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文档简介
肠杆菌科Enterobacteriaceae教学大纲肠道杆菌的共同特征及分类引起肠道感染的大肠埃希菌种类和致病特点大肠埃希菌的微生物学检查法大肠埃希菌的卫生细菌学检查及其意义EnterobacteriaceaeAheterogeneousgroupofG-rodsTheirnaturalhabitatistheintestinaltractofhumansandanimals(entericbacilli)FacultativeanaerobesoraerobesMostarenormalfloraRegularpathogenforhumans:Salmonella,Shigella,someE.coliMorethan30genera,120species返回肠杆菌科细菌的生物学特征形态与结构中等大小G-杆菌无芽胞周鞭毛菌毛培养兼性厌氧或需氧营养要求不高菌落混浊生长肠杆菌科细菌的生物学特征生化反应:活泼生化鉴定(biochemicaldifferentiation):发酵葡萄糖;触酶阳性;氧化酶阴性;硝酸盐还原阳性乳糖发酵致病菌:多不发酵乳糖非致病菌:多发酵乳糖O-F试验氧化型发酵型产碱型硝酸盐还原试验
阳性:红色阴性:淡黄色
抵抗力:不强易变异:多种引起通过接合转导融原性转换耐药性变异毒力性变异生化反应性变异菌毛或菌毛样结构荚膜或微荚膜外膜蛋白内毒素外毒素致病物质所致疾病
肠道感染腹泻、食物中毒、肠热症肠道外感染鼠疫(烈性传染病)、泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症返回鉴定原则
1.科间鉴别(表9-3)2.将肠杆菌科分为三大类(表9-4)3.属、种、群、型的区分4.肠杆菌科细菌综合鉴定流程返回科间鉴定:根据O/F试验、氧化酶试验、菌体形态和有无鞭毛科内鉴定:生化鉴定分为3个组PAD:苯丙氨酸脱氨酶;VP/葡萄糖酸盐利用试验PAD阴性、VP阴性PAD阴性、VP阳性PAD阳性、VP阴性属间鉴定肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
葡萄糖酸盐试验
阳性:黄绿色阴性:蓝色返回第14章
埃希菌属
Escherichia埃希氏菌属(Escherichia)是人类和动物肠道中的正常菌群以大肠埃希氏菌(E.coli)最为重要出生后数小时就进入肠道,并终生伴随重要的实验材料和研究对象:在分子生物学和基因工程实验中大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象形态染色0.4-0.7µm1-3µm短杆菌革兰染色阴性有鞭毛有菌毛培养特性与生化反应兼性厌氧营养要求不高生化反应活泼,发酵多种糖类绝大多数发酵乳糖典型E.coli:
IMViC:++--大肠埃希菌菌落特征(血平板)大肠埃希菌菌落特征(MAC)大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏痢疾杆菌菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。(18hr,37℃)在麦康凯培养基上的大肠埃希杆菌和福氏痢疾杆菌大肠埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)大肠埃希菌IMViC试验(++--)
右侧为对照(--++)
抗原结构O(菌体)抗原:170种以上H(鞭毛)抗原:56种以上K(荚膜)抗原:100种以上O111:K58:H2致病性致病物质1、侵袭力K抗原和菌毛与侵袭力有关。K抗原能抗吞噬,菌毛(又称定植因子)有粘附作用。2、内毒素3、肠毒素由ETEC产生的外毒素,可分为耐热肠毒素(ST)和不耐热肠毒素(LT)两种。均由质粒介导。LT与霍乱肠毒素作用机理相似,可使肠道细胞中cAMP的水平升高,ST可使细胞内cGMP量增多,因而引起肠液大量分泌而导致腹泄。另外还有Vero毒素,又称志贺样毒素,由溶原性噬菌体介导,为EHEC产生。作用使核糖体灭活,终止蛋白质合成。肠集聚耐热毒素为EaggEC产生,可导致大量液体分泌。所致疾病:1、肠道外感染条件致病菌感染,大肠杆菌移位至肠外组织或器官引起肠道外感染,以泌尿系统感染为主,如尿道炎、膀胱炎、败血症等。尿路感染每ml尿菌量≥10万,可诊断。2、肠道感染表现为急性腹泻,为致病性大肠杆菌感染所致,主要有五种类型:肠产毒性大肠杆菌(ETEC):定植因子+LT+ST,引起婴幼儿和旅游者腹泻。肠致病性大肠杆菌(EPEC):粘附素+内毒素,是婴儿腹泻的主要病原菌。肠侵袭性大肠杆菌(EIEC):侵袭力+内毒素,多侵犯较大儿童和成人,疾病类似菌痢。肠出血性大肠杆菌(EHEC):
Vero毒素+菌毛,5岁以下儿童易感,引起血性腹泻。肠集聚性大肠杆菌(EaggEC):粘附素+毒素,引起婴儿持续性腹泻。肠产毒素型大肠埃希菌(ETEC)致病物质肠毒素(LT和ST)菌毛粘附素(adhesin)内毒素K抗原所致疾病5岁以下婴幼儿腹泻旅游者腹泻肠致病型大肠埃希菌(EPEC
)致病性破坏刷状缘不产生肠毒素及其他外毒素无侵袭力所致疾病婴幼儿腹泻,热带国家、医院常流行水性腹泻Gutlumen肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)致病物质不产肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮细胞ShigelloidE.coli:EIEC无动力、生化反应和抗原结构似Shigella所致疾病主要侵犯较大儿童和成人腹泻呈脓血便,有里急后重肠出血型大肠埃希菌(EHEC)vero毒素型大肠埃希菌致病物质菌毛:粘附作用毒素:vero毒素所致疾病出血性结肠炎溶血性尿毒综合征(HUS)5岁以下儿童易感,病情轻重不一1982年美国发现,后世界各地均有流行血清型为O157:H7The“lifecycle”ofE.coliO157:H75-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarmsE.coliO157:H71982-firstrecognizedasapathogen1985-associatedwithhemolyticuremicsyndrome1990-outbreakfromdrinkingwater1991-outbreakfromapplecider1993-multi-stateoutbreakfromfastfoodhamburgers1995-outbreakfromfreshproduce1996-outbreakinJapan-multi-stateoutbreakfromunpasteurizedapplejuice肠集聚型大肠埃希菌EAggEC致病物质毒素粘附素所致疾病引起婴儿持续性腹泻,脱水,偶有血便(一)检验程序
(二)标本采集(三)检验方法
(四)耐药性
(五)结果分析与报告微生物学检验大肠埃希菌检验程序肠外感染:标本分离培养涂片染色鉴定(生化反应(IMViC等)腹泻:粪便鉴别培养基分离培养鉴定检测肠毒素毒力因子血清型微生物学检查法检验方法1.显微镜检查2.分离培养3.鉴定ETECEPECEIECEHECEaggECST检测(乳鼠灌胃试验)LT检测(CHO细胞培养)O157:H7菌落特征(MAC)O157:H7菌落特征(山梨醇麦康凯琼脂平板)返回卫生细菌学检查大肠菌群数每1000(g)ml水中大肠菌群数:大肠菌群:37℃,24小时内发酵乳糖产酸产气的革兰染色阴性的无芽胞需氧或兼性厌氧的肠道杆菌,包括埃希菌属,枸橼酸菌属,克雷伯菌属及肠杆菌属等。细菌总数
每1ml(g)样品中细菌总数我国卫生标准大肠菌群:每升饮用水中3个以下,每100ml瓶装汽水、果汁等5个以下细菌总数:每毫升饮用水不得超过100个防治原则疫苗抗生素的抗性质粒,耐药性非常普遍问题大肠埃希菌与人类健康的关系如何?肠道杆菌的共同特征?致人类腹泻大肠埃希菌有哪几种?致病物质菌毛、定居因子K抗原与侵袭力有关抗吞噬与抗补体的溶菌外毒素肠毒素及溶血毒素内毒素与感染特征和严重程度有关所致疾病肠道外感染化脓性感染泌尿道感染:最多见,逆行感染尿道炎膀胱炎肾盂肾炎腹泻引起腹泻的大肠埃希菌肠产毒型大肠埃希菌enterotoxigenic
E.
coli
ETEC肠侵袭型大肠埃希菌enteroinvas
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