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文档简介

五呼吸系统标本下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色链球菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌，提示有上呼吸道感染。常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌。（一）标本采集时间晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。1.标本采集方法(1)自然咳痰法最常用的方法(2)气管镜下采集法(3)气管穿刺法(4)结核分枝杆菌标本收集法：收集24H痰液以提高阳性检出率。

（5）小儿取痰法压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受刺激咳嗽，可咳出肺部气管分泌物黏在拭子上.2、保存于运输取材后立即送检。结核杆菌和真菌培养时不能及时送检，4度保存。

操作流程（1）一般细菌涂片

脓性或血性制成薄涂片，革兰染色镜检（2）结核分枝杆菌涂片

干酪样痰液制成厚涂片，抗酸染色镜检（3）放线菌及诺卡菌涂片生理盐水反复洗涤数次。如含血痰液加蒸馏水溶解，挑取黄色颗粒（硫磺颗粒）或不透明着色斑点，加压盖片，高倍镜观察。

如见到末端粗杆状呈放线排列，在做抗酸及革兰染色3.培养（1）培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片。（2）痰标本培养前处理：痰液加入生理盐水15~20ml，震荡15~20秒后静置，将痰液放入另一个试管，再次用无菌盐水将痰洗涤3次，痰液均质化，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6)，37ºC水浴90min，使痰液均质化后备用。

（3）分离培养

1）普通培养处理后痰液接种到血平板、巧克力平板、中国蓝/麦康凯平板上分别在普通和CO2环境，35度18~24小时培养，观察菌落，初步鉴定。3）肺团菌属培养均质化痰液接种于血琼脂，巧克力琼脂和BCYE琼脂平板上。35度5~10%CO2培养。生长小于24小时，不是军团菌。大于24小时，只在BCYE琼脂生长，可能是军团菌。4）厌氧菌培养1）初步报告：涂片染色，电话告知临床医生，同时做药敏试验，结果告知医生。报告“找到革兰X性X菌，形似X菌”抗酸染色阳性报告“找到抗酸杆菌”抗酸染色阴性，革兰染色中央革兰阳性

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