单胞藻类的实验室培养课件

微藻的实验室培养藻类的概述培养的方式实验室培养绿藻裸藻黄藻蓝藻门二、微藻的营养模式和生长模式（二）、微藻的生长模式

藻类在培养过程中，生长繁殖的速度，出现一定的起伏，这种生长模式可划分为五个时期（延缓期、指数生长期、相对生长下降期、静止期、死亡期）三、培养方式按培养的场所分室内培养和室外培养按培养基的形态分固体培养和液体培养按培养的纯度分

纯种培养

和

单种培养按藻液的流动情况分静止培养和循环流动水培养按气体交换情况分充气培养和不充气培养按藻液与外界接触程度分封闭式培养和开放式培养按培养规模和目的分小型培养、中继培养和大量培养（1）纯培养和单种培养纯培养（axenicculture）：是无菌培养，指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。纯培养操作要求十分严格，要求有无菌室、超净台等设备，容器、工具、培养液等均须彻底灭菌。培养成功率很高，是进行科学研究不可缺少的技术。单种培养（single-speciesculture）：指区别于纯培养的不排除细菌存在的培养（可以是生产性的，也可以是非生产性的）（3）小型培养、中继培养和大量培养小型培养：一级培养，目的是培养和供应藻种，用于科研等。一般采用封闭式不充气一次性培养方式，培养容器一般采用100～3000ml的三角烧瓶。中继培养：又称二级培养，目的是藻种扩大培养，供应生产性大量培养的藻种。一般在室内大的玻璃容器或塑料大袋中进行。单胞藻生产性扩大培养常用流程500mL藻种5000mL三角烧瓶细口玻璃瓶塑料桶封闭式塑料薄膜水泥池一级培养二级培养三级培养实验室培养过程消毒配制培养液接种培养管理收获1容器、工具和水消毒方法总结一级培养（实验室的培养）：金属器具和试管口、瓶口：直接灼烧玻璃器皿：洗液+烘箱纸、棉花、纱布：烘箱培养用水：砂滤水→脱脂棉→煮沸→冷却洗液：15g重铬酸钾+200mg浓硫酸混匀

粒径厚度细砂0.1mm60～80cm

2～3层网目<0.1mm的筛绢网布粗砂3～4mm8～10cm

1层网目1mm的胶丝网布碎石2.5～3.5cm5～8cm

1层网目1～2mm胶丝网布筛板筛孔2cm5cm培养用水海水沉淀砂滤脱脂棉烧开冷却过滤器水消毒池一级培养二、三级培养以上用水量都是加至1000mL，海藻培养液用海水，如无海水可用淡水1000mL加30克食盐代替。如配制固体培养基，可在培养液内加入1.5％的琼脂。藻种的获得1购买2自行分离稀释分离法平板分离法1．藻种的选择：特征：⑴生长迅速；⑵对极端的温度和辐射条件的耐性范围大；⑶蛋白质，脂类和糖类含量高，或有选择地积累一种特殊的代谢产物（如甘油）；⑷无毒性，且易于收获。根据系统的要求和特殊的方法，还可有其他要求。按种后瓶口用灭菌纸包扎，放在适宜光、温条件下培养，每天轻轻摇动二次。大约二周后进行一次移植。藻种在培养过程中必须定期用显微镜检查，保持不受其他生物污染。3．藻种的保存：

一旦藻种分离得到，就要保存好以便在一定的时间内供接种用。为此，要将藻种消毒，避免其他来源的污染。给以适当的光照和温度。在液体培养中，为了快速增殖，可用5400lx。再得到良好生长后（1～2周），培养液移到更低的光照条件（540～1100lx），以求缓慢生长及储藏。4.培养管理：主要是使已接种培养物在相对稳定适宜环境中大量繁殖生长。要注意以下因素：1）二氧化碳浓度在开放式不通气方法培养中，搅拌是十分必要的，可以增加水和空气的接触面，使空气中二氧化碳溶解到培养液中，而且帮助沉淀藻类细胞上浮获得光照。在通气培养中，培养液内应维持二氧化碳浓度在0.1～5％之间。

4）无机营养应不断添加新鲜培养液，及时补充被藻吸收后减少了的某些元素。5）注意pH变化如变动过大，可用酸、碱调节。6）适当控制培养物中藻细胞浓度过高会引起光照和无机营养不足，并导致pH