植物组织培养技术课件

植物组织培养技术植物组织培养技术主要内容植物组织的基本概念植物组织培养的过程植物组织培养影响因素植物组织培养实验室的设置主要内容植物组织培养的基本概念

(1)植物组织培养:

在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根，茎，叶，花，果实等）、组织（形成层，花药组织等）、细胞（体细胞，生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。

植物组织培养技术课件(2)外植体：从活体植株上切下的，用于组织培养的细胞、组织和器官。一般包括茎尖、根、茎、叶、花、种子等器官以及他们形成的体细胞胚等材料。(2)外植体：(3)脱分化：

已经高度分化的植物器官、组织或细胞，在切割损伤和培养物内外因素的共同作用下，逐渐丧失原来的分化结构和功能，最后形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。(3)脱分化：(4)愈伤组织：

在人工培养基上由外植体脱分化形成的一团无序生长的薄壁细胞。（具有细胞分裂能力）(5)胚状体：

在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。(4)愈伤组织：(5)胚状体：(6)再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下，又可经过愈伤组织或胚状体，再分化出根和芽，形成完整植株，这一过程叫作再分化。(7)不定芽：凡从叶、根、或茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽

(6)再分化：(8)植物组织器官发生途径（见下图）(8)植物组织器官发生途径（见下图）植物组织培养过程培养基的配置无菌接种操作培养植物组织培养基的配置无菌接种操作培养MS培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制:MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表)

MS培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制:植物组织培养技术课件

（2）MS培养基的配制:

按比例分别取适量各种成分的母液，加入烧杯，称取蔗糖30g，琼脂7g，加水并加热使琼脂溶解，按照需要的浓度分别加入激素，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl溶液调节pH至5.8~6.0。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中，拧上盖子，放入灭菌锅121℃，灭菌20min。（2）MS培养基的配制:植物组培具体操作步骤（1）取材：取菊花生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成)。（2）消毒：①流水冲洗后,加少许洗衣粉刷洗,流水冲20分钟;②放入75﹪酒精中摇动2~3次,持续30秒,无菌水冲洗2~3次，用无菌吸水纸吸干;③在2﹪~10%的次氯酸钠溶液中消毒8~10分钟,无菌水冲洗2~3次，无菌吸水纸吸干。（3）接种：植物组培具体操作步骤（1）取材：常用灭菌剂使用浓度及效果比较表

常用灭菌剂使用浓度及效果比较表植物组织培养消毒与接种示意图植物组织培养消毒与接种示意图无菌苗培养（1）愈伤组织与不定芽的诱导培养选用合适的培养基分别对植物材料进行愈伤组织和不定芽的诱导。（2）生根培养选用生根培养基对无菌苗进行生根培养。无菌苗培养（1）愈伤组织与不定芽的诱导培养（3）材料的移栽及温室培养：炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼3天，再开瓶锻炼3天（以培养基上开始长出菌为宜）。移栽：去净培养基，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。植物组织培养技术课件第五章影响植物组织培养的影响因素及注意事项影响植物组织培养的几个因素植物的材料培养基植物激素pH值外界因素（温度，光照，通气状况，材料处理等）第五章影响植物组织培养的影响因素及注意事项影响植物组织培

组织培养实验室设置及设备介绍实验室设置组织培养实验室设置简图

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(1)植物组织培养:

在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根，茎，叶，花，果实等）、组织（形成层，花药组织等）、细胞（体细胞，生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。

植物组织培养技术课件(2)外植体：从活体植株上切下的，用于组织培养的细胞、组织和器官。一般包括茎尖、根、茎、叶、花、种子等器官以及他们形成的体细胞胚等材料。(2)外植体：(3)脱分化：

已经高度分化的植物器官、组织或细胞，在切割损伤和培养物内外因素的共同作用下，逐渐丧失原来的分化结构和功能，最后形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。(3)脱分化：(4)愈伤组织：

在人工培养基上由外植体脱分化形成的一团无序生长的薄壁细胞。（具有细胞分裂能力）(5)胚状体：

在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。(4)愈伤组织：(5)胚状体：(6)再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下，又可经过愈伤组织或胚状体，再分化出根和芽，形成完整植株，这一过程叫作再分化。(7)不定芽：凡从叶、根、或茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽

(6)再分化：(8)植物组织器官发生途径（见下图）(8)植物组织器官发生途径（见下图）植物组织培养过程培养基的配置无菌接种操作培养植物组织培养基的配置无菌接种操作培养MS培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制:MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表)

MS培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制:植物组织培养技术课件

（2）MS培养基的配制:

按比例分别取适量各种成分的母液，加入烧杯，称取蔗糖30g，琼脂7g，加水并加热使琼脂溶解，按照需要的浓度分别加入激素，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl溶液调节pH至5.8~6.0。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中，拧上盖子，放入灭菌锅121℃，灭菌20min。（2）MS培养基的配制:植物组培具体操作步骤（1）取材：取菊花生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成)。（2）消毒：①流水冲洗后,加少许洗衣粉刷洗,流水冲20分钟;②放入75﹪酒精中摇动2~3次,持续30秒,无菌水冲洗2~3次，用无菌吸水纸吸干;③在2﹪~10%的次氯酸钠溶液中消毒8~10分钟,无菌水冲洗2~3次，无菌吸水纸吸干。（3）接种：植物组培具体操作步骤（1）取材：常用灭菌剂使用浓度及效果比较表

常用灭菌剂使用浓度及效果比较表植物组织培养消毒与接种示意图植物组织培养消毒与接种示意图无菌苗培养（1）愈伤组织与不定芽的诱导培养选用合适的培养基分别对植物材料进行愈伤组织和不定芽的诱导。（2）生根培养选用生根培养基对无菌苗进行生根培养。无菌苗培养（1）愈伤组织与不定芽的诱导培养（3）材料的移栽及温室培养：炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼3天，再开瓶锻炼3天（以培养基上开始长出菌为宜）。移栽：去净培养基，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。植物组织培养技术课件第五章影响植物组织培养的影响因素及注意事项影响植物组织