临床输血前免疫血液学检查

10临床输血前免疫血液学检查一、输血前检查的目的和要求存活，无不良反响，从而到达安全、有效输血的目的。二、输血前检查的内容输血前检查的内容包括如下几个方面：患者的病史和标本等的检查、核对及处理。ABO和Rh血型鉴定。不规章抗体的筛选和鉴定。穿插协作试验。血小板输注前的抗体检查和协作试验。穿插配血结果的报告和发血。(一)受血者的病史和标本等检查、核对及处理病史资料和信息问题。标本的要求要求不超过3患者使用右旋糖酐等治疗，应留意将红细胞作洗涤。(二)受血者和供血者ABO和Rh定型ABO定型 仅在室温进展。定型方法：正、反定型的试管离心方法目前仍被认为是最可信任的ABO定型方法。1)定型试剂：有些ABO血型诊断试剂是以人的血清会聚而制成的，但必需具备以下条件：第一，高效价(1：128)的IgM抗A或抗B。其次，具较好的亲和性并不含冷凝集素。第毒灭活。另外一些ABO定型试剂是由来自培育细胞株的单克隆抗体所制成。AIA1抗AB抗血清，以避开错误地把弱反响性A或B型红细胞分类为O型。一般抗AB试剂对Ax型红细胞可增加凝集反响的强度。ABO定型试验中的常见问题：造成这种正反定型不全都的缘由主要有：技术和治理错误：这是ABO定型中产生特别结果的主要缘由，包括：标本或试剂搞错；剂；结果记录或推断错误；细胞与血清间比例不适当。血清特别：血清蛋白引起缗钱状形成，影响反定型结果。红细胞致敏：受免疫球蛋白致敏的红细胞，在含高蛋白介质的试剂中，可发生凝集。ABO亚型的检查中，A、B抗原可能为弱抗原，难以检出。近期输血：试验前曾输入过其它ABO血型不全都的血液，使血液标本成为混合血型的红细胞悬液，定型时显示“混合外观凝集”现象。现象。ABO血型系统的抗原性可受到抑制，检出困难。红细胞多凝集现象：红细胞因遗传或获得性的外表特别，发生多凝集现象。获得性B：由于革兰阴性杆菌的作用，红细胞可获得“类B”的活性。血型特异性物质过高：一些卵巢囊肿病例，血型物质的浓度很高，可中和抗A和抗B定型试剂，要得到正确的正定型结果，必需洗涤红细胞屡次。清中含有所输供体供给的抗A或抗B抗体，造成反定型错误。导致缗钱状形成，造成假凝集现象。ABO血型抗体以外的不规章抗体，与试剂红细胞上其他血型抗原系统的抗原起反响。低丙种球蛋白血症：低丙种球蛋白血症(丙种球蛋白量减低)病例，可能会因免疫球蛋白水平下降而使血清定型时不凝集或弱凝集反响。药物等因素：药物、右旋糖醉及静脉注射某些造影剂可引起红细胞凝集或类似凝集。的老人，试验时可消灭特别的结果。过失。Rh(D)定型和定型试验中应留意的问题D抗原〔IgG抗D和IgM抗D〕。(1)导致Rh血型鉴定可能消灭假阳性的缘由：受检细胞已被免疫球蛋白致敏，或标本血清中含有引起红细胞凝集的因子。受检细胞与抗血清孵育的时间过长，含高蛋白的定型试剂会引起缗钱状形成。标本抗凝不当，受检过程中消灭凝血或小的纤维蛋白凝块，误判为阳性。定型血清中含有事先未被检测的其它特异性抗体，造成假阳性定型结果。多凝集细胞造成定型的假阳性。(2)可能消灭假阴性的缘由受检细胞悬液浓度太高，与抗血清比例失调。漏加或错加定型血清。定型血清的使用方法错误，没有按说明书进展。离心后重悬细胞扣时，摇动用力过度，摇散微弱的凝集。(3)弱D型(Du型)血型及其鉴定：Du型抗原是RhO(DD试剂不产生直接凝集反响Rh阴性结认为该被检者为Rh阴性，否则，只要有一批为阳性，则可认为是Du型。弱D型(Du型)的临床意义D阳性细胞抗原弱，但输给Rh阴性的受血者后，自然有免疫产生抗D的可能。同时假设承受RhDu型人也有可能产生抗DDu型归类为Rh阳性，作为受血者Du型者归类为Rh阴性者。1.目的和原则所谓不规章抗体是指抗A和抗B以外的血型抗体。确认及鉴定临床上具有意义的抗体，避开一些可能的状况而造成病情的延误。以觉察在37℃中有反响的抗体。2.抗体筛选和鉴定技术2或3个人份的OK、k、Le、Fya、Fyb、Jka、Jkb，条件缺乏的试验室不肯定具备Lua、V、Cw、Kpa、Jsa类的抗原。抗体筛选试验不肯定能检出全部临床意义的抗体，一些抗低频率抗原的抗体或有剂量用敏感度更高的技术做检查。要内容：自身细胞检查：观看患者(受者)的血清与患者(受者)自身细胞的反响状况，确定血清内是否有自身抗体或自身抗体和同种抗体二者同时存在。体的特异性。试剂谱细胞一般是由8--16个人的血型的O型红细胞配套组成，具有各种不同的抗不同特异性的抗体当患者体内的同种抗体有二种或二种以上时，可承受吸取放散试验。低离子强度介质法(Liss)、聚凝胺(Polybrene)法及凝胶法等各种技术，再结合吸取、放散等血清学手段，对抗体的特异性作分析。进展了解，再分析反响结果。确定抗体特异性时可以综合运用以下的资料：观看受检血清与每个试剂谱细胞的反响结果。观看受检血清与其自身细胞的反响结果。观看受检血清与酶处理细胞的反响结果。一些抗体的特异性与反响介质直接相关。有否溶血现象。在阳性反响的细胞中，反响强度有否不同，是否消灭剂量效应。(四)具有自身抗体的患者血清学检查患者血清中存在的不规章抗体可分为两类:一类是同种抗体，另一类是自身抗体。自身抗体又可分为冷自身抗体和温自身抗体两类。1、患者血清中存在自身抗体的几种状况及其对血清学试验的影响冷自身抗体冷自身抗体是较常见的一种自身抗体，通常是IgM型的抗体，能在盐水介质中和自身环境下才能和自下(例如4℃)与自身细胞反响。因此，尽管大多数人的血清中都存在冷自身抗体，但在体内温度下，不会和自身细胞发生反响，也不会造成任何不良影响。在罕见的病理状况下，患者的血清中存在极高效价的冷自身抗体，而且，在相对较检查造成很大影响，有时也对输血造成肯定的影响。温自身抗体37℃条件下能和自身红细胞反响的抗体。当患者血清中含有温自身抗体时，患者一般均有些贫血或溶血病症。温自身抗体可分为两类:大多数状况下为lgG类温自身抗体，极少数状况下也会存在IgM性质的温自身抗体。患者血清里存在温自身抗体，实际上将难以获得在血清学上相协作的输血。但这种状况抗体。2、自身抗体的处理和相关血清学检查冷自身抗体的血清学检查当疑心患者血清中存在冷自身抗体时，可进展以下必要的检查:(22℃左右)条件下和任何红细胞都不发生反响，则可以认为该抗体无临床意义，不需要做进一步的检测。假设患者血清在室温下和自身红细胞反响，首先应确认抗体的冷反响性抗体特性可37℃水浴和4℃37℃完全散开而在4℃明显增加时，可以认为该抗体是冷反响性抗体。4℃进展吸取试验。在患者近期曾输过血或没有足够的红细胞等状况下，冷自身抗体吸取试验难以进展温自身抗体的血清学检查IgG往往为阳性，同时血清中的抗体在盐水介质中并不和自身或试剂红细胞反响。血清中是否存在温自身抗体在患者血清中消灭温自身抗体。自身吸取法排解同种抗体可用自身吸取法测定同种抗体。37℃反响30min左右，检测自身吸取是否完全。当吸取上清液与被彻底去除了自身抗体的自身细胞不反响，则证明自身吸取已完全，可以进一步进展同种抗体的检测。异体细胞吸取法排解同种抗体用异体细胞可以吸取自身抗体，但异体细胞也能吸取可能存在的同种抗体。的稀释，以排解自身抗体的干扰，确定同种抗体特异性。〔五〕穿插配血试验1、穿插配血试验原则和方法原则要性，如同在输血前必需再次确认受血者和献血者ABO血型必需相容。但是为保证安全输血，受血者和献血者只是ABO血型相容还远远不够，必需保证受血者血清中没有即刻或迟发性地凝集和/或溶解所输入的红细胞的抗体。不管是IgM或IgG抗体，都可能在体内溶解或溶解受血者红细胞的抗体。总之，输血前，必需进展穿插配血试验，穿插配血试验包括主侧穿插和次侧穿插配血。应留意:〔1〕用于穿插配血的病人(受血者)血液标本应当是刚刚抽取的颖血，而不是病人的陈(2)应留意不能用玻片血凝试验进展穿插配血，要用试管法。(4)红细胞浓度一般是2%－5%红细胞生理盐水悬液。盐水穿插配血试验出IgM类抗体所致受血者和献血者血型不相容。人体内IgM类血型抗体最主要是ABO血型系统抗体。穿插配血试验必需确认受血者和献血者ABO血型相容，但临床上最常见的迟发型输血反响是由于ABO血型以外的其它血型(如Rh血型)IgG类抗体导致血型不相容。IgG类抗体所致血型不相容在盐水穿插配血试验中不消灭凝集，不能直接检出。检测不完全抗体的穿插配血试验只要病人(受血者)有输血史、妊娠史或者病人血清已检出有临床意义抗体，只进展盐抗体的检测和确定试验同时进展。2、抗体筛检和穿插配血试验结果分析抗体筛检阴性，穿插配血相容ABO血型抗体，检测不出来具有临床意义的IgG抗体，因此，只用盐水直接凝集试验穿插配血，对体内可能有血型免疫抗体的病人再以抗球蛋白试验进展确定检测，均呈阴性，才能保证待输的血和受血者血型相容。抗体筛检阴性，盐水直接离心穿插配血不相容(1)献血者红细胞是ABO血型不相容。A1存在于A2或AA个体血清中。抗体筛检阴性，酶试验、抗球蛋白穿插配血试验等不相容球蛋白穿插配血试验中消灭不相容。受血者血清抗体活性很弱，则抗体筛检试验呈阴性。(3)抗体与低频率抗原反响。人群中大约1%的未经选择的血清可能含有某些低频率抗原的抗体。对盐水直接凝集为阴性者，连续做酶试验和抗球蛋白试验，以免漏检IgG类抗体，这样做更为牢靠且极有必要。抗体筛检阳性，穿插配血相容异性抗体可能是其缘由。自身抗-H。O型红细胞有大量H抗原，而A1和AS细胞则有很少。含有自身抗-H的血清可能凝集全部O型筛检试剂红细胞，但是不凝集Al和AS献血者红细胞。大多数看来是抗-H的抗体实际上是抗-IH。这些抗体常是只在室温下发生反响，无临床意义。-LebH。抗-LebH常常只在室温下反响，但可能由抗球蛋白试验检出。合。抗体筛检阳性，穿插配血不相容同种异体抗体，自身抗体，与试剂红细胞的不适当反响和“钱串状“红细胞形成都可能输血前查清楚。同种异体抗体存在，自身比照呈阴性。当存在不规章同种异体抗体时，该抗体筛检试验常常是阳性的，但是该抗原频率影响以首先用抗体试剂筛检献血者红细胞抗原，再选择其为阴性的血液作穿插配血。的最有保证的来源。假设必要，可以查询稀有血型档案。〔2〕存在同种异体抗体，自身比照阳性。2－3个月内已经承受了输血的病人体内同种异体抗体可引起自身比照细胞阳性。病人血清中同种异体抗体可能和输入的献血员红细胞反响。局部红细胞与抗体反响，格外低，只有抗原阳性红细胞经吸取一放散试验来鉴定有此抗体。(4)温反响自身抗体也能引起难以确定的阳性反响“钱串状“红细胞形成引起非真实的阳性结果。一般常常是在光镜下鉴定，细胞积聚呈硬币积存成串状态。/或相容试验的阳性结果。(五)血小板输注前的检查配血随着成分输血的广泛开展和应用，以及血液成分保存技术的提高，单采血小板的输注量已逐年上升。然而随之而来的因血小板输血反响及输注无效成为临床上极为突出的问型是目前行之有效的方法。血小板抗体检查血小板的自身免疫和同种免疫是产生血小板输血反响和输注无效的有效的血小板输注。血小板外表和自身抗体检查：血小板同种抗体检查：血小板穿插配血：临床输血中，一旦觉察血小板输血反响或输注无效，则必需马上查找协作性输注。1、根本要求输血记录要包括受血者姓名等根本资料，每一献血者(或每一袋待输血)鉴别编码；ABO试验觉察和结果。发出每一袋血液之前，血库工作人员必需做到:类和结果；假设在穿插配血前血液要发出，必需具体说明和标记。检查血液失效期，避开发出过期的血。结果。以固定程序记录发、收血的工作人员名字(签名)，血液发出的时间和日期。。2、输血前选择血液ABO血型相容的血液。只要是输给病人的血液成分中有等于或多于5mL的红细胞，该红细胞必需与病人(受血者)血浆相容。RhD血，以避开被RhD抗原免疫。假设已尽了最大努力，还是找不到ABO相容