微生物和生化药学重点整理

以下内容应该为选择题1、质粒的性质包括：具有遗传传递的能力、具有遗传交换的能力、具有不相容性。2、质粒的复制子可以分为松弛型复制子、严紧型复制子两种3、用于基因工程的表达载体，除了应含有复制子，选择标记和多克隆位点外，还应该含有启动子、终止子以及编码翻译起始信号的序列4、目的基因的常用制备方法有：化学合成法、PCR法、基因文库法、cDNA文库法。5、反转录法合成cDNA第一链所需的引物是（D）polyApolyCpolyGpolyT6、质粒的构型包括共价闭合环状DNA,开环DNA和线性分子三种。7、制备转基因动物时，外源基因转入早期胚胎的方法有哪些：（1）、基因显微注射法（2）、反转录病毒感染法（3）、胚胎干细胞法（4）、精子载体导入法（5）、基因打靶法8、蛋白质多肽的纯化方法：离子交换层析疏水层析亲和层析凝胶过滤层析9、动物细胞的大规模培养方法：悬浮培养法微载体培养法多孔载体培养法微囊化培养法中空纤维培养法10、骨髓瘤细胞对环境敏感，对培养基要求较高，具体什么要求？11、离体培养的动物细胞分为贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞和兼性贴壁细胞三类。以下内容应该为名词解释1、反义核酸(antisensenucleicacid)能够与DNA或mRNA发生特异性结合，分别阻断核酸的转录或翻译功能，阻止与病理过程相关的核酸或蛋白质的生物合成。这种可与DNA或信使RNA结合的互补链2、启动子(promotor)DNA链上能与RNA聚合酶结合并起始mRNA合成的一段序列。3、抗原(antigen,Ag)指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答，并能与免疫应答产物——抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应的(特异性反应)物质4、固定化酶(immobilizedenzyme):是指固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应的酶。5、抗体工程制药(antibodyengineeringpharmaceutics):指的是利用基因工程、细胞工程和转基因动物以及转基因植物技术产生抗体药物的过程。6、核酶(rybosyme):是具有生物催化功能的RNA。7、次级代谢产物(secondarymetabolite)：指生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的物质，如抗生素、毒素、激素、色素等。8、定点修饰(sitespecificmodification)：是指选择蛋白质分子上特定位点的基团进行修饰。问答题：1、固定化酶的方法及固定化酶的优缺点方法：载体结合法（物理吸附法、离子结合法、共价结合法）交联法包埋法（网格型，微囊型）优点：（1）可以多次使用，酶的稳定性提高；（2）酶与底物和产物易于分开，产物易纯化。（3）反应条件易控制，可实现转化反应的连续化；（4）酶利用率高，催化的底物量增加，用酶量少；（5）比水溶性酶更适合于多酶反应。缺点：固定化过程中往往会引起酶的失活。2、基因工程的基本过程基因工程药物的生产必须首先获得目的基因（1分），然后用限制性内切酶和连接酶将所需目的基因插入适当的载体（质粒或噬菌体）中，并转入大肠杆菌或其他宿主菌（细胞），以便大量复制目的基因（2分）。对目的基因要进行限制性内切酶和核苷酸序列分析（1分）。目的基因获得后，进行目的基因表达（1分）。将目的基因与表达载体重组（1分），转入合适表达系统，获得稳定高效表达的基因工程菌（细胞）（1分）。基因的表达系统有原核生物系统和真核生物系统（1分）。立适于目的基因高效表达的发酵工艺（1分），以便获得较高产量的目的基因表达产物。建立起一系列相应的分离纯化（1分）、质量控制（1分）、产品保存（1分）等技术3、制备单抗的基本过程1、制备目的基因；2、载体DNA与目的基因的连接；3、重组DNA导入宿主细胞；4、重组子的筛选与鉴定;5、工程细胞的培养；6、单抗的分离纯化。4、HAT筛选原理B淋巴细胞编码次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT+）和胸腺嘧啶激酶（TK+）,可以通过主要途径和应急途径合成DNA,但B淋巴细胞为终末分化细胞，体外不能长期存活（4分）。骨髓瘤细胞为HGPRT-或HGPRT-，只能通过主要途径合成DNA，在HAT培养基中，由于氨甲喋呤阻断了细胞DNA合成的主要途径,骨髓瘤细胞不能存活（4分）。杂交瘤细胞为HGPRT+和TK+,又具有无限增殖的能力，因此可以在HAT培养基中无限增殖（2分）。5、传统疫苗与现代疫苗比较之下，有哪些不足P127虽然可在一个健康的人体中激活特异性免疫应答，产生特异性抗体和CTL，从而获得对该病原体的免疫预防能力，但对已感染的个体却不能产生有效的免疫应答，仅有预防作用。现代疫苗是治疗性疫苗，不仅预防，还可以诱导患病个体特异性免疫应答，清除病原体或异常细胞。6、限制抗癌疫苗发展的因素有哪些7、组合生物合成的定义和常用方法8、大规模培养细胞的反应器有哪些9、分批培养、补料-分批培养、半连续培养、连续培养，四种方法的区别和各自的优缺点论述题改变蛋白质半衰期的方法1、以红细胞