• 现行
  • 正在执行有效
  • 2014-12-24 颁布
  • 2015-05-01 实施
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GB 15193.10-2014食品安全国家标准体外哺乳类细胞DNA损伤修复(非程序性DNA合成)试验_第1页
GB 15193.10-2014食品安全国家标准体外哺乳类细胞DNA损伤修复(非程序性DNA合成)试验_第2页
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文档简介

中华人民共和国国家标准

GB1519310—2014

.

食品安全国家标准

体外哺乳类细胞DNA损伤修复

非程序性DNA合成试验

()

2014-12-24发布2015-05-01实施

中华人民共和国发布

国家卫生和计划生育委员会

GB1519310—2014

.

前言

本标准代替非程序性合成试验

GB15193.10—2003《DNA》。

本标准与相比主要变化如下

GB15193.10—2003,:

标准名称修改为食品安全国家标准体外哺乳类细胞损伤修复非程序性合成

———“DNA(DNA)

试验

”;

修改了试验目的和原理

———;

修改了试验方法

———;

修改了数据处理

———;

修改了结果评价

———。

Ⅰ

GB1519310—2014

.

食品安全国家标准

体外哺乳类细胞DNA损伤修复

非程序性DNA合成试验

()

1范围

本标准规定了体外哺乳类细胞损伤修复非程序性合成试验的基本试验方法和技术

DNA(DNA)

要求

。

本标准适用于评价受试物的诱变性和或致癌性

()。

2术语和定义

21非程序性DNA合成

.

当受损伤时损伤修复的合成主要在期以外的其他细胞周期称非程序性

DNA,DNAS,DNA

合成

。

3试验目的和原理

在正常情况下合成仅在细胞有丝分裂周期的期进行当化学或物理因素诱发损伤

,DNAS。DNA

后细胞启动非程序性合成程序以修复损伤的区域在非期分离培养的原代哺乳动物细

,DNADNA。S

胞或连续细胞系中加入3胸腺嘧啶核苷3通过放射自显影技术或液体闪烁计数

,H-(H-TDR),DNA

法检测染毒细胞中3掺入的量可说明受损的修复合成的程度

(LSC)H-TDRDNA,DNA。

在体外培养细胞中用缺乏半必需氨基酸精氨酸的培养基进行同步培养合成的始动

,(ADM),DNA

受阻使细胞同步于期并用药物常用羟基脲抑制残留的半保留复制后通过3掺入

,G1;()DNA,H-TDR

可显示非程序性合成

DNA(UDS)。

4试剂和材料

41试剂

.

注全部试剂除注明外均为分析纯试验用水为双蒸水或超纯水

:,,。

411细胞增殖用培养基

..

氏最低要求培养基加入小牛血清青霉

Eagle(Eagle’sMinimalEssentialMedium,EMEM),10%、

素链霉素贮存液使青霉素的最终浓度为单位链霉素的最终浓度为培养基

、,100,100μg/mL。EMEM

可选用各种商品供应之粉末培养基按生产厂商提供资料配制并除菌冰箱贮存

。4℃。

412细胞同步用培养基

..

不含精氨酸之培养基加入小牛血清

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