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第三章天活剂、保护剂和免疫位剂第一节灭活剂灭活与灭活剂1、灭活概念是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性但尽可能不影响其免疫原性,被灭活的微生物主要用于生产灭活疫苗;或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性以避免补体对诊断试验的干扰作用微生物毒力的灭活或毒素毒性灭活或补体活性灭活灭活方法物理方法(不用)化学方法(常用)剂用于灭活微生物的化学试剂或药物称为灭活剂第三章天活剂、保护剂和免疫位剂1常用灭活剂的灭活机理与应用)灭活剂种类甲醛溶液①蛋白质②核酸烷基化(不加中断剂)2、烷化剂乙酰基乙烯亚胺(AEI)二乙烯亚胺(BED)缩水甘油醛使微生物核酸烷基化,灭活后加2‰硫代硫酸钠中断灭活)苯酚(石炭酸):用于防腐,很少用于疫苗研制4、结晶紫:蛋白质变性。(溶于有机溶剂)用于诊断抗原的制备:鸡白痢抗原阝-丙酰内酯病毒灭活剂,为狂犬病灭活苗制备所用灭活对人有时对皮肤粘膜有强烈刺常用灭活剂的灭活机理与应用2甲醛溶液:《规程》(2000)中的26种灭活疫苗灭活机理氨基甲基胺甲醛羧基亚甲基二醇单酯醛基羟基羟基甲酚巯基亚甲基二醇灭活浓度:多数为0.1%~0.3%灭活原则:低浓度、短时间而又能达到彻底灭活目的必要时可在灭活后加入硫代硫酸钠,以中断其反应甲醛溶液:3烷化剂(alkylatingagent)乙酰基乙烯亚胺(AED、二乙烯亚胺(BED、缩水甘油醛灭活机制1.烷化DNA分子中的鸟嘌呤或腺嘌呤等,引起单链断裂或双螺旋链交联,因改变DNA的结构而破坏其功能,妨碍RNA的合成,从而抑制细胞的有丝分裂2.与酶系统和核蛋白起作用而干扰核酸代谢优点:能破坏病毒的核酸芯髓,使病毒完全丧失感染力,而不损害其蛋白衣壳,保留其保护性抗原。烷化剂(alkylatingagent)41、乙酰基乙烯亚胺(N-acetylethylenimine,AEI淡黄色澄明液体,有轻微氨臭味,能与水或醇任意混合0~4℃可保存1年,在-20℃可保存2年AEI功能基团是乙烯亚胺基,可用于口蹄疫灭活苗。口蹄疫病毒液:终浓度0.05%,30℃$h,加2%硫代硫酸钠阻断2、二乙烯亚胺(binaryethylenimine,BEI)市购商品为02%的BEI溶液,在0~4℃可保存1个月;终浓度0.02%,加入2%硫代硫酸钠中断灭活1、乙酰基乙烯亚胺(N-acetylethylenimi5灭活剂保护剂与免疫佐剂课件6灭活剂保护剂与免疫佐剂课件7灭活剂保护剂与免疫佐剂课件8灭活剂保护剂与免疫佐剂课件9灭活剂保护剂与免疫佐剂课件10灭活剂保护剂与免疫佐剂课件11灭活剂保护剂与免疫佐剂课件12灭活剂保护剂与免疫佐剂课件13灭活剂保护剂与免疫佐剂课件14灭活剂保护剂与免疫佐剂课件15灭活剂保护剂与免疫佐剂课件16灭活剂保护剂与免疫佐剂课件17灭活剂保护剂与免疫佐剂课件18灭活剂保护剂与免疫佐剂课件19灭活剂保护剂与免疫佐剂课件20灭活剂保护剂与免疫佐剂课件21灭活剂保护剂与免疫佐剂课件22灭活剂保护剂与免疫佐剂课件23灭活剂保护剂与免疫佐剂课件24灭活剂保护剂与免疫佐剂课件25灭活剂保护剂与免疫佐剂课件26灭活剂保护剂与免疫佐剂课件27灭活剂保护剂与免疫佐剂课件28灭活剂保护剂与免疫佐剂课件29灭活剂保护剂与免疫佐剂课件30灭活剂保护剂与免疫佐剂课件31灭活剂保护剂与免疫佐剂课件32灭活剂保护剂与免疫佐剂课件33灭活剂保护剂与免疫佐剂课件34灭活剂保护剂与免疫佐剂课件35灭活剂保护剂与免疫佐剂课件36灭活剂保护剂与免疫佐剂课件37灭活剂保护剂与免疫佐剂课件38灭活剂保护剂与免疫佐剂课件39灭活剂保护剂与免疫佐剂课件40灭活剂保护剂与免疫佐剂课件41灭活剂保护剂与免疫佐剂课件42灭活剂保护剂与免疫佐剂课件43灭活剂保护剂与免疫佐剂课件44灭活剂保护剂与免疫佐剂课件45灭活剂保护剂与免疫佐剂课件46灭活剂保护剂与免疫佐剂课件47灭活剂保护剂与免疫佐剂课件48灭活剂保护剂与免疫佐剂课件49灭活剂保护剂与免疫佐剂课件50灭活剂保护剂与免疫佐剂课件51灭活剂保护剂与免疫佐剂课件52灭活剂保护剂与免疫佐剂课件53灭活剂保护剂与免疫佐剂课件54灭活剂保护剂与免疫佐剂课件55灭活剂保护剂与免疫佐剂课件56灭活剂保护剂与免疫佐剂课件57灭活剂保护剂与免疫佐剂课件58灭活剂保护剂与免疫佐剂课件59灭活剂保护剂与免疫佐剂课件60灭活剂保护剂与免疫佐剂课件61灭活剂保护剂与免疫佐剂课件62灭活剂保护剂与免疫佐剂课件63第三章天活剂、保护剂和免疫位剂第一节灭活剂灭活与灭活剂1、灭活概念是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性但尽可能不影响其免疫原性,被灭活的微生物主要用于生产灭活疫苗;或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性以避免补体对诊断试验的干扰作用微生物毒力的灭活或毒素毒性灭活或补体活性灭活灭活方法物理方法(不用)化学方法(常用)剂用于灭活微生物的化学试剂或药物称为灭活剂第三章天活剂、保护剂和免疫位剂64常用灭活剂的灭活机理与应用)灭活剂种类甲醛溶液①蛋白质②核酸烷基化(不加中断剂)2、烷化剂乙酰基乙烯亚胺(AEI)二乙烯亚胺(BED)缩水甘油醛使微生物核酸烷基化,灭活后加2‰硫代硫酸钠中断灭活)苯酚(石炭酸):用于防腐,很少用于疫苗研制4、结晶紫:蛋白质变性。(溶于有机溶剂)用于诊断抗原的制备:鸡白痢抗原阝-丙酰内酯病毒灭活剂,为狂犬病灭活苗制备所用灭活对人有时对皮肤粘膜有强烈刺常用灭活剂的灭活机理与应用65甲醛溶液:《规程》(2000)中的26种灭活疫苗灭活机理氨基甲基胺甲醛羧基亚甲基二醇单酯醛基羟基羟基甲酚巯基亚甲基二醇灭活浓度:多数为0.1%~0.3%灭活原则:低浓度、短时间而又能达到彻底灭活目的必要时可在灭活后加入硫代硫酸钠,以中断其反应甲醛溶液:66烷化剂(alkylatingagent)乙酰基乙烯亚胺(AED、二乙烯亚胺(BED、缩水甘油醛灭活机制1.烷化DNA分子中的鸟嘌呤或腺嘌呤等,引起单链断裂或双螺旋链交联,因改变DNA的结构而破坏其功能,妨碍RNA的合成,从而抑制细胞的有丝分裂2.与酶系统和核蛋白起作用而干扰核酸代谢优点:能破坏病毒的核酸芯髓,使病毒完全丧失感染力,而不损害其蛋白衣壳,保留其保护性抗原。烷化剂(alkylatingagent)671、乙酰基乙烯亚胺(N-acetylethylenimine,AEI淡黄色澄明液体,有轻微氨臭味,能与水或醇任意混合0~4℃可保存1年,在-20℃可保存2年AEI功能基团是乙烯亚胺基,可用于口蹄疫灭活苗。口蹄疫病毒液:终浓度0.05%,30℃$h,加2%硫代硫酸钠阻断2、二乙烯亚胺(binaryethylenimine,BEI)市购商品为02%的BEI溶液,在0~4℃可保存1个月;终浓度0.02%,加入2%硫代硫酸钠中断灭活1、乙酰基乙烯亚胺(N-acetylethylenimi68灭活剂保护剂与免疫佐剂课件69灭活剂保护剂与免疫佐剂课件70灭活剂保护剂与免疫佐剂课件71灭活剂保护剂与免疫佐剂课件72灭活剂保护剂与免疫佐剂课件73灭活剂保护剂与免疫佐剂课件74灭活剂保护剂与免疫佐剂课件75灭活剂保护剂与免疫佐剂课件76灭活剂保护剂与免疫佐剂课件77灭活剂保护剂与免疫佐剂课件78灭活剂保护剂与免疫佐剂课件79灭活剂保护剂与免疫佐剂课件80灭活剂保护剂与免疫佐剂课件81灭活剂保护剂与免疫佐剂课件82灭活剂保护剂与免疫佐剂课件83灭活剂保护剂与免疫佐剂课件84灭活剂保护剂与免疫佐剂课件85灭活剂保护剂与免疫佐剂课件86灭活剂保护剂与免疫佐剂课件87灭活剂保护剂与免疫佐剂课件88灭活剂保护剂与免疫佐剂课件89灭活剂保护剂与免疫佐剂课件90灭活剂保护剂与免疫佐剂课件91灭活剂保护剂与免疫佐剂课件92灭活剂保护剂与免疫佐剂课件93灭活剂保护剂与免疫佐剂课件94灭活剂保护剂与免疫佐剂课件95灭活剂保护剂与免疫佐剂课件96灭活剂保护剂与免疫佐剂课件97灭活剂保护剂与免疫佐剂课件98灭活剂保护剂与免疫佐剂课件99灭活剂保护剂与免疫佐剂课件100灭活剂保护剂与免疫佐剂课件101灭活剂保护剂与免疫佐剂课件102灭活剂保护剂与免疫佐剂课件103灭活剂保护剂与免疫佐剂课件104灭活剂保护剂与免疫佐剂课件105灭活剂保护剂与免疫佐剂课件106灭活剂保护剂与免疫佐剂课件107灭活剂保护剂与免疫佐剂课件108灭活剂保护剂与免疫佐剂课件109灭活剂保护剂与免疫佐剂课件110灭活剂保护剂与免疫佐剂课件111灭活剂保护剂与免疫佐剂课件112灭活剂保护剂与免疫佐剂课件113灭活剂保护剂与免疫佐剂课件114灭活剂保护剂与免疫佐

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