授课免疫耐受

免疫耐受是指机体免疫系统接触抗原后导致的特异性免疫无应答性和低应答性。不同于免疫缺陷和药物对免疫系统的普遍抑制。免疫耐受的基本概念第一页，共四十五页。一、免疫耐受概述免疫耐受：是指免疫活性细胞接触抗原时所表现的对该抗原的特异性免疫无应答或低应答状态。即抗原不能有效激活T、B淋巴细胞，完成免疫应答，产生免疫效应。负免疫应答抗原特异性、记忆性、可转移性和非遗传性固有免疫耐受和获得性免疫耐受第二页，共四十五页。1、胚胎期及新生期接触抗原所致免疫耐受

----天然免疫耐受现象

不成熟T、B接触自身和外来Ag发生耐受，终生2、后天接触抗原导致的免疫耐受

----获得性免疫耐受现象

T、B因多种因素对原本应答的Ag发生耐受，非终生免疫耐受的表现第三页，共四十五页。Owen的观察1945年异卵双生牛：血型嵌合体(chimeras)，皮片移植互不排斥，无关牛皮片排斥第四页，共四十五页。1945年Owen免疫耐受的研究简史天然免疫耐受第五页，共四十五页。Medawar等的实验证实---实验性免疫耐受

1953年，Medawar：获得性免疫耐受

第六页，共四十五页。Medawar胚胎诱导耐受实验(1953年)人工免疫耐受第七页，共四十五页。Medawar的人工免疫耐受实验第八页，共四十五页。免疫原耐受原免疫原耐受原免疫反应+++4-6周4-6周7-14天7-14天免疫正应答免疫负应答第九页，共四十五页。免疫正应答和免疫耐受的异同

免疫正应答免疫耐受抗原刺激需要需要潜伏期有有抗原特异性++免疫记忆++免疫反应强无或弱效应排斥异己保护自身

第十页，共四十五页。自身耐受两个技术问题一、不可能通过功能分析来鉴定自身反应性淋巴细胞，因为自身反应性淋巴细胞或被清除或是无反应性；二、在正常动物和人类非常困难或不可能知道自身抗原的性质、分布及表达水平，特别是那些和T细胞相关的MHC抗原肽。第十一页，共四十五页。

过去研究免疫耐受的方法将抗原或外来细胞植入动物体内，观察在不同情况下，T、B细胞的反应情况。这些方法主要用于研究人工诱导的免疫耐受，但不完全适用于阐明自身免疫耐受现象。第十二页，共四十五页。

转基因技术研究自身耐受

将重排的抗原受体基因转入小鼠，在小鼠的T、B淋巴细胞中表达，由于等位基因排斥的作用，转入的抗原受体基因就会抑制内源性基因的重组，从而在转基因小鼠体内就有很大一部分T、B淋巴细胞表达导入的由转基因编码的抗原受体，因此就可对那些已知特异性的淋巴细胞进行检测和定量分析。

转基因技术的另一应用是在不同组织中表达已知蛋白，这些转基因编码的抗原在动物一生中均存在，因而这些抗原对小鼠来说是有效的自身抗原。第十三页，共四十五页。二、免疫耐受形成和维持的因素

一、抗原方面1.抗原的结构和性质耐受原：小分子、可溶性、单体免疫原：大分子、颗粒性、聚合体2.抗原剂量TI抗原：高剂量B细胞耐受TD抗原：高剂量T、B细胞耐受（高带耐受）

低剂量T细胞耐受（低带耐受）第十四页，共四十五页。T细胞耐受易于诱导，所需抗原量低，耐受持续时间长（数月~数年）B细胞耐受的诱导，需要较大剂量的抗原，B细胞耐受持续时间短（数周）T细胞耐受和B细胞耐受第十五页，共四十五页。第十六页，共四十五页。3.抗原免疫途径静脉注射/口服>腹腔注射>皮下/肌肉注射4.其他因素用佐剂：刺激辅助性T细胞，促进引起免疫应答无佐剂：无免疫原性或耐受原性，促进引起免疫

耐受一、抗原方面第十七页，共四十五页。二、机体方面*免疫系统的成熟程度（年龄）胚胎期＞新生期＞成年期*动物的种属和品系（遗传）大鼠、小鼠＞兔、有蹄类、灵长类*机体生理状态用免疫抑制剂破坏成熟淋巴细胞，造成类似新生期免疫不成熟状态，有利于诱导免疫耐受。第十八页，共四十五页。*中枢免疫耐受

胚胎期免疫系统未成熟的T、B细胞在中枢

免疫器官接触抗原所形成的免疫耐受。*外周免疫耐受

成熟的T、B细胞在外周淋巴器官接触

抗原所形成的免疫耐受。三、免疫耐受的机制第十九页，共四十五页。T细胞免疫耐受（一）中枢耐受（二）外周耐受第二十页，共四十五页。免疫耐受机制的克隆清除学说（一）T细胞中枢免疫耐受第二十一页，共四十五页。（一）T细胞中枢免疫耐受第二十二页，共四十五页。（二）T细胞外周免疫耐受*自身反应性淋巴细胞克隆清除*自身反应性淋巴细胞克隆无能*自身反应性淋巴细胞克隆忽视*自身反应性淋巴细胞克隆抑制第二十三页，共四十五页。1、克隆清除

Clonaldeletion

Activation-inducedcelldeath(AICD)第二十四页，共四十五页。2、克隆无能Clonalanergy第二十五页，共四十五页。

T细胞无能反应a.缺乏第二信号CD28-B7或信号弱b.增殖活化信号传递受阻c.抗原浓度低不能激活免疫细胞第二十六页，共四十五页。T细胞活化T细胞失能MHC-IIMHC-IITCRTCR共刺激信号APCAPCT细胞T细胞克隆失能的机制第二十七页，共四十五页。3、克隆忽视ClonalignoranceT细胞克隆的TCR对组织特异性自身抗原的亲和力低,或这类自身抗原浓度很低,经APC提呈,不足以活化相应的初始T细胞,这种自身应答T细胞克隆与相应组织特异性抗原并存,在正常情况下,不引起自身免疫病的发生,称为克隆忽视。

第二十八页，共四十五页。4、调节性T细胞的作用第二十九页，共四十五页。细胞因子在抑制细胞免疫应答中的作用第三十页，共四十五页。B细胞免疫耐受（一）中枢耐受（二）外周耐受第三十一页，共四十五页。（一）中枢免疫耐受1、克隆清除机制（阴性选择）自身反应性B细胞在骨髓发育过程中，其BCR与微环境基质细胞表面表达的多价自身抗原结合，使SmIg发生交联，导致未成熟B细胞凋亡。第三十二页，共四十五页。2、克隆无能骨髓中未成熟Ｂ细胞之BCR与可溶性自身抗原的亲和力低，不足以引起克隆清除，而转变为“无能”Ｂ细胞，不表达SmIgM，虽能表达正常水平SmIgD，但由于存在信号传导障碍，也不能诱导B细胞激活。第三十三页，共四十五页。第三十四页，共四十五页。（二）外周免疫耐受1、未进入淋巴滤泡而凋亡2、缺少刺激信号而凋亡3、AICD致B细胞凋亡4、成熟B细胞处于无能状态第三十五页，共四十五页。1、未进入淋巴滤泡而凋亡Cyster等提出B细胞竞争进入淋巴滤泡的概念：只有进入淋巴滤泡的B细胞才能继续分化成抗体生成细胞和记忆性细胞。当B细胞在外周淋巴器官与自身抗原相遇时，失去进入淋巴滤泡的能力，而不能产生针对自身抗原的抗体。未进入的B细胞只能在胸腺依赖区停留1-3天，然后死亡。第三十六页，共四十五页。2、缺少刺激信号而凋亡无能B细胞在缺少细胞因子

（如IL-2、IL-4）或CD4+T细胞

提供的CD40L协同刺激信号时，

则发生凋亡。第三十七页，共四十五页。3、AICD致B细胞凋亡活化的CD4+T细胞能表达FasL，

与B细胞上的Fas分子结合，

启动了B细胞凋亡信号第三十八页，共四十五页。4、成熟B细胞处于无能状态成熟B细胞与大量可溶性自身抗原

接触后，可导致SmIgM表达的下调，

成为“无能”B细胞。“无能”B细胞对抗原－抗原受体

信号的传递能力显著下降。第三十九页，共四十五页。T细胞耐受与B细胞耐受的区别T细胞耐受B细胞耐受诱导耐受的

胸腺；外周骨髓；外周主要部位对耐受敏感

CD4+CD8+双阳性胸腺细胞未成熟B细胞（IgM+

IgD-）的成熟阶段耐受诱导中枢：在胸腺对抗原的高亲和力识别中枢：在骨髓对多价抗原的高亲和力识别刺激外周：APC提呈抗原缺乏共刺激分子外周：抗原识别时缺乏T细胞辅助自身抗原反复刺激耐受的主要机制中枢耐受：克隆清除（凋亡）中枢耐受：克隆清除（凋亡），克隆无能外周耐受：克隆无能，AICD，抑制外周耐受：克隆无能，未进入淋巴滤泡第四十页，共四十五页。*诱导口服耐受*阻断免疫应答诱导免疫耐受*移植骨髓及胸腺,建立或恢复免疫耐受免疫耐受与临床医学(一)建立免疫耐受第四十一页，共四十五页。第四十二页，共四十五页。*诱导调节性T细胞*耐受性DC*基因改造第四十三页，共四十五页。*主动免疫激发和增强免疫应答*细胞因子的合理使用(二)打破免疫耐受第四