血凝试验常见问题课件

血凝试验常见问题小结陈永玲常见问题小结病人结果异常质控出控定标失败其它问题出现病人结果异常怎么办？病人结果异常质控在控：则可能是样品本身的原因质控出控：参见质控失控处理样本问题如果重复测定一个样本，并在测定之前及之后都运行了质控，并且质控结果良好，那么毋庸置疑，结果异常的原因是由样本引起的。

样本问题样本是否有凝块？样本放置了多长时间？样本的离心是否到位？抗凝剂种类是否正确？比例是否正确？（推荐使用106mmol/L或109mmol/L的枸橼酸钠1:9比例抗凝）采血过程是否顺利？是否正确加入试管？加入样本杯的样本量是否足够？乏血小板血浆何为乏血小板血浆？PLT<10,000/uL为什么要使用乏血小板血浆？血小板的膜磷脂可以直接参与凝血过程活化的血小板释放能够结合肝素的血小板因子4（PF4）血小板的膜磷脂会抑制狼疮抗凝物的活性，影响LAC的检测样本离心离心力：RCF=1500g,15min

RCF(g)=1118xr(rpm/1000)2

RCF:RelativeCentrifugeForce相对离心力rpm:rotationsperminute每分钟转速r:radius(cm)离心机半径一般离心机约3000转，离心15分钟温度带来的问题要迅速冷冻/迅速复溶因子降解寒冷会激活FactorVII,缩短PT时间温度低于-70℃，VIII降解迅速不能使用除霜冰箱：自动除霜会使样本变质抗凝剂的使用临床常用106mmol/L（3.02%）或者109mmol/L（3.2%）的枸橼酸钠作为凝血试验的抗凝剂ICSH推荐使用109mmol/L（3.2%）的枸橼酸钠109mmol/L的抗凝剂，PT、APTT的结果略长于106mmol/L含有肝素的样本受影响更大INR会有明显的区别抗凝剂的使用抗凝管内血抽少了（<90%）过度抗凝：过量的抗凝剂会和试剂中的钙起反应，导致PT，APTT时间偏长血抽多了抗凝不足：样本可能形成微小凝块导致结果错误样本HCT过高（>55%）必须调节和校准抗凝剂的用量C=1.85X10-3(100-H)xVC=抗凝剂的体积(ml)V=全血的体积(ml)H=HCT(%)比如：HCT=60%C=1.85X10-3(100-60)x1.8C=0.13mlAPTT时间偏长可能原因（样本）患者使用过肝素治疗未加盖的标本导致CO2丢失，血浆pH值升高，引起FactorV活性减低样本HCT过高，未进行抗凝剂用量校准，致使抗凝比例过高已经发生部分凝固的样本不恰当的样本保存有狼疮抗凝物LAC因子缺乏或者有因子抑制物APTT时间偏短的可能原因（样本）使用玻璃管抽血，激活了血浆XII穿刺针位置不对PT时间偏长的可能原因（样本）部分凝固的样本导致凝血因子的消耗不恰当的冷冻和复溶样本导致因子的失活HCT高（>55%）的病人未进行抗凝剂用量的校准质控问题偶然误差系统误差质控结果突然变化（偶然误差）如果有可能，试用另一盒试剂，另一批号运输的试剂或另一批号的试剂运输问题-热应力（heatstress）通常受影响的试剂，反应性能降低是否使用冻过的试剂?试剂配置的问题？水的问题吸液不准的问题污染问题质控结果突然变化（偶然误差）反应杯Rotor/Cuvette问题批号改变清洗过或者反复使用仪器原因是否进行过系统保养或维修质控结果有持续性变化（系统误差）吸样针组件的问题：脏、有蛋白或纤维沉积稀释系统问题-漏液试剂保存试剂接近效期质控出控问题分析流程重新复溶一瓶新的质控品重新测试干粉质控品在使用之前必须确保充分溶解开瓶有效期内使用质控品保存多长时间了？质控品不用时应当冷冻保存质控品肉眼状态如何？有无明显的凝块等？是否更换过新购买的质控？是否重新定标了？定标失败？定标问题分析检查定标曲线的Y轴，确定起始点的值和以前的定标曲线的起始点的值是否接近（应该是接近的），同时检查定标点的连续性。如果本次定标结果和以往定标结果有明显漂移，则可能是试剂系统有问题（试剂和定标液）。如果各点之间连续性差，则应当检查仪器（流路系统）试剂问题检查设置是否正确，如果试验不是IL锁定试验，检查其它参数设置是否正确试剂准备注意事项将试剂、质控、校准品从冰箱取出仅仅取出你所需要的立即将整盒包装放回冰箱复溶试剂时将日期标注在试剂瓶上已备查看将需要的质控品和校准品倒入小杯子将瓶内剩余物立即放回冰箱质控品和校准品在室温中放置时间越长，降解越快不要将已经使用过的质控品和校准品倒回原瓶试剂准备注意事项复溶试剂时应当使用干净的吸管如果使用清洗过的移液管，要保证不要残留清洗剂不要将移液管保存在盛有水的烧杯中，每次溶解试剂时要使用一根新的移液管注意盛装稀释试剂用水的容器将剩水弃去，在加入新水定期清洗容器，防止污染保持水温恒定，不要有时用过冷的水，有时用温水来复溶试剂如果怀疑有细菌污染，可以将容器及水源作细菌培养鉴定试剂准备注意事项复溶试剂时不要盖错试剂瓶的盖子不要将用过的剩余试剂倒入新试剂瓶内混用，否则有可能会污染整瓶试剂当收到一批新近运来的试剂时：在试剂盒上标注日期，并记录保存温度需冷藏的试剂在运输时也需要保持适当的温度，如果你收到试剂时，发现没有按要求保存，可以记录温度标注在该盒试剂上，当使用这盒试剂时，如果出现问题，便于查找原因仪器问题分析仪器精密度差：管路堵塞，管道被压紧，管道连接不好，针堵了或者有沉积物放错试剂仪器污染分析区脏光路问题针的位置不对需要系统保养系统问题三、特殊问题如果总是发现第一个样本出问题，则可能是吸样或流路问题。按下列流程检查：检查试剂瓶有无气泡检查管路有无气泡冲洗，去除气泡执行针清洗程序CleaningProcedure/Prime确定针位，必要时调整在第一、第二个位置做质控如果问题依然存在，请维修工程师检查流路三、特殊问题如果偶见或经常发现样本或质控重复性不好，则可能的原因有：试剂瓶有无气泡检查管路组件有无气泡?针位是否正确，反应池是否有污迹反应杯有无重