新兽药一般毒性试验技术要求

新兽药一般毒性试验技术要求一、急性毒性试验根据供试药物临床应用的给药途径不同，本试验可分为：（一）经口或注射给药的急性毒性试验1、动物选用小鼠（体重18—22g）、大鼠（180—200g）或其他敏感动物。应注明动物品系。V组小鼠不少于10只，大鼠不少于6只，雌雄各半，雌性应6产无孕。2、供试药物的配制一般用水为溶剂，将药物配制成一定浓度的溶液。若选择其他溶剂或助溶剂，一般要求LD50〉15000mg/kg。3、给药方式与最大体积经口急性试验宜用灌0法,一次剂量直接灌入，给药前需禁食4—8小时，但不限制饮水。一次最大灌0量，小鼠不超过1.0ml/只，大鼠不超过4.0ml/只。若灌0量太大，可在24小时分成2—3次给药，但合并作为一日剂量计算。经注射急性毒性试验多采用腹腔注射,一次最大注射量，小鼠不超过1ml,大鼠不超过3ml。4、剂量与分组在正式试验前，首先用少量动物做预备试验，确定受试动物全部致死的最小剂量和全部不致死的最大剂量，正式试验一般分为5—7个剂量组。组间剂量呈等比级数，其比值为1.2—1.4。5、观察指标观察动物一般健康状况，中毒表现和死亡过程。观察时间一般为一周。对死亡动物应作大体剖检，必要时进行病理组织学检查。6、LD50计算采用寇氏或机率单入对数图解法计算供试药的LD50。值及其95%可信限范X。7、结果评定大鼠一次经口LD50在1mg/kg以下者为极毒，1一50mg/kg为剧毒，50一500mg/kg为中等毒，500一5000mg/kg为低毒，5000mg/kg以上者为实际无毒。（二）经皮给药的急性毒性试验1、动物选用健康家兔（2.0—3.0kg）、豚鼠（350—450g）或大鼠（200—300g）。9组动物不少于6只，雌雄各半。2、供试药物的配制供试药物如是固体，应磨成细粉状，过120目筛，并用适量水或无毒无刺激性赋形剂（橄榄油、羊©脂、凡士林等）混匀。如为液体，一般不要稀释。3、给药方式脱去动物背部脊柱两侧Q发（不得损伤皮肤），脱Q后24小时检查皮肤，如无损伤才能进行试验。将供试药物均匀地涂敷于脱©区，不应少于动物体表面积的10%,用塑料纸和两层纱布覆盖，再用胶布或绷带固定，以防脱落和动物舔食。敷聲4小时。试验结束后，用温水或适当溶剂清除残留供试药。大鼠可采用浸B方法给药。4、剂量与分组正式试验前，用少量动物做预备试验，根据24小时内动物死亡情况，估计LD50的可能范X，以确定正式试验的剂量。一般分为4个剂量组，组间剂量呈等比级数。其比值为：1.5—3.0。若用赋形剂，需设赋形剂对照组。5、观察指标注意观察动物的全身中毒表现和死亡情况。观察时间为一周。若给药4天后仍有动物死亡时，仍需继续观察一周，对死亡动物应作大体剖检，必要时进行病理组织学检查。6、结果评定兔涂皮LD50在5mg/kg以下者为极毒，5一44mg/kg为剧毒，44一350mg/kg为中等毒，350一2180mg/kg为低毒，2180mg/kg以上者为无毒。二、亚慢性毒性试验1、动物一般选用大鼠(100—200g)或小鼠(15—20g)。有条件时，采用供试药物的靶动物鸡等。外购动物需饲养一周后才能供试验用。2、试验周期根据临床或生产实际用药时间决定试验周期。临床用药期1一3天时，毒性试验给药期为14天；临床用药期7天时毒性试验给药期为28天；临床用药期30天时，毒性试验给药期为90天，临床用药期30天以上时毒性试验给药期为6个月。3、给药方式如试验周期短(14天)，应与临床应用的给药途径相同，内服时，大、小鼠用灌0法，鸡用药丸投予。给药周期28天以上时，则将药物混于饲料中，让其自由采食(应确保给药量不影响动物正常的营养需要)，饮水不限。4、剂量与分组至少三个剂量组和一个对照组，大鼠V剂量组至少20只，雌雄各半。高剂量组应有部分动物出现毒性反应或死亡(死亡数不超过20%)，低剂量组应高于药物对动物的有效量，原则上应不出现任何毒性反应。5、观察指标V天观察一般健康状况，包括活动、采食、饮水、发病和死亡情况。9周分别称体重、饲料消耗量2—3次，计算增重、平均摄食量及饲料利用率。定期作血液学检查：包括血色素含量、红细胞数、白细胞数及其分类计数、血小板数、网织红细胞数等。定期有选择地作血液生化学检查：包括谷丙转氨0、谷草转氨0、碱性磷酸0、血中尿素氮、非蛋白氮及肌酐含量，血清中白蛋白/球蛋白等。试验结束时测定肝、肾及其他脏器的绝对重量和脏器系数。试验结束时对所有动物(包括试验过程中死亡的动物)进行剖检，有选择地进行肝、，肾、脾、e肠等器官的组织病理学检查。在试验过程中，根据试验周期的长短，定期处死少量动物进行剖检与组织病理学检查