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文档简介

目的要求

1、掌握血糖测定的原理-葡萄糖氧化酶法2、掌握大鼠的一般实验方法3、熟悉血糖含量的调节机制，明确肾上腺素和胰岛素对家兔血糖含量的影响。

实验原理

升糖激素与降糖激素的作用相互对抗又彼此协调，共同维持着血糖浓度的恒定。血糖肾上腺素胰岛素本实验通过分别给大鼠注射肾上腺素和胰岛素，作用一段时间后再分别采血，对比注射前后血糖浓度的变化，观察激素对血糖浓度的影响。本实验用葡萄糖氧化酶法测定血糖含量。葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2葡萄糖氧化酶2H2O2+4-AAP+酚

红色醌类化合物过氧化物酶其呈色深浅有葡萄糖含量成正比，在505nm处与同样处理的葡萄糖标准液进行比色，计算葡萄糖含量。

实验原理1、胰岛素注射液2、肾上腺素注射液3、葡萄糖测定试剂盒（葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法）

4、吸管、分光光度计、电热恒温水浴箱、碘酒棉球、酒精棉球、注射器等。

5、麻醉剂：乌拉坦：按大鼠0.5ml/100g。

实验试剂与器材（一）动物准备及取血1、动物准备及空腹采血

取禁食16小时大鼠一只，过磅称重，并记录体重。2、取血并测定注射激素前血糖水平大鼠断尾取血，用血糖仪测定血糖浓度（空腹血糖浓度）并记录“胰前”或“肾前”。3、注射激素按0.5ml/100g腹腔注射胰岛素或肾上腺素。记录注药时间。

实验步骤4、注射胰岛素或注射肾上腺素20分钟后，腹腔注射乌拉坦0.5ml/100g，麻醉，腹主动脉取血，标以“胰后”或“肾后”。5、将收集的血液置离心机运转5分钟(3000/min.r)，分离出血浆，制备样本管。大鼠，禁食16小时，称重并记录腹腔注射肾上腺素0.3ml/100g，记时20分钟断尾取血，用血糖仪测定大鼠注射激素前血糖水平，并记录胰前或肾前腹腔注射胰岛素0.3ml/100g，计时20分钟按0.5ml/100g，皮下注射乌拉坦，麻醉将麻醉后大鼠捆绑于解剖台上固定将收集血液置离心机运转5分钟(3000/min转)，分离出血浆，制备样本管。腹腔解剖，暴露腹主动脉，抗凝负压管取血，轻轻振荡，静置葡萄糖氧化酶法试剂盒，分别测定血糖含量，并记录“胰后”或“肾后”比较大鼠“胰前”或“胰后”血糖的差异以及“肾前”与“肾后”血糖的差异（二）血糖含量的测定样本管空白管血清10ul蒸馏水10ul酶试剂1ml1ml置37℃水浴5分钟，用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）。结果处理计算：

样本管吸光度（A）葡萄糖（mmol/L）＝——————×标准液浓度（5.55）

标准管吸光度（A）（0.24）

比较激素对血糖影响的百分数。本实验要求男女搭配,操作大鼠时要耐心大胆,特别注意不能放走大鼠.

大鼠注射激素后要放回大鼠笼!打开腹腔时不要用厚的劳保手套!换戴一次性手套.实验结束后统一收集大鼠尸体,仔细清理实验台面,不要留有血迹!

实验步骤讨论思考1、比较注射激素前、后血糖浓度的变化，这些变化说明什么？2、血糖主要有

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