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VITEK 全自动微生物检测系统原理及其应用最近几年来,微生物的检测判定技术已逐渐由手工检测走向仪器化和电脑化,并力争简易、.最初进、自动化程度最高的细菌判定仪器之一。
/药敏剖析系统VITEK 是当前生界上最近几年来,微生物的检测判定技术已逐渐由手工检测走向仪器化和电脑化,并力争简易、迅速、正确。由生物梅里埃企业出品的全自动微生物判定 /药敏剖析系统VITEK 是当前生界上最初进、自动化程度最高的细菌判定仪器之一。 VITEK 已被很多国家定为细菌最后判定设施,并获美国药品食品管理局( FDA)认同.该系统有高度的特异性、敏感性和重复性 ,还具有操作简易、检测速度快的特色
,绝大部分细菌的判定在
2~18h 内可得出结果。现将该系统的工作原理、主要构造、功能并联合我们使用后的一些领会介绍以下。1 工作原理VITEK对细菌的判定是以每种细菌的微量生化反响为基础, 不一样种类的 VITEK试卡(检测卡)含有多种的生化反响孔,可达 30种.将手工分别的待检菌的纯菌落制成切合必定浊度要求的菌悬液,经充填机将菌悬液注入试卡内 ,封口后放入读数器/恒温培育箱,依据试卡各生化反响孔中的生长变化状况 ,由读数器按光学扫描原理,准时测定各生化介质中指示剂的色(或浊度反响,而后把读出信息输入电脑储藏并进行剖析,再和预约的阈值进行比较,判定反响,再经过数值编码技术与数据库中反响文件进行比较,动显示)并在打印机上自动打印。2VITEK 系统的构造构成2.1 检测卡
最后判定报告将在显示器上自当前VITEK系统的检测卡有 14种,微生物常用的有7种,即:革兰氏阳性菌判定卡(GPI)、革兰氏阴性菌卡(GNI+)、非发酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厌氧菌卡(ANI)、芽胞杆菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡(份标本,检测卡为一次性耗费品。
NHI),以及药敏检测卡等。每张检测卡对应接种 12。2 充填机 将待测菌的菌悬液注入试卡内。2。3 读数器/恒温箱可在培育过程中准时读出细菌在试卡内培育基中的生长变化值。2。4 电脑主机/显示器/键盘/打印机 用于储藏和剖析资料、系统的操作和结果剖析判定,实验结果的自动显示报告和打印。2.5 电源稳压器和UPS 在外头断电的状况下供给电脑主机约3VITEK 系统的功能
10min连续电源。可判定405 种细菌此中:GPI卡可判定凝结酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌、草绿色和β溶血链球菌、棒状杆菌属以及李斯特氏菌属和丹毒丝菌等 51种;GNI+卡可判定肠杆菌科、弧菌科和非酵菌等116种;NFC卡可判定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌、假单胞菌、弧菌等 42种;YBC卡可判定假丝酵母(念珠菌)、隐球菌、地霉、丝孢酵母、红酵母等判定放线菌、拟杆菌、梭杆菌、乳杆菌、真杆菌、梭菌、消化链球菌等
34ANI卡可94BAC卡可鉴定芽胞杆菌21种;NHI 卡可判定奈瑟氏菌、嗜血杆菌、金氏菌、摩拉氏菌、布兰汉氏菌等47种。可对澄清液体中的微生物进行计数。3。3 检测细菌生长曲线。3。4 药敏试验4 实质应用议论
有70多种药物约50多种药物组合的药敏卡。实验室自引进VITEK 系统后,用已知的金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、李斯特氏菌、O157∶H7、沙门氏菌、志贺氏菌、绿脓杆菌、副溶血弧菌共 8株标准菌株进行检测,结果已知的完整符合。并且判定沙门氏菌属只要 4h,志贺氏菌属6h,缩短了肠道致病菌生化鉴定的时间,操作也简易。如1999 年7月13日晚某市一大厦中心餐厅发生食品中毒,发病 49人.将可疑菌株用VITEK 仪器进行判定,仅用13h就得出判定结果,而惯例判定章需 24h。又如1999年6月从一胖听的入口烤鳗酱油中分别出可疑酵母菌株, VITEK 系统的卡判定为丛生丝孢酵母。 而惯例法判定酵母菌需配制各样培育基 ,一般实验室试剂多不齐备,且判定者要有相当的工作经验 .但是在未知菌的判定中,VITEK 系统有时会因各种要素不可以顺利获取判定报告,或由一些特别的报告信息取代了正常的判定结果。最常有的有“ unidentified organism"(不可以鉴定的细菌).产生这一报告的原由有 :①待检细菌不是单调菌株;②试卡生化小孔有气泡严重扰乱比色;③菌龄太老 ;④所配制的待检菌菌悬液浊度过高或过低;⑤待检菌不可以平均悬于0.45%~0。5%盐水中;⑥稀有生物新种或不典型菌株,数据库缺少资料。VITEK的最后判定报告上,有时也会出现一些限制信息,这些限制信息是与判定结果同时存在的,它论述了合格判定的标准.最常有的有“goodconfidencemarginalseparation ”(好的可信性但难于划分),即生化反响结果同时相像于数据库中两个菌, 且产生可接受的绝对相像值,使两种菌间难于划分,需加一些试验方可确立其最后判定。 比如:副溶血弧菌与嗜水气单胞菌在NFC选菌为嗜水气单胞菌时,判定结果同时还会提示参看技术资料,技术资料则说明经过外加VP试验、0% NaCl 生长试验、七叶苷试验来加以差别并判定到种 .副溶血弧菌阳性百分率均为0,嗜水气单胞菌分别为 98%、100%和96%.有些菌的最后判定仪器不可以达成,需要血清学方法证明.比如:当GNI+O157H7
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