链霉素的生产课件

链霉素的生产班级：生物制药1411

组别：第七组

目录

一、链霉素介绍二、链霉素的生产原理三、链霉素的生产四、链霉素的质量检查和检查方法五、EHS(环境、健康、安全)

一、链霉素概述1.简介链霉素（streptomycin）是一种氨基葡萄糖型抗生素，分子式C21H39N7O12。1943年美国S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。从此，结核杆菌肆虐人类生命几千年的历史得以有了遏制的希望。5.用途链霉素为微生物源杀细菌剂，可有效防治植物细菌病害，例如苹果、梨火疫病、烟草野火病、蓝霉病、白菜软腐病、番茄细菌性斑腐病、晚疫病、马铃薯种薯腐烂病、黑胫病、黄瓜角斑病、霜霉病、菜豆霜霉病、细菌性疫病、芹菜细菌性疫病、芝麻细菌性叶斑病。4.结构6.副作用1)急性毒性反应：麻木、头晕、耳聋等为多见，多在用药后10天内出现，最短者于注射后20分钟内出现麻木，持续1～6小时，重者可延续24小时尚不消失。亦有发生口周麻木、头晕、运动失调、头痛、乏力、呕吐、颜面潮红，严重者亦有发生大汗、呼吸困难、痉挛不易与过敏性休克区分者。但急性反应多见累积或渐次加重现象，部分病例仅在开始注射时出现反应，以后即消失。链霉素的急性反应一般认为与其所含杂质有关。

2)慢性毒性反应：①第八对颅神经损害；a)耳前庭系损害，主要表现眩晕、头痛、经常指误等。以后出现运动性共济失调等；b)耳蜗系损害：一般发生较迟，常在用药数月后或停药以后发生。其主要症状是耳鸣和耳聋。②对局部的刺激：肌注局部疼痛、肿胀、无菌性脓肿等，鞘内注射可引起发热、苍白、激动、胃纳减退、抽搐、休克，严重者可导致死亡等。③对肾脏的损害：链霉素对肾脏的损害较轻，表现为蛋白尿和管型尿，部分出现肾功能暂时减退，停药后可恢复，严重的永久性肾损害并不多见。④对骨髓的抑制：表现为白细胞、血小板减少，再生障碍性贫血及血细胞全少症等。以白细胞减少常见，再障及全血细胞减少偶见。⑤还有多毛症、结膜炎、关节痛、心肌炎、中毒性脑病等。二、链霉素的生产原理1.种子扩大培养原理

种子扩培是发酵工程的一个组成部分，其指将保存在沙土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养，最终获得一定数量和质量的纯种过程。其目的首先是处于接种量的需要与菌种的驯化，同时对于缩短发酵时间、保证生产水平也有帮助。4.摇瓶种子培养生产斜面的菌落接种到摇瓶种子培养中，经过培养基即得摇瓶种子。链霉素发酵经常使用摇瓶种子来接种种子罐。种子质量以菌丝阶段、发酵单位、菌丝粘度或浓度、糖氮代谢、种子液色泽和无菌检查为指标。摇瓶种子可以直接接种子罐，也可以在扩大培养，用培养所得的子瓶来接种。摇瓶培养的培养基成分为黄豆饼粉、葡萄糖、硫酸铵、碳酸钙等。三、链霉素的生产1.工艺流程

①种子扩培

斜面菌种——一级种子培养摇瓶——耳机种子培养（种子罐）——发酵

②发酵

原斜面孢子——斜面孢子——摇瓶种子——小罐种子——中罐种子——大罐发酵液

③链霉素提取发酵液的预处理——离子交换——脱色及精制2、摇瓶种子培养基：豆饼粉20g、淀粉40g、酵母膏5g、蛋白胨5g，硫酸铵3g，硫酸镁0.25g，磷酸二氢钾0.2g，碳酸钙4g，自来水1000ml、PH7.2-7.4。

配制：取干净三角烧瓶，250ml三角瓶分装培养基30-50ml，用棉塞包扎瓶口，再加牛皮纸包扎，在0.1Mpa下灭菌45-60min。

3、发酵培养基：葡萄糖

4%

黄豆饼粉0.8%

硫酸铵0.5%

玉米浆1.5%

磷酸盐

0.01%

碳酸钙0.04%

豆油0.2%3.发酵斜面孢子培养

将砂土管（或冷冻管）保持的链霉菌孢子接种到斜面培养基，于27℃下培养7天。

摇瓶种子培养

待斜面长满孢子后，制成悬浮液接入装有培养基的摇瓶中，于27℃下培养45-48小时，待菌丝生长旺盛。

种子罐扩大培养

取若干个摇瓶，合并其中的培养液将其接种10%于种子罐内已灭菌的培养基，通入无菌空气搅拌，在罐温27℃下培养62-63小时，然后接入发酵罐内已灭菌的培养基中，通入无菌空气，搅拌培养，在罐温27℃下，发酵约7-8天。4.提取工艺

①发酵液的预处理

发酵液用水稀释，草酸酸化至pH3.0左右，加热至75～80"C，通过离心分离或板框过滤，除去大量不溶性菌丝体、酸性蛋白、钙镁离子、培养基残渣等杂质，冷却至15℃以下，再用NaOH中和，得到符合离子交换工艺要求的澄清链霉素原液。

②离子交换

应用钠型弱酸性阳离子交换树脂110树脂或大孔D一152树脂进行交换，再用稀硫酸洗脱，收集高浓度洗脱液--链霉素硫酸盐溶液。此时链霉素含量由不到1％浓缩到20％。然后让霉素硫酸盐溶液再经磺酸型离子交换树脂脱盐，此时溶液呈酸性，用阴离子树脂中和，得到提纯液。或用强酸性阳离子交换树脂1×25树脂和弱碱性阴离子交换树脂703树脂组成的混合床脱盐中和得到提纯液。

③脱色及精制

将提纯液先经药用活性炭脱色处理，吸附色素和细菌内毒素，经减压蒸发，在45℃以下浓缩，得到精制液。此时链霉素含量由10％左右浓缩到45％。再经喷雾干燥得到白色或类白色的无菌粉末状的产品。四、质量检查和检查方法1、性状：白色或类白色粉末，无臭或微臭，有苦味。

2、酸度：

取本品，加水制成每1ml

中含20万单位的溶液，依法测定pH值应为4.5

～7.0

。

3、溶液的澄清度与颜色：取本品5

份，分别加水5ml，溶解后,溶液应澄清无色；如显浑浊，与2

号浊度标准液比较，均不得更浓；如显色，与各色5

号标准比色液比较，均不得更深。

4、干燥失重：

取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥4

小时，减失重量不得过6.0

％。

五、EHS(环境、健康、安全)

1、废液、废料、发酵菌种要处理达标后排放。

链霉素生产废水是一类含硫酸盐的高浓度有机废水，ＣＯＤ／ＳＯ２－比值一般为５～７，碳氮比偏低，ＢＯＤ５／Ｎ在４左右，同时废水中含有较多生化抑制物质，如甲醛、草酸、链霉素单位及其降解