CD64在早产儿细菌性感染中的应用

CD64在早产儿细菌性感染中的应用【内容摘要】目的：讨论中性粒细胞外表标记物cd64在早产儿感染中的诊断价值。方法：对新生儿科〔包含nicu〕109例患儿于流式细胞仪进行cd64水平的测定，并与c反应蛋白(crp)〔免疫比浊法检测〕及il6〔双抗体夹心elisa法检测〕进行比较，分早产儿感染组30例﹑足月儿感染组28例、早产儿非感染组25例和足月儿非感染组26例4组进行分析。结果：早产儿感染组cd64为〔5010.95±3318.01〕分子数/细胞；足月儿感染组cd64为〔5193.07±3207.32〕分子数/细胞；早产儿非感染组cd64为〔2277.80±914.56〕分子数/细胞；足月儿非感染组为〔2174.34±836.00〕。早产儿感染组与早产儿非感染组、足月儿感染组与足月儿非感染组比较cd64水平差别非常显著〔p＜0.001〕，早产儿感染组与足月儿感染组、早产儿非感染组与足月儿非感染组cd64水平无统计学差别；cd64诊断早产儿感染的敏感度、特异度均较高〔敏感度76.7%、特异度88%〕，优于crp〔敏感度56.7%、特异度62%〕及il6〔敏感度64.3%、特异度84%〕。结论：新生儿感染时cd64水平明显升高，十分对早产儿感染诊断的敏感性和特异性均高于crp、il6，能够作为诊断早产儿感染有力的实验室根据。【本文关键词语】cd64早产儿感染c反应蛋白白介素6theevaluationofcd64detectionindiagnosingprematurebacterialinfectionxuqianqian,chenlingzhi,xuhaibin,zhangyu,baomanhua.departmentofpediatrics,wenzhouthesecondpeople’shospital,wenzhou325000,china［abstract］objective:toevaluatetheapplicationofanalyzingneutrophilcellsurfacemarkercd64indiagnosisofprematureinfantss:109infantsinpatientinneonataldepartment(includingnicu)wereenrolledinthestudy.cd64wasmeasuredbyfcm,whichwascomparedwithcreactiveprotein(crp)andils:therewasastatisticallysignificantdifferenceinquantitationofcd64onneutrophilcells(p0.001)amongtheinfectedprematureinfants(5010.95±3318.01molecules/cell),infectedfullterminfants(5193.07±3207.32),noninfectedprematureinfants(2277.80±914.56)aswellasfullterminfants(2174.34±836.00).thesensitivity,specificity,predictivevaluesbetweenpositiveandnegativeindividualsforcd64detectionwereveryhigh,betterthanthatforcrp,ilsion:cd64levelsaresignificantlyelevatedinnewbornsinfected,comparedwithcrp,il6assays,thesensitivityandspecificityareallhigher,particularlyforthediagnosisofinfectioninprematureinfants.itcanbeusedforlaboratorydiagnosisofneonatalinfectioneffectively.［keywords］cd64；prematureinfants；infection；crp；il6近年来，早产儿已成为新生儿病房的重要问题。早产儿感染性疾病发展快、死亡率高，而临床症状表现为不典型性和多样性，使得早期诊治成为改善患儿预后的关键。但由于免疫未成熟等原因，对早产儿感染的早期临床诊断仍缺乏一种可靠精确的检测手段。为进一步提升早产儿感染的早期诊断率，讨论一种快速可靠的方法，我们对临床疑似早产儿感染的患儿进行cd64水平、c反应蛋白(crp)及il6的测定，并与足月儿感染病例及早产儿非感染病例进行比较分析。现将结果报道如下。1材料与方法1.1对象2004年10月～2005年10月本院新生儿科住院的早产儿和足月儿共109例，其中男性63例，女性46例，平均日龄10.55天(0～28天)。109例患儿最后按出院诊断分为4组：早产儿感染组30例，胎龄〔32.80±3.90〕周，体重〔1915±426〕g，日龄〔9.55±6.28〕；早产儿非感染组25例，胎龄〔33.20±2.10〕周，体重〔1967±315〕g，日龄〔8.63±5.72〕；足月儿感染组28例，胎龄〔38.87±1.72〕周，体重〔3221±521〕g，日龄〔16.23±7.82〕；足月儿非感染组26例，胎龄〔39.62±1.59〕周，体重〔3358±415〕g，日龄〔14.88±5.29〕。感染病例(均为细菌感染)包含败血症、感染性肺炎、化脓性脑膜脑炎、肠道感染以及尿路感染等；非感染病例包含单纯早产儿、abo溶血病、新生儿湿肺、生理性黄疸及缺氧缺血性脑病等。败血症诊断参考2003年昆明会议〔新生儿败血症诊疗方案〕［1］；其他感染如新生儿肺炎、化脓性脑膜脑炎、细菌性肠炎、尿路感染等以及非感染性疾病诊断标准参考第3版〔实用新生儿学〕。1.2方法患儿入院48小时内股静脉处采血进行cd64﹑crp、il6和血惯例检查，并按病情留取血培养、痰培养、脐部分泌物培养等。cd64的检测方法：全血50μl+20μlcd64pe/cd45percp抗体〔美国bd公司产品〕混匀，暗处放置1小时后加facs溶血剂2ml，暗处放置20分钟上流式细胞仪〔bd公司facscalibur〕检测。crp采取免疫比浊法(beckmancoulter公司生产的immage仪)，结果为定量指标，crp≥8mg/l为阳性，crp＜8mg/l为阴性；il6采取双抗体夹心elisa法,试剂盒为美国mr公司产品，临界值为9.7pg/ml。1.3统计学分析cd64计量资料采取方差分析，数据处理采取spss10.0统计分析软件包。其他数据〔敏感度、特异度和预测值〕的统计处理参考医学科研方法学［2］。2结果2.1各组cd64检测结果见表1。早产儿感染组患儿cd64为〔5010.95±3318.01〕分子数/细胞；足月儿感染组cd64为〔5193.07±3207.32〕分子数/细胞；早产儿非感染组cd64为〔2277.80±914.56〕分子数/细胞；足月儿非感染组cd64为〔2174.34±836.00〕分子数/细胞。统计分析示早产儿感染组与早产儿非感染组、足月儿感染组与足月儿非感染组比较差别非常显著〔f=15.954，f=17.184，p＜0.001〕；早产儿感染组与足月儿感染组、早产儿非感染组与足月儿非感染组比较无显著差别〔p＞0.05〕。2.2各组crp及il6检测结果见表2。2.3cd64、crp及il6诊断新生儿感染的敏感性和特异性本组资料中以roc曲线计算得出cd64诊断新生儿感染的最佳临界值为2587分子数/细胞。cd64、crp及il6在诊断早产儿感染及足月儿感染中的敏感度〔se〕、特异度〔sp〕、阳性预测值〔pv+〕和阴性预测值〔pv-〕见表3。表1cd64检测结果〔略〕tab.1theplasmalevelsofcd64note:comparedbetweenthelevelofcd64intermswithinfectionandintermswithoutlevelofcd64inpretermswithoutinfectionandinpretermswithinfection,p0.001;comparedbetweenthelevelofcd64intermswithinfectionandinpretermswithinfection,termswithoutinfectionandpretermswithoutinfection,p0.05.表2crp〔mg/l〕和il6(pg/ml)检测结果〔略〕tab.2theplasmalevelsofcrp(mg/l)andil6(pg/ml)表3cd64、crp及il6在诊断早产儿、足月儿感染敏感性和特异性的统计学数据〔略〕tab.3thecomparisonofsensitivityandspecificityamongcd64,crpandil63讨论中性粒细胞是机体抵抗感染的重要防御细胞，在其作用机制中，它须通过细胞膜上特殊的受体〔如补体受体，fcγr〕与抗体或补体结合发挥成效。当前发现中性粒细胞和单核细胞外表可表达3种fcγr：fcγrⅰ(cd64)、fcγrⅱ(cd32)、fcγrⅲ(cd16)。cd64是igg的fc段受体，是一个高亲和力的受体。cd64能辨别免疫球蛋白的fc片段,其表达受细胞因子的调节,起到了连接体液免疫和细胞免疫的桥梁作用［3］。cd64在外周血中重要分布于单核细胞、巨噬细胞及树突细胞外表，而在中性粒细胞外表低水平表达。当遭到细菌细胞壁的脂多糖(lps)和粒细胞集落刺激因子(gcsf)、γ干扰素(ifnγ)等因子刺激时，可使cd64在中性粒细胞外表大量表达，不仅增长受体数目，而且能提升氧化新陈代谢和脱颗粒［4］。fjaertft等［5］研究了足月儿、早产儿、年长儿及成人急性细菌感染的早期阶段中性粒细胞cd64的表达，结果发现，新生儿细菌感染组明显高于非感染组，而且早产儿细菌感染组中性粒细胞cd64表达的水平与足月儿、年长儿及成人之间无差别，健康的早产儿和足月儿中性粒细胞表达cd64明显高于健康成人。有文献报道，cd64的表达与胎龄无关，早产儿和足月儿非感染状况cd64表达无差别，但在感染时cd64均可明显增长，说明cd64的表达是新生儿，尤其是早产儿细菌感染的一个标记［6］。本研究结果也显示，早产儿感染组cd64水平明显高于早产儿非感染组，足月儿感染组的cd64表达明显高于足月儿非感染组。与其他感染指标比较，cd64的敏感性和特异性均较高。ng等［7］的研究结果表示清楚，cd64有很高的敏感性(87%～97%)和特异性(88%～90%)，他们观察到,cd64的表达水平在败血症发生后0～24小时均坚持明显升高，说明了cd64在败血症早期的敏感水平。而且allen等［8］以为，非感染性的炎症反应和病毒感染均不会引起cd64在中性粒细胞的表达增长，进而说明，cd64的表达升高在新生儿细菌感染中具有很高的特异性。本组研究显示cd64在诊断早产儿感染的敏感度为76.7%﹑特异度为88.0%、阳性预测值为88.4%、阴性预测值为75.8%，与足月儿类似，说明cd64是一种高敏感性和高特异性的细菌感染标记物，可作为早产儿感染的早期检测指标，断定患儿能否存在感染。crp作为感染检测手段当前已较广泛应用于临床，对协助诊断新生儿感染有一定意义，但crp作为一种急性期时相蛋白在体内受影响因素较多，其敏感性和特异性均较低［9］。本组资料显示，crp诊断早产儿感染和足月儿感染的敏感度、特异度明显低于cd64。il6是诱导b细胞分泌免疫球蛋白和t细胞激活增殖的重要细胞因子，在新生儿抗细胞感染中起主要作用。早产儿t细胞产生il6等细胞因子的能力明显低于足月新生儿，而且il6在感染刺激后早期到达高峰，在循环中消失很快［10］。有研究显示il6在新生儿败血症到达高峰浓度为3小时，在血循环中消失的时间为6小时。因而，il6的诊断价值受血标本收集时间所限制［11］。本组资料显示，il6诊断早产儿感染的敏感度、阴性预测值分别仅为56.7%和63.6%，低于足月儿感染组，而且明显低于cd64诊断早产儿感染的敏感度和阴性预测值。综上所述，crp与il6对诊断新生儿感染有一定帮助，但cd64水平的测定优越性更明显，尤其对早产儿感染诊断更有价值。所以，对入住新生儿病区的早产儿主张用cd64水平来判定能否存在细菌感染，以便尽早应用抗生素，提升早产儿的治愈率和生存质量。【以下为参考文献】1会儿科学分会新生儿学组.新生儿败血症诊疗方案［j］.杂志，2003；41〔12〕：897899.2梁万年.医学科研方法学［m］.北京：人民卫生出版社，2002：287297.3郝玲，李艳芝.cd64和新生儿感染［j］.国外医学·儿科学分册，2005；32〔3〕：176178.4okayamay,kirshaumas,metcalfedd.expressionofafunctionalhighaffinityiggreceptor,fcgammari,onhumanmastcells:upregulationbyifngamma［j］.jimmunol,2000；164(8):43324339.5fjaertoftg,hakanssonl,ewalduetal.neutrophilsfromtermandpreternnewborninfantsexpressthehighaffinityfcgammareceptorⅰ〔cd64〕duringbacterialinfections［j］.pediatrres,1999；45(6):871876.6张金萍,陈超,杨毅.新生儿感染时分子变化及临床意义［j］.