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文档简介
学习情景七
细菌的接种与分离技术
Q1什么叫细菌的接种?接种的目的是什么?Q2为什么要细菌分离?细菌分离的方法有哪几种?细菌的接种技术细菌接种就是将目标菌种转移到事先配好的培养基上使其繁殖增长的一种活动。接种的目的就是获得更多的目标菌,或者筛选出自己想要的菌。
接种和分离工具1.接种针2.接种环
3.接种钩
4.5.玻璃涂棒
6.接种圈
7.接种锄
8.小解剖刀细菌的接种工具接种工具的灭菌细菌的接种程序
接种程序通常分为5个步骤:①灭菌接种环(针);②待冷;③蘸取细菌或标本;④进行接种;⑤灭菌接种环(针)不同培养基中细菌接种技术一、液体二、固体三、半固体一、液体培养基中细菌的接种菌种液体培养基接种工具菌液菌苔液体培养基中细菌生长现象菌膜生长沉淀生长均匀混浊二、固体培养基中细菌的接种固体培养基连续划线
固体培养基平板培养菌落:单个细胞在固体培养基表面经过培养形成肉眼可见的微生物集团。菌落的鉴定价值:不同菌的菌落不同。同种菌在不同培养基上菌落不同。同种菌在不同培养条件下菌落不同。菌落的特征:
包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明度、光泽、表面、湿润度等。细菌菌落的特征一般都较小,菌落与培养基结合不紧密,用接种针容易挑起,多数表面较光滑、湿润、较粘稠,易挑取,质地均匀,色泽多样。固体培养基斜面培养菌苔:
微生物密集生长所形成的。其作用是可用来保存菌种。固体培养基中细菌的生长情况菌落(S型)菌苔菌落(R型)三、半固体培养基中细菌的接种穿刺接种法半固体培养基中无鞭毛菌:仅沿穿剌线呈明显线状生长。鞭毛菌:除沿穿剌线生长外并呈羽毛状或云雾状扩散生长。无动力有动力
不同的培养基,接种方法不尽相同,生长现象也各异:若细菌在液体培养基中生长,可表现为液体均匀混浊、出现菌膜或沉淀等不同现象;若在固体培养基上生长,可观察到菌苔(斜面培养)或菌落(平板分离培养);在半固体培养基中可见扩散生长或沿接种线生长。
细菌分离培养是为了获得较纯的目的菌。1.划线分离法2.涂布分离法细菌的分离技术划线分离法
用接种环蘸培养后的样品菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少。划线到最后,可使细菌间的距离加大。在培养10~20h后,可由一个细菌产生单菌落,菌落不会重叠。
涂布分离法
先将培养的菌液稀释,通常稀释到10-5~10-7之间,然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上,用涂布棒或玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,
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