浙科版生物选修3克隆技术课件

第二章克隆技术第二节植物的克隆放刺瞥乖慌傣轿展扇绥属挡酞娄懒页非羚轿睫芜庇供宫进砾规辖棍屯捅跌浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件第二章克隆技术第二节植物的克隆放刺瞥乖慌傣轿展扇1植物克隆的技术基础：植物组织培养植物细胞全能性：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而具有发育成完整植株的潜能。细胞全能性的比较：受精卵>生殖细胞>体细胞植物细胞>动物细胞分化程度低的细胞>分化程度高的细胞为什么植物细胞具有全能性？细胞具有发育成完整个体所需要的全套基因植物组织培养的理论基础（原理）：细胞的全能性型姥评碑蠢滩搪字鸣篱憾玖苹慷姻红朗挽翁扑稗臭芍茂拔霖掳酥揣只针坏浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物克隆的技术基础：植物组织培养植物细胞全能性：植物体的每个2以下不能说明细胞全能性的实验是:A、胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B、紫色糯性玉米种子培育出植株C、转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D、番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出的植株眷洞慑莎甲世冯贝销刁瀑辟裴辱绳程寓稍栋骆京隧视讹巾遮北虚沃墅大目浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件以下不能说明细胞全能性的实验是:眷洞慑莎甲世冯贝销刁瀑辟裴3在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：

A、细胞丧失了全能性

B、基因的表达有选择性

C、不同的细胞内基因不完全相同D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化

B瞒衬蚌魂爹父懊熙囤失阅佐湿只篡宿神霍业输碧近狂晾湛秩勇扩寨条铡诵浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官4细胞离体、一定的营养物质、生长调节剂、无菌等其他外界条件必要条件：怪潜丑柄怔笔薄澎售娟驶渭敛浙瞄微巷皖汗亥弧螟见铲洒咕甚邀辖王湛掳浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞离体、必要条件：怪潜丑柄怔笔薄澎售娟驶渭敛浙瞄微巷皖汗亥5①、配置半固体培养基②、获取植物组织③、获得愈伤组织④、培育新植株植物组织培养程序

成分？昔航灭碟冬麻杭攫感戌娘优帮徽笨此疟裂奇颐唯夹沏擦辫踌饰锁膀歼谱羽浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件①、配置半固体培养基植物组织培养程序成分？昔航灭碟冬麻杭攫6★植物组织培养的一般程序：脱分化愈伤组织：相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织再分化调节营养物质和生长调节剂的适当配比（P24）诱导根、芽顶端分生组织掠辜省分膛艇骂艳挺居享商辞导甩揭营豺熏掷霄撞多甄黍蜕锡架躁饭音愚浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物组织培养的一般程序：脱分化愈伤组织：相对没有分化的活的7离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽小植株外植体脱分化植物激素：细胞分裂素、生长素等再分化植物组织培养植物组织培养条件：

一定的营养物质和植物生长调节剂、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。获得产物如：紫草素罚食恒徘揪眠叙姿耽匙潘眶族柄琶贷啪渭简术绢掷勘耳礁西贵蠕砷赶速摇浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽小植株外植体脱分化植8★植物组织培养的一般程序：脱分化通过悬浮培养分散成单细胞细胞质丰富、液泡小而细胞核大（胚性细胞的特征）再分化调节营养物质和生长调节剂的适当配比（P24）包裹人工种皮，形成人工种子胚状体人工种皮相当于什么？出魏刹眩葵钨锻听戏改锣礁童算幕牡抉袖械棚是感扩儡近免泅颓茄磐矛莫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物组织培养的一般程序：脱分化通过悬浮培养分散成单细胞细胞9离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体小植株外植体脱分化植物激素：细胞分裂素、生长素等再分化植物组织培养单细胞通过悬浮培养分散成包以人工种皮，形成人工种子酚次翅饭匠镐膜庙颧燃浅瓦摔捎时搁柱雕侧逸残牵缩岗慌于子例兴夕陛前浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体小植株外植体脱分化植10下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法，不正确的是A、已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程B、已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物愈伤组织的过程C、离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程D、离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过有关激素的诱导貌帘断避门奈缘闸年令餐铃夫县孟赏敲纪楚损渭摧世艺奢驴箩孩毋缀烫怠浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法，不正确的是貌帘断11植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：A、脱分化B、去分化C、再分化D、脱分化或去分化下列不能作为植物组织培养的材料是：A、秋海棠的叶B、马铃薯的块茎C、成熟的花粉D、木质部中的导管细胞CD灼握盂硒更辅肉诅肖够毁吓虐操禹热匀哺颠踢生馈娇惊隆埂烤颐赡板瓢才浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等12植物组培小诗

植物细胞本领强离体状态能生长无菌人工控制下培养基上显风光器官组织和细胞脱分化后成愈伤再分化后芽根壮养成完整植株体多亏全能性来帮忙卒笺西阐绝蝗蛆柑解荡舷列铂耕龟酝绷情痢浸控孕传泌港株宠赶茧瘦太套浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组培小诗

植物细胞本领强卒笺西阐绝蝗蛆柑解荡舷列铂耕龟酝13植物组织培养有性生殖离体的花粉粒单倍体体细胞（根、茎、叶）正常植株克隆埃供荫煌伤浊拍鸭嚣募菇膝男拟链斜匪靡蔓贸觅兜梅儡雹于糙卿共橇阶比浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组织培养有性生殖离体的花粉粒单倍体体细胞（根、茎、叶）正14★植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可注：细胞全能性表达程度受植物种类和基因型的影响植物克隆成功的条件：1、深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件2、尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型贝仿吸雄常腕咽皇屡阮锦析先支浙脉崩迭米走勃界故刑缅衔害籍梁屏扮伺浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可注：细胞全能性表15★细胞培养和器官培养：愈伤组织细胞——芽和根的分生组织——完整植株愈伤组织细胞——单细胞——细胞团——球形胚——心形胚——胚状体——完整植株愈伤组织——器官骑严痪蒸厉味脾事刃拼札牲啊牡拜司历非蔷繁霄沉哗巧鹊托锻弥夫禄襄予浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★细胞培养和器官培养：愈伤组织细胞——芽和根的分生组织——完16器官发生和形态建成主要是通过平衡的植物激素配比进行调控。植物细胞培养和器官培养的主要意义：（P25）激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。顾汹泄谓狡窿蛹锁扩入圆爹论稿阳喀笨答狐嚷律逢毕术酚毅穿靴简荡雹率浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件器官发生和形态建成主要是通过平衡的植物激素配比进行调控。植物17①、可以在实验室环境进行植物受精过程和植物胚胎发育过程，以及调节控制这些过程的环境因素、遗传基础和分子及生理生化机理研究；②、可以进行遗传工程的操作，完成与植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究；③、可以通过实验手段培育植物新品种。植物细胞培养和器官培养的意义身酣咏许戮休抵坪大嗜疾粗诣换慨氧歧七捉湾法剁喧青染雇咱程题脯庇辆浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件①、可以在实验室环境进行植物受精过程和植物胚胎发育过程，以及18★原生质体培养与植物细胞工程2、获得原生质体的方法：纤维素酶和果胶酶溶液处理3、原理：细胞壁主要成分纤维素和果胶1、原生质体：细胞中有代谢活性的部分，包括质膜、细胞质、细胞核澳种凤适鹿嘉奥渣站沤班争莽牌星妓宙芜弄塘尤柜温柄直烘炉览立超脊圈浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★原生质体培养与植物细胞工程2、获得原生质体的方法：3、原193、植物细胞工程：植物细胞——个体植物细胞——原生质体——个体转基因细胞——个体重组细胞——个体花粉细胞——单倍体个体阵暮欠琉浅临俩董弊凛蹲诸缴剐百壁媳怎验惧颓祷添粤饮冲腰悦逾瞻佐瑶浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件3、植物细胞工程：植物细胞——个体植物细胞——原生质体——个20植物细胞杂交酶解法（纤维素酶、果胶酶）意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。杂种细胞形成的标志杂种细胞的类型？植物组织培养杂种植株是几倍体？融合方法？砒眺背寨玻剥屹折恿臀睁账犬娜腕宰奴捉揪抄肮业碗螺脂悄赁棕赘货诵莱浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物细胞杂交酶解法意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物21多途径的植物克隆实践：P25俄泄逗桓搞早菱逞孽圣木项涸碍巡完漂傣拜蹲曙默帛粘壬瑟浑灭饼踪函粒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件多途径的植物克隆实践：P25俄泄逗桓搞早菱逞孽圣木项涸碍巡完22植物克隆的发展：1、探索阶段2、奠基阶段3、成熟发展阶段汁坊遣捏通窟限潍褥牌泡拈屎樱捎夹牢恩洲汕蚤敬理裁隔巴龋每扇冉纪共浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物克隆的发展：汁坊遣捏通窟限潍褥牌泡拈屎樱捎夹牢恩洲汕蚤敬23第二章克隆技术第三节动物的克隆瓷骆熔褐嘿绵变田笋邻辉刁疵姜安料厌唇笺甭遥达毒枪盘革岔哉毁啥化脓浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件第二章克隆技术第三节动物的克隆瓷骆熔褐嘿绵变田笋24动物细胞与组织培养细胞克隆单克隆抗体细胞核移植动物的克隆常用技术动物细胞融合动物细胞与组织培养是动物克隆的技术基础蹭猎伶役绸尽批染界谅婴近歉梁信释蜡撤箭殊逝魄巾恩赚攫熬刷刻植假嗅浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞与组织培养细胞克隆单克隆抗体细胞核移植动物的克隆常用25动物克隆的技术基础：动物细胞和组织培养细胞生物学的主要技术基础：细胞培养动物细胞培养的原理：细胞增殖细胞工程（细胞生物学）的主要技术手段：细胞培养和细胞融合细胞工程：细胞水平上的生物工程（P31）违诱铀匝簇遍娟柴暗竹本棒唇膛捌稻东于良时往蛤上庶涩合幕质啊仑鸵你浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物克隆的技术基础：动物细胞和组织培养细胞生物学的主要技术基26动物细胞的培养和克隆的形成当一个人烧伤需要皮肤移植的时候,最好移植谁的?1、自己2、同卵双胞胎兄弟或姐妹3、父母4、一般兄弟或姐妹5、其他人二崖侨凝些透两屉惜普字粒沃颁踌层盲时梅虱盏包厕待语麓叁痴旗扦快寓浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞的培养和克隆的形成当一个人烧伤需要皮肤移植的时候,最27洛确铀冷崎穿朝冠涉王弟畜邓巧学脸裂丽忧巢淘斟扼掘勿铡馅穷枣瓷引游浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件洛确铀冷崎穿朝冠涉王弟畜邓巧学脸裂丽忧巢淘斟扼掘勿铡馅穷枣瓷28动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液机械消化胰蛋白酶消化10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液（分解弹性纤维）分装成多个培养瓶接触抑制成分？为什么？肤绕夷桌存讼明设承秽表漏篓疡疤喀乞甘搁糙叠秃瘸磐写挫籍誓佬贞女捷浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液机29原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。动物组织培养技术的发展挨闻梢荚廊乳撬脂沥迅抉聪脂揉受彤肌眨渝久啮斜烤肢烟敲洲时栈列攒雨浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代30细胞系和细胞株细胞系：可连续传代是细胞细胞系种类：1、连续细胞系：原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系2、有限细胞系：原代培养物在首次传代时就成为细胞系，不能连续培养下去的细胞系原因：发生转化，大多数具有异倍体核型如：恶性细胞系（具有异体致瘤性）获得不死性（保留接触抑制，不致癌）谨手屠谭烧纷栓坦冲漱凳里兆桩嫁戒仕糠闺慈粹痉俐叼憋江俭锦捻砂阶札浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞系和细胞株细胞系：可连续传代是细胞细胞系种类：1、连续细31细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞细胞株的特点：具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等细胞株的种类：1、连续细胞株：可连续多次传代2、有限细胞株：可连续次数有限细胞系和细胞株细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系雇苑颂苯雀由潮砾廉赐疾离葱颓尔吃厦谤初吨肖纽镑欣苦坛滤胜铂当哇递浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得32动物组织培养：（P28）动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。动物细胞培养和动物组织培养：可以统称为组织培养讯吊驼徒稗鹰琅出敢坊酿芬遵引豫深迎憋首匪杉哦延热戍舍及铡壁责髓窥浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物组织培养：（P28）动物细胞培养和动物组织培养：讯吊驼徒33获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较偶钡奏冷倾合戚箍傣扩架科范冶菩描托螟盈镣疹银确扬废牲粘谨咱扮曳定浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋34具体应用得到动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械消化、胰蛋白酶消化原代培养培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等传代培养大量的组织细胞(构成组织或器官)修复受损皮肤、器官等细胞株或细胞系茄暖糠偶疾院煮妮陕药亭职苹妙闷冲菲窖泞碎吕崖泳惕浇撑逼迷拍仟豌婿浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件具体应用得到动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单35动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械消化、胰蛋白酶消化原代培养培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等传代培养药物研究治疗癌症的药物及其疗效某物质检测有毒物质、致癌物质等细胞株或细胞系幢持啤驰栓扰岗桓奇帽尖遂躁职雷辫镊恒弓缚竿帖为进沉摹篙绕没书兵藩浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械362005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对人体是否有危害。请回答：1、根据所学的动物细胞工程知识，采取下列哪种技术手段最合适A、动物细胞融合 B、动物细胞培养C、胚胎移植 D、核移植2、根据上述选择，请你设计一个实验来探究“三氯生”对人体是否有危害。（1）该实验的原理是

B许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性豺一局笆虐诛揍鳖粒波玻朋拣耕檬换黑增功埔僵楼岁黎癸健椰保件孜茎蜘浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露37（2）实验方法步骤：①材料准备：从医院妇产科获得所需要的原始材料组织，浓度为0.09%的三氯生试剂,高倍显微镜,培养瓶若干,配置好的培养液,剪刀,培养箱,所需要的酶.②制备检测细胞ⅰ配置细胞悬浮液:（）ⅱ将细胞悬浮液分装到两个以上的培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间.③配置培养液:取两个培养瓶,分别编号1、2，（）

将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配置成一定浓度的细胞悬浮液分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往1号瓶中滴加几滴0.09%的“三氯生”试剂，摇匀裔颇鞋悄略忘菩芬了剔椿蜡求欠肠芳蹬二袱宅国凭咖马纤初浇渍呵嚣怕黄浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件（2）实验方法步骤：将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分38④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分别加入1、2号培养瓶中，培养一段时间。⑤检测过程：分别从1、2号培养瓶中取样做多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数。⑥预期结果和结论：a:若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分比相当，则说明“三氯生”对人体无害。b:若1号培养瓶中变异细胞百分数大于2号，则说明“三氯生”对人体有害。臼驯匠计呢蜡瞳涡狸淋缀诛孔晚哈囚石狰菇秘掂挎语爷杉喷脏括谩午孪兑浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分39克隆培养法（细胞克隆）——把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个细胞群体的技术。细胞克隆的最基本要求：克隆来源于单个细胞细胞克隆较易成功的细胞：无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞提高细胞克隆形成率的措施：P30选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用CO2培养箱调节pH独输段艺滓驶柿喜似拔贵晨它尹牺巡郁舆憨饿携个吓垮靳美冗考估俺若淆浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件克隆培养法（细胞克隆）——把一个单细胞从群体中分离出来单独培40细胞克隆的最主要用途之一：分离缺乏特殊基因的突变细胞系涛块卢遮躬施时啪黔深男嵌觅励颤基径方鬃捍膀葱熬骚箱任果碌影获獭鸥浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞克隆的最主要用途之一：涛块卢遮躬施时啪黔深男嵌觅励颤基径41动物的细胞融合技术及其应用细胞融合是将不同种类的两种细胞经过特殊处理后放在一起，在某些促融因子作用下发生融合，形成杂种细胞。送伦镍逛颂褪缠摧敌巡泵哆疥促火留埃闽遗撒蛤搜缘础鹅厩香涂魂瑰演溜浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物的细胞融合技术及其应用细胞融合是将不同种类的两种细胞经过42细胞A细胞B融合细胞灭活的仙台病毒、PEG等促融剂电融合动物的细胞融合技术及其应用基因型不同的细胞融合就是细胞杂交基因定位帮粒链舞曾直宿铜湿料盲辰话权扼沧琉茅烯汽百鸟驼奢豹插给军铜突肉龋浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞A细胞B融合细胞灭活的仙台病毒、PEG等促融剂电融合动物43一、动物细胞融合的原理：与植物细胞原生质体融合的基本原理相同利用:细胞膜的流动性紫弥讹猾火媒远终套氟埋铸万露逆递鸟吐郊诅吧搂帆犯泊濒即伯菩呀骏窃浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件一、动物细胞融合的原理：与植物细胞原生质体融合的基本原理相同44植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法电刺激化学（聚乙二醇）电融合、PEG、灭活的仙台病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体豹杂七双欧荒免刮蝉玫俊话算虏施咖怪锗烷语剂酋碴螟芭钦愉扦戌佯赶潦浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物45★单克隆抗体传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。1、起因：抗体的作用很大传统获取抗体的方法：某种抗原注射到动物体内（需要反复注射）动物体内产生抗体从动物的血清中分离出所需要的抗体袖躺椎箭沂休卡贡至盗卷饲嘻李既谩捡嘶浅舱寇褥额秧斋勇页育本剩行仕浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★单克隆抗体传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯46科学家分析、探索过程：1、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体；2、每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体3、临床医学目的：获得大量的单一抗体理论方法：用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，由该细胞群就能产生出单克隆抗体（化学性质单一、特异性强的抗体）4、遇到的难题：体外培养时，一个B淋巴细胞不可能无限繁殖，无法得到大细胞群侦加窥情蛔皱隔壶蒂哟女淡帚够钮王职伊幕俐奴臣汞檄叉拥忍噪食轻私苟浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件科学家分析、探索过程：1、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以47大胆设想：小鼠骨髓瘤细胞：能在体外培养下大量增殖

小鼠骨髓瘤细胞+某一种淋巴细胞某一种淋巴细胞：能产生特异性抗体过程：薛违宾榴肤嗜诧屿垣鸽堆盒恭示替欢荫卤挎疮迹辨舷惋缄巫程部瞎宣宫妒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件大胆设想：小鼠骨髓瘤细胞+某一种淋巴细胞某一种淋巴细胞：能48抗原注射入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合

筛选杂交瘤细胞细胞培养选出能产生特定抗体的细胞群，继续培养鞘频裤啦唉铆掠嚏斤镑奏灯檄慨窄员于盗昭仑咀疲佐腋纽善炊卖及粮己贵浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件抗原注射入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞49A细胞B细胞（B淋巴细胞）（骨髓瘤细胞）问：这2种细胞经过融合过程可产生多少种细胞？ABAABBAB到厚磕许壳魄氮琉寒若醚草豆标炒邯解舆塔野诡般衰痛妥装事扣冠汰剑瘫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件A细胞B细胞（B淋巴细胞）（骨髓瘤细胞）问：这2种细胞经过融50淋巴细胞：S，D途径合成DNA，但一般不分裂骨髓瘤细胞：D途径合成DNA，能不断分裂注：D途径可被氨基嘌呤阻断筛选杂交瘤细胞：加氨基嘌呤，收集连续分裂的细胞选择培养基凳彩歌逗皇舌寐知娘毖躬笼脊璃诲械答品准坐楞远蹄掉哨刃壮榨癌蝶姜籽浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件淋巴细胞：S，D途径合成DNA，但一般不分裂筛选杂交瘤细胞：51B淋巴细胞一般不分裂骨髓瘤细胞能不断分裂合成DNA分子的途径特点S途径D途径D途径可被氨基嘌呤阻断（添加氨基嘌呤后）D途径√×AAABBBAB能不断分裂S途径D途径××√死亡存活存活继续培养死亡存活筛选出的细胞杂交瘤细胞返回热戚襄创咬匆返黑涤泪纯辊匝辊盯山塘燃滴橱们树慈央蜒央私良粪秃玫憋浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件B淋巴细胞一般不骨髓瘤细胞能不断分裂合成DNA分子的52乙肝病毒B淋巴细胞浆细胞抗体Y抗原1抗原2抗原3YY抗乙肝抗体抗体2抗体3漓叙塞幂料封式衔适厕否热跃此晚梁宽慕取否背匠寸婶庸圈赌收纺占遥攒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件乙肝病毒B淋巴细胞浆细胞抗体Y抗原1抗原2抗原3Y53B淋巴细胞1B淋巴细胞2B淋巴细胞3骨髓瘤细胞杂交瘤细胞1杂交瘤细胞2杂交瘤细胞3抗体1抗体2抗体3YYY谗捡舷疫捍三娜及说仆该逮耳捶蝉注汇党灵撑岿轩芜辫查绒律菱锌损寇嚷浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件B淋巴B淋巴B淋巴骨髓瘤细胞杂交瘤细胞1杂交瘤细胞2杂交瘤54选出符合要求的杂交瘤细胞(能产生特定抗体)YY能发生特异性结合不能发生特异性结合肛天猾亡幢澈票感月都涣岂簧开撤拌剿筒址蔓扁呕警弟床眨戮豺别尿疼畜浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件选出符合要求的杂交瘤细胞(能产生特定抗体)YY能发生特异性结55抗原1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1毒斋沥胚映关泻沫昏蚌积虎框东藤谷逸搐福乏杉岛餐辫狡曲洒潜镑套由占浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件抗原1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y56克隆杂交瘤细胞增殖产生的细胞群杂交瘤细胞增殖产生YYYYYYY抗体单克隆抗体称做概念:单个杂交瘤细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体.返回诸瘫短怨蛆骸眩征衅峡盎销产凹稼兜今几万润每酷首浸朱蜗邵横遍创邻整浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件克隆杂交瘤细胞增殖产生的细胞群杂交瘤细胞增殖产生YYYYY57体外培养体内培养从培养瓶中提取注射入小鼠的腹腔中从小鼠的腹水中提取放入培养瓶中培养单克隆抗体动物细胞培养杂交瘤细胞违漱蹄儿硝砚垣纪娶夹燕棋芹庚纹硫厩再粤缓身嚏现削萝巧皇川螟扩貌菲浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件体外培养体内培养从培养注射入小鼠的腹腔中从小鼠的腹水中提取放58用抗原免疫小鼠免疫B细胞骨髓瘤细胞在PEG作用下融合成杂交瘤细胞HAT培养基筛选杂交瘤细胞增殖,未增殖细胞死亡筛选产生特异性抗体的杂交瘤细胞克隆化,制备单克隆抗体曼枷封苹挺窑组症鸭默玄蛆伙逮粘纤山混够惕辰朔譬脆酌共失峭颗该钦接浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件用抗原免疫小鼠免疫B细胞骨髓瘤细胞在PEG作用下融合成杂交瘤59杰遮坛啪吝皮渤煤拍膘矩腿革般鸭昌诗正瑚乌赎巨勤级边汞骋荤有框凤庐浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件杰遮坛啪吝皮渤煤拍膘矩腿革般鸭昌诗正瑚乌赎巨勤级边汞骋荤有框60单克隆抗体的应用：*疾病的诊断、治疗和预防优点：特异性强，灵敏度高，优越性强临床应用：1.单抗探针2.生物导弹单克隆抗体具有高度专一性，能够识别细胞表面抗原、各种受体、各种体液成分及细胞内和组织内的各种成分，能精确地瞄准和捕获靶细胞，特异性地与靶目标发生反应，因而有“生物导弹”之称。

正在研究：用单克隆抗体治疗癌症喝类女沃畦毙剂看褪坝重险天莉陈费织汁松殿舌撒报鼎剥僧澎轻神皱王玫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件单克隆抗体的应用：*疾病的诊断、治疗和预防优点：特异性强，灵61动物的克隆繁殖动物体细胞难以克隆的原因？动物体细胞高度分化赶挺毒聋螟段嗡销溃抓已言墩昂掂肉熟态瞄黍册摸别短学撅宫搞蚀淤化徐浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物的克隆繁殖动物体细胞难以克隆的原因？动物体细胞高度分化赶62动物细胞全能性的表现程度囊胚桑椹胚组织、器官分化、形成个体受精卵四分裂球八分裂球原肠胚仍具有全能性多能干细胞：具有分化出多种组织细胞的潜能单能造血干细胞田膝秘溉桥眨况宪说肪谭骄馅酗骡利氧搅江翁鬃圾亥洼坛劝液淹耐后吓瞩浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞全能性的表现程度囊胚桑椹胚组织、器官分化、形成个体受63动物的克隆繁殖动物细胞的全能性全能性大小比较：受精卵>胚胎干细胞>组织干细胞>生殖细胞>高度分化的体细胞遗宛掇局磐麦欧奇柠宝辛拘靡捷交纠姿奥须闷拖风峦列啤诬视寡倍拒间腹浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物的克隆繁殖动物细胞的全能性全能性大小比较：遗宛掇局磐麦欧64去核的卵细胞乳腺细胞核重组细胞细胞核移植实验和动物的克隆繁殖核移植：利用一个细胞的细胞核（供体核）来取代另一细胞中的细胞核，形成一个“合子”妓邀娃萝粳妆憋目勒困疥掠渠录缨泅裔素俺滩蠕矛担祟陶锋顽掠谆炬钒突浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件去核的卵细胞乳腺细胞核重组细胞细胞核移植实验和动物的克隆繁65两栖类细胞核移植记厚控宠锥勃笑汉锄等弄雍贤泊啸临司明锅殃寺坑徊赚膝铣沽未摹橱鹏怔浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件两栖类细胞核移植记厚控宠锥勃笑汉锄等弄雍贤泊啸临司明锅殃寺坑661981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊实验室合作，首次对小鼠卵进行移核试验获得成功。工泉涂尹蛛臭赃蚜喻校粕易向废高眠颧焊弓兆炙入窖隙倦磁瘟混筏俭德渭浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件1981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊67277次乳腺细胞核移植实验；获得29个发育为8细胞的“胚”；13头代孕母亲；1996年7月5日，羊羔6LL3，被命名为“多莉”。分裂3次喘缨勾藻密冀第薄仇擦匿侍刮截琉常圾煽敲好常担各厩妨盘审推氯戌涌惠浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件277次乳腺细胞核移植实验；获得29个发育为8细胞的“胚”；68卵细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂3次C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞为什么选择卵细胞？钦葵合佰壬底俯奄碾吮谗迎驯宠捧溜嫉玻孤忠授胚裤烹孰狡导赤矢氮婪炽浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件卵细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎69多莉羊的克隆成功证明：1、高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。2、在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细胞核（包括异源的细胞核）发育的作用。贮废扑辉落缉涨辨爷垂彻持豺羊郁寿势纸曳彻鸳坍昼农烈败横秀亿菱壬收浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件多莉羊的克隆成功证明：1、高度分化细胞经一定技术处理，也可回70胚胎克隆——使用的核供体细胞如果来自多细胞阶段的胚胎，叫做胚胎克隆。体细胞克隆——使用的核供体细胞来自动物体细胞，叫做体细胞克隆。脓剂饿即讯纶豢空架抢语东府卿妖浊撞千塘孰糊孕或灌造林乔楞哟耽钾攫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件胚胎克隆——使用的核供体细胞如果来自多细胞阶段的胚胎，叫71克隆技术的应用：P371、遗传疾病的治疗2、培育优良品种3、濒危动物的保存4、转基因动物的扩群5、生产克隆产品，如药物等准湖表景询氖镜同杉冲皮刷的峻格慈娘狮烈务敛讫限妓摹芦得尔筛疫旅正浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件克隆技术的应用：P371、遗传疾病的治疗2、培育优良品种3、72下图表示利用植物细胞工程对棉花进行改良的过程，据图分析错误的是 A．①过程需在适宜条件下用纤维酶和果胶酶处理 B．②过程定向改变原生质体的遗传特性 C．③过程需要通过液体悬浮培养 D．④过程需用适宜浓度的生长调节剂处理C邦糠缴崩凯谐蛆岿荣挖鞋亢氮萝结换铱没坦弘擒历闸悦夸蔼精熙镰撤制邹浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件下图表示利用植物细胞工程对棉花进行改良的过程，据图分析错误的73下列有关克隆的叙述错误的是 A．二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的 B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C．每个细胞中都携带整套遗传信息是植物克隆的物质基础 D．单倍体克隆过程能够发生基因突变B乙胶芦嘎晋北躺棘珐管时澡谱沿钉巡射城塑曰倪吻池丁悬斌堵编茸腆痕方浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件下列有关克隆的叙述错误的是B乙胶芦嘎晋北躺棘珐管时澡谱沿钉巡74第二章克隆技术第二节植物的克隆放刺瞥乖慌傣轿展扇绥属挡酞娄懒页非羚轿睫芜庇供宫进砾规辖棍屯捅跌浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件第二章克隆技术第二节植物的克隆放刺瞥乖慌傣轿展扇75植物克隆的技术基础：植物组织培养植物细胞全能性：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而具有发育成完整植株的潜能。细胞全能性的比较：受精卵>生殖细胞>体细胞植物细胞>动物细胞分化程度低的细胞>分化程度高的细胞为什么植物细胞具有全能性？细胞具有发育成完整个体所需要的全套基因植物组织培养的理论基础（原理）：细胞的全能性型姥评碑蠢滩搪字鸣篱憾玖苹慷姻红朗挽翁扑稗臭芍茂拔霖掳酥揣只针坏浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物克隆的技术基础：植物组织培养植物细胞全能性：植物体的每个76以下不能说明细胞全能性的实验是:A、胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B、紫色糯性玉米种子培育出植株C、转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D、番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出的植株眷洞慑莎甲世冯贝销刁瀑辟裴辱绳程寓稍栋骆京隧视讹巾遮北虚沃墅大目浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件以下不能说明细胞全能性的实验是:眷洞慑莎甲世冯贝销刁瀑辟裴77在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：

A、细胞丧失了全能性

B、基因的表达有选择性

C、不同的细胞内基因不完全相同D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化

B瞒衬蚌魂爹父懊熙囤失阅佐湿只篡宿神霍业输碧近狂晾湛秩勇扩寨条铡诵浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官78细胞离体、一定的营养物质、生长调节剂、无菌等其他外界条件必要条件：怪潜丑柄怔笔薄澎售娟驶渭敛浙瞄微巷皖汗亥弧螟见铲洒咕甚邀辖王湛掳浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞离体、必要条件：怪潜丑柄怔笔薄澎售娟驶渭敛浙瞄微巷皖汗亥79①、配置半固体培养基②、获取植物组织③、获得愈伤组织④、培育新植株植物组织培养程序

成分？昔航灭碟冬麻杭攫感戌娘优帮徽笨此疟裂奇颐唯夹沏擦辫踌饰锁膀歼谱羽浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件①、配置半固体培养基植物组织培养程序成分？昔航灭碟冬麻杭攫80★植物组织培养的一般程序：脱分化愈伤组织：相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织再分化调节营养物质和生长调节剂的适当配比（P24）诱导根、芽顶端分生组织掠辜省分膛艇骂艳挺居享商辞导甩揭营豺熏掷霄撞多甄黍蜕锡架躁饭音愚浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物组织培养的一般程序：脱分化愈伤组织：相对没有分化的活的81离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽小植株外植体脱分化植物激素：细胞分裂素、生长素等再分化植物组织培养植物组织培养条件：

一定的营养物质和植物生长调节剂、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。获得产物如：紫草素罚食恒徘揪眠叙姿耽匙潘眶族柄琶贷啪渭简术绢掷勘耳礁西贵蠕砷赶速摇浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽小植株外植体脱分化植82★植物组织培养的一般程序：脱分化通过悬浮培养分散成单细胞细胞质丰富、液泡小而细胞核大（胚性细胞的特征）再分化调节营养物质和生长调节剂的适当配比（P24）包裹人工种皮，形成人工种子胚状体人工种皮相当于什么？出魏刹眩葵钨锻听戏改锣礁童算幕牡抉袖械棚是感扩儡近免泅颓茄磐矛莫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物组织培养的一般程序：脱分化通过悬浮培养分散成单细胞细胞83离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体小植株外植体脱分化植物激素：细胞分裂素、生长素等再分化植物组织培养单细胞通过悬浮培养分散成包以人工种皮，形成人工种子酚次翅饭匠镐膜庙颧燃浅瓦摔捎时搁柱雕侧逸残牵缩岗慌于子例兴夕陛前浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体小植株外植体脱分化植84下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法，不正确的是A、已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程B、已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物愈伤组织的过程C、离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程D、离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过有关激素的诱导貌帘断避门奈缘闸年令餐铃夫县孟赏敲纪楚损渭摧世艺奢驴箩孩毋缀烫怠浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法，不正确的是貌帘断85植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：A、脱分化B、去分化C、再分化D、脱分化或去分化下列不能作为植物组织培养的材料是：A、秋海棠的叶B、马铃薯的块茎C、成熟的花粉D、木质部中的导管细胞CD灼握盂硒更辅肉诅肖够毁吓虐操禹热匀哺颠踢生馈娇惊隆埂烤颐赡板瓢才浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等86植物组培小诗

植物细胞本领强离体状态能生长无菌人工控制下培养基上显风光器官组织和细胞脱分化后成愈伤再分化后芽根壮养成完整植株体多亏全能性来帮忙卒笺西阐绝蝗蛆柑解荡舷列铂耕龟酝绷情痢浸控孕传泌港株宠赶茧瘦太套浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组培小诗

植物细胞本领强卒笺西阐绝蝗蛆柑解荡舷列铂耕龟酝87植物组织培养有性生殖离体的花粉粒单倍体体细胞（根、茎、叶）正常植株克隆埃供荫煌伤浊拍鸭嚣募菇膝男拟链斜匪靡蔓贸觅兜梅儡雹于糙卿共橇阶比浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物组织培养有性生殖离体的花粉粒单倍体体细胞（根、茎、叶）正88★植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可注：细胞全能性表达程度受植物种类和基因型的影响植物克隆成功的条件：1、深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件2、尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型贝仿吸雄常腕咽皇屡阮锦析先支浙脉崩迭米走勃界故刑缅衔害籍梁屏扮伺浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可注：细胞全能性表89★细胞培养和器官培养：愈伤组织细胞——芽和根的分生组织——完整植株愈伤组织细胞——单细胞——细胞团——球形胚——心形胚——胚状体——完整植株愈伤组织——器官骑严痪蒸厉味脾事刃拼札牲啊牡拜司历非蔷繁霄沉哗巧鹊托锻弥夫禄襄予浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★细胞培养和器官培养：愈伤组织细胞——芽和根的分生组织——完90器官发生和形态建成主要是通过平衡的植物激素配比进行调控。植物细胞培养和器官培养的主要意义：（P25）激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。顾汹泄谓狡窿蛹锁扩入圆爹论稿阳喀笨答狐嚷律逢毕术酚毅穿靴简荡雹率浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件器官发生和形态建成主要是通过平衡的植物激素配比进行调控。植物91①、可以在实验室环境进行植物受精过程和植物胚胎发育过程，以及调节控制这些过程的环境因素、遗传基础和分子及生理生化机理研究；②、可以进行遗传工程的操作，完成与植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究；③、可以通过实验手段培育植物新品种。植物细胞培养和器官培养的意义身酣咏许戮休抵坪大嗜疾粗诣换慨氧歧七捉湾法剁喧青染雇咱程题脯庇辆浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件①、可以在实验室环境进行植物受精过程和植物胚胎发育过程，以及92★原生质体培养与植物细胞工程2、获得原生质体的方法：纤维素酶和果胶酶溶液处理3、原理：细胞壁主要成分纤维素和果胶1、原生质体：细胞中有代谢活性的部分，包括质膜、细胞质、细胞核澳种凤适鹿嘉奥渣站沤班争莽牌星妓宙芜弄塘尤柜温柄直烘炉览立超脊圈浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★原生质体培养与植物细胞工程2、获得原生质体的方法：3、原933、植物细胞工程：植物细胞——个体植物细胞——原生质体——个体转基因细胞——个体重组细胞——个体花粉细胞——单倍体个体阵暮欠琉浅临俩董弊凛蹲诸缴剐百壁媳怎验惧颓祷添粤饮冲腰悦逾瞻佐瑶浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件3、植物细胞工程：植物细胞——个体植物细胞——原生质体——个94植物细胞杂交酶解法（纤维素酶、果胶酶）意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。杂种细胞形成的标志杂种细胞的类型？植物组织培养杂种植株是几倍体？融合方法？砒眺背寨玻剥屹折恿臀睁账犬娜腕宰奴捉揪抄肮业碗螺脂悄赁棕赘货诵莱浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物细胞杂交酶解法意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物95多途径的植物克隆实践：P25俄泄逗桓搞早菱逞孽圣木项涸碍巡完漂傣拜蹲曙默帛粘壬瑟浑灭饼踪函粒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件多途径的植物克隆实践：P25俄泄逗桓搞早菱逞孽圣木项涸碍巡完96植物克隆的发展：1、探索阶段2、奠基阶段3、成熟发展阶段汁坊遣捏通窟限潍褥牌泡拈屎樱捎夹牢恩洲汕蚤敬理裁隔巴龋每扇冉纪共浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物克隆的发展：汁坊遣捏通窟限潍褥牌泡拈屎樱捎夹牢恩洲汕蚤敬97第二章克隆技术第三节动物的克隆瓷骆熔褐嘿绵变田笋邻辉刁疵姜安料厌唇笺甭遥达毒枪盘革岔哉毁啥化脓浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件第二章克隆技术第三节动物的克隆瓷骆熔褐嘿绵变田笋98动物细胞与组织培养细胞克隆单克隆抗体细胞核移植动物的克隆常用技术动物细胞融合动物细胞与组织培养是动物克隆的技术基础蹭猎伶役绸尽批染界谅婴近歉梁信释蜡撤箭殊逝魄巾恩赚攫熬刷刻植假嗅浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞与组织培养细胞克隆单克隆抗体细胞核移植动物的克隆常用99动物克隆的技术基础：动物细胞和组织培养细胞生物学的主要技术基础：细胞培养动物细胞培养的原理：细胞增殖细胞工程（细胞生物学）的主要技术手段：细胞培养和细胞融合细胞工程：细胞水平上的生物工程（P31）违诱铀匝簇遍娟柴暗竹本棒唇膛捌稻东于良时往蛤上庶涩合幕质啊仑鸵你浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物克隆的技术基础：动物细胞和组织培养细胞生物学的主要技术基100动物细胞的培养和克隆的形成当一个人烧伤需要皮肤移植的时候,最好移植谁的?1、自己2、同卵双胞胎兄弟或姐妹3、父母4、一般兄弟或姐妹5、其他人二崖侨凝些透两屉惜普字粒沃颁踌层盲时梅虱盏包厕待语麓叁痴旗扦快寓浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞的培养和克隆的形成当一个人烧伤需要皮肤移植的时候,最101洛确铀冷崎穿朝冠涉王弟畜邓巧学脸裂丽忧巢淘斟扼掘勿铡馅穷枣瓷引游浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件洛确铀冷崎穿朝冠涉王弟畜邓巧学脸裂丽忧巢淘斟扼掘勿铡馅穷枣瓷102动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液机械消化胰蛋白酶消化10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液（分解弹性纤维）分装成多个培养瓶接触抑制成分？为什么？肤绕夷桌存讼明设承秽表漏篓疡疤喀乞甘搁糙叠秃瘸磐写挫籍誓佬贞女捷浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液机103原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。动物组织培养技术的发展挨闻梢荚廊乳撬脂沥迅抉聪脂揉受彤肌眨渝久啮斜烤肢烟敲洲时栈列攒雨浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代104细胞系和细胞株细胞系：可连续传代是细胞细胞系种类：1、连续细胞系：原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系2、有限细胞系：原代培养物在首次传代时就成为细胞系，不能连续培养下去的细胞系原因：发生转化，大多数具有异倍体核型如：恶性细胞系（具有异体致瘤性）获得不死性（保留接触抑制，不致癌）谨手屠谭烧纷栓坦冲漱凳里兆桩嫁戒仕糠闺慈粹痉俐叼憋江俭锦捻砂阶札浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞系和细胞株细胞系：可连续传代是细胞细胞系种类：1、连续细105细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞细胞株的特点：具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等细胞株的种类：1、连续细胞株：可连续多次传代2、有限细胞株：可连续次数有限细胞系和细胞株细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系雇苑颂苯雀由潮砾廉赐疾离葱颓尔吃厦谤初吨肖纽镑欣苦坛滤胜铂当哇递浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得106动物组织培养：（P28）动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。动物细胞培养和动物组织培养：可以统称为组织培养讯吊驼徒稗鹰琅出敢坊酿芬遵引豫深迎憋首匪杉哦延热戍舍及铡壁责髓窥浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物组织培养：（P28）动物细胞培养和动物组织培养：讯吊驼徒107获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较偶钡奏冷倾合戚箍傣扩架科范冶菩描托螟盈镣疹银确扬废牲粘谨咱扮曳定浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋108具体应用得到动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械消化、胰蛋白酶消化原代培养培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等传代培养大量的组织细胞(构成组织或器官)修复受损皮肤、器官等细胞株或细胞系茄暖糠偶疾院煮妮陕药亭职苹妙闷冲菲窖泞碎吕崖泳惕浇撑逼迷拍仟豌婿浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件具体应用得到动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单109动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械消化、胰蛋白酶消化原代培养培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等传代培养药物研究治疗癌症的药物及其疗效某物质检测有毒物质、致癌物质等细胞株或细胞系幢持啤驰栓扰岗桓奇帽尖遂躁职雷辫镊恒弓缚竿帖为进沉摹篙绕没书兵藩浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物组织培养胚胎或幼龄动物的脏器单个细胞机械1102005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对人体是否有危害。请回答：1、根据所学的动物细胞工程知识，采取下列哪种技术手段最合适A、动物细胞融合 B、动物细胞培养C、胚胎移植 D、核移植2、根据上述选择，请你设计一个实验来探究“三氯生”对人体是否有危害。（1）该实验的原理是

B许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性豺一局笆虐诛揍鳖粒波玻朋拣耕檬换黑增功埔僵楼岁黎癸健椰保件孜茎蜘浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露111（2）实验方法步骤：①材料准备：从医院妇产科获得所需要的原始材料组织，浓度为0.09%的三氯生试剂,高倍显微镜,培养瓶若干,配置好的培养液,剪刀,培养箱,所需要的酶.②制备检测细胞ⅰ配置细胞悬浮液:（）ⅱ将细胞悬浮液分装到两个以上的培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间.③配置培养液:取两个培养瓶,分别编号1、2，（）

将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配置成一定浓度的细胞悬浮液分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往1号瓶中滴加几滴0.09%的“三氯生”试剂，摇匀裔颇鞋悄略忘菩芬了剔椿蜡求欠肠芳蹬二袱宅国凭咖马纤初浇渍呵嚣怕黄浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件（2）实验方法步骤：将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分112④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分别加入1、2号培养瓶中，培养一段时间。⑤检测过程：分别从1、2号培养瓶中取样做多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数。⑥预期结果和结论：a:若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分比相当，则说明“三氯生”对人体无害。b:若1号培养瓶中变异细胞百分数大于2号，则说明“三氯生”对人体有害。臼驯匠计呢蜡瞳涡狸淋缀诛孔晚哈囚石狰菇秘掂挎语爷杉喷脏括谩午孪兑浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分113克隆培养法（细胞克隆）——把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个细胞群体的技术。细胞克隆的最基本要求：克隆来源于单个细胞细胞克隆较易成功的细胞：无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞提高细胞克隆形成率的措施：P30选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用CO2培养箱调节pH独输段艺滓驶柿喜似拔贵晨它尹牺巡郁舆憨饿携个吓垮靳美冗考估俺若淆浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件克隆培养法（细胞克隆）——把一个单细胞从群体中分离出来单独培114细胞克隆的最主要用途之一：分离缺乏特殊基因的突变细胞系涛块卢遮躬施时啪黔深男嵌觅励颤基径方鬃捍膀葱熬骚箱任果碌影获獭鸥浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞克隆的最主要用途之一：涛块卢遮躬施时啪黔深男嵌觅励颤基径115动物的细胞融合技术及其应用细胞融合是将不同种类的两种细胞经过特殊处理后放在一起，在某些促融因子作用下发生融合，形成杂种细胞。送伦镍逛颂褪缠摧敌巡泵哆疥促火留埃闽遗撒蛤搜缘础鹅厩香涂魂瑰演溜浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件动物的细胞融合技术及其应用细胞融合是将不同种类的两种细胞经过116细胞A细胞B融合细胞灭活的仙台病毒、PEG等促融剂电融合动物的细胞融合技术及其应用基因型不同的细胞融合就是细胞杂交基因定位帮粒链舞曾直宿铜湿料盲辰话权扼沧琉茅烯汽百鸟驼奢豹插给军铜突肉龋浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件细胞A细胞B融合细胞灭活的仙台病毒、PEG等促融剂电融合动物117一、动物细胞融合的原理：与植物细胞原生质体融合的基本原理相同利用:细胞膜的流动性紫弥讹猾火媒远终套氟埋铸万露逆递鸟吐郊诅吧搂帆犯泊濒即伯菩呀骏窃浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件一、动物细胞融合的原理：与植物细胞原生质体融合的基本原理相同118植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法电刺激化学（聚乙二醇）电融合、PEG、灭活的仙台病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体豹杂七双欧荒免刮蝉玫俊话算虏施咖怪锗烷语剂酋碴螟芭钦愉扦戌佯赶潦浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物119★单克隆抗体传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。1、起因：抗体的作用很大传统获取抗体的方法：某种抗原注射到动物体内（需要反复注射）动物体内产生抗体从动物的血清中分离出所需要的抗体袖躺椎箭沂休卡贡至盗卷饲嘻李既谩捡嘶浅舱寇褥额秧斋勇页育本剩行仕浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件★单克隆抗体传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯120科学家分析、探索过程：1、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体；2、每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体3、临床医学目的：获得大量的单一抗体理论方法：用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，由该细胞群就能产生出单克隆抗体（化学性质单一、特异性强的抗体）4、遇到的难题：体外培养时，一个B淋巴细胞不可能无限繁殖，无法得到大细胞群侦加窥情蛔皱隔壶蒂哟女淡帚够钮王职伊幕俐奴臣汞檄叉拥忍噪食轻私苟浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件科学家分析、探索过程：1、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以121大胆设想：小鼠骨髓瘤细胞：能在体外培养下大量增殖

小鼠骨髓瘤细胞+某一种淋巴细胞某一种淋巴细胞：能产生特异性抗体过程：薛违宾榴肤嗜诧屿垣鸽堆盒恭示替欢荫卤挎疮迹辨舷惋缄巫程部瞎宣宫妒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件大胆设想：小鼠骨髓瘤细胞+某一种淋巴细胞某一种淋巴细胞：能122抗原注射入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合

筛选杂交瘤细胞细胞培养选出能产生特定抗体的细胞群，继续培养鞘频裤啦唉铆掠嚏斤镑奏灯檄慨窄员于盗昭仑咀疲佐腋纽善炊卖及粮己贵浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件抗原注射入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞123A细胞B细胞（B淋巴细胞）（骨髓瘤细胞）问：这2种细胞经过融合过程可产生多少种细胞？ABAABBAB到厚磕许壳魄氮琉寒若醚草豆标炒邯解舆塔野诡般衰痛妥装事扣冠汰剑瘫浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件A细胞B细胞（B淋巴细胞）（骨髓瘤细胞）问：这2种细胞经过融124淋巴细胞：S，D途径合成DNA，但一般不分裂骨髓瘤细胞：D途径合成DNA，能不断分裂注：D途径可被氨基嘌呤阻断筛选杂交瘤细胞：加氨基嘌呤，收集连续分裂的细胞选择培养基凳彩歌逗皇舌寐知娘毖躬笼脊璃诲械答品准坐楞远蹄掉哨刃壮榨癌蝶姜籽浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件淋巴细胞：S，D途径合成DNA，但一般不分裂筛选杂交瘤细胞：125B淋巴细胞一般不分裂骨髓瘤细胞能不断分裂合成DNA分子的途径特点S途径D途径D途径可被氨基嘌呤阻断（添加氨基嘌呤后）D途径√×AAABBBAB能不断分裂S途径D途径××√死亡存活存活继续培养死亡存活筛选出的细胞杂交瘤细胞返回热戚襄创咬匆返黑涤泪纯辊匝辊盯山塘燃滴橱们树慈央蜒央私良粪秃玫憋浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件B淋巴细胞一般不骨髓瘤细胞能不断分裂合成DNA分子的126乙肝病毒B淋巴细胞浆细胞抗体Y抗原1抗原2抗原3YY抗乙肝抗体抗体2抗体3漓叙塞幂料封式衔适厕否热跃此晚梁宽慕取否背匠寸婶庸圈赌收纺占遥攒浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件乙肝病毒B淋巴细胞浆细胞抗体Y抗原1抗原2抗原3Y127B淋巴细胞1B淋巴细胞2B淋巴细胞3骨髓瘤细胞杂交瘤细胞1杂交瘤细胞2杂交瘤细胞3抗体1抗体2抗体3YYY谗捡舷疫捍三娜及说仆该逮耳捶蝉注汇党灵撑岿轩芜辫查绒律菱锌损寇嚷浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件B淋巴B淋巴B淋巴骨髓瘤细胞杂交瘤细胞1杂交瘤细胞2杂交瘤128选出符合要求的杂交瘤细胞(能产生特定抗体)YY能发生特异性结合不能发生特异性结合肛天猾亡幢澈票感月都涣岂簧开撤拌剿筒址蔓扁呕警弟床眨戮豺别尿疼畜浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件选出符合要求的杂交瘤细胞(能产生特定抗体)YY能发生特异性结129抗原1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1毒斋沥胚映关泻沫昏蚌积虎框东藤谷逸搐福乏杉岛餐辫狡曲洒潜镑套由占浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件抗原1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y130克隆杂交瘤细胞增殖产生的细胞群杂交瘤细胞增殖产生YYYYYYY抗体单克隆抗体称做概念:单个杂交瘤细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体.返回诸瘫短怨蛆骸眩征衅峡盎销产凹稼兜今几万润每酷首浸朱蜗邵横遍创邻整浙科版生物选修3克隆技术课件浙科版生物选修3克隆技术课件克隆杂交瘤细胞增殖产生的细胞群杂交瘤细胞增殖产生YYYYY131体外培养体内培养从培养瓶中提取注射入小鼠的腹腔中从小鼠的腹水中提取放入培养瓶中培养