴观察：细菌运动，非常活泼，呈穿梭样或流星状。培养特性：霍乱弧菌检验方法：鉴别试验;霍乱红试验、粘丝试验、O/129敏感试验

3、、鸡红细胞凝集试验、多粘菌素B敏感试验、噬菌体裂解试验、耐盐培养试验霍乱红试验：粘丝试验：、O/129敏感试验鸡红细胞凝集试验多粘菌素B敏感试验噬菌体裂解试验V-P试验耐盐试验（二）副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）具嗜盐性，为海产鱼弧菌病的病原菌，一般在20-28引起鱼发病。人类食用或接触污染本菌的鱼、器具类等引致食物中毒。1、形态特征培养特性：系革兰阴性菌 呈弧状、杆状、丝状等形态。菌体一端有单鞭毛、运动活泼、无荚膜、无芽孢2、培养特性兼性厌氧,菌落中等大小，培养24h时直径约2mm。最适生长温度是30-37，42仍可生长。生长pH 5.6-9.6(8.0)。代时10-2

4、0 min，增殖速度是大肠杆菌和志贺氏菌的2倍。多数菌株对弧菌抑制剂O/129不敏感，是弧菌属中少有的例外。生长繁殖时必须有钠离子。在含2.5% NaCl培养基上生长良好，不含NaCl的培养基不能生长，具嗜盐性。培养特征：绵羊血平板不溶血， TCBS琼脂上的菌落发绿, 利用甘露醇。临床意义：鉴定依据：致病性与毒力因子致病菌株多数能裂解人、兔等红细胞，可用溶血反应区分致病与非致病株，称为神奈川(Kanagawa)试验。溶血性菌株：产生耐热直接溶血素(Thermostable Direct Haemolysin, TDH)，属穿孔毒素，为不含糖或脂的蛋白质，MW32-44kD，与霍乱弧菌非01群及拟态弧菌产生的TDH相似。在神奈川试验阴性的菌株中，还发现一种不耐热的毒素磷酸脂酶A2，是本菌的毒力因子。人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒，潜伏期2-36h，表现为水样腹泻、呕吐及发热，一般能很快康复。4、微生物学诊断取病变组织接种嗜盐菌选择培养基或SS平板。挑取可疑菌落进一步作生化试验，神奈川试验检测其毒素，也可用PCR技术检测毒素基因。由副溶血弧菌引起的对虾红腿病，可取病变组织50g，剪碎后加入50ml灭菌的氯化钠庆大霉素增菌液，增菌18 h，在液面下无菌吸取3ml菌液