纤维素提取方法

纤维素提取方法简介Howcouldweextractcellulosefromtreering-stepbystepPeiliFU(付培立)March14th2014referencesWielochT,HelleG,HeinrichI,etal.Anoveldeviceforbatch-wiseisolationofα-cellulosefromsmall-amountwholewoodsamples[J].Dendrochronologia,2011,29(2):115-117.LaumerW,AndreuL,HelleG,etal.Anovelapproachforthehomogenizationofcellulosetousemicro‐amountsforstableisotopeanalyses[J].RapidCommunicationsinMassSpectrometry,2009,23(13):1934-1940.主要步骤MainproceduresCrossdatingandSamplecutting;ExtractionHomogenizationFreezedryingWeighingandmeasuredwithmassspectrometry.样品的切取和称量

Cuttingandweighing

样品大小：厚度thickness0.5-0.8mm;samplesize>500μm样品量sampleamount：＞2mg

Samplesneededformassspectrometry:

onemeasurementof:C130.5mg；O180.3mg；

(production~30%)提取extractionNaOH5%solution溶液,60℃,2h,2times次;

（近沸腾热的去离子水，洗3次,washed3timeswithboiledde-ionedwater）NaClO27%solution溶液,60℃,8h,6times（醋酸溶液aceticacid,调节pH至4-5）;

（近沸腾热的去离子水，洗3次,washed3timeswithde-ionedboiledwater）NaOH17%solution溶液,室温(roomtemperature),2h,2times次

（1%HCl溶液洗1次，近沸腾热的去离子水，洗3次测pH,washedwith1%HCl,thenwashed3timeswithde-ionedboiledwater）判断是否提取完全(completelyextracted?)草酸溶液:每100mlNaClO2加草酸溶液0.5~1ml草酸

aceticacidsolutions:0.5ml~1ml/100mlNaClO27%纤维素转移cellulosetransferEppi管清洗(高压气体、去离子水）、加入1ml去离子水；纤维素转移镊子去离子水等冰箱4℃冷藏纤维素的同质化homogenization样品冷藏storeinrefrigerator(+4℃）方法：超声波；ultrasonic设置：cycle0.5，amplitude6-7；继续时间duration30s（13C2*15s18O30s

因不同物种而有所差异）；判断呈牛奶状(milky)，或者纤维素均一(orhomogenized盖上带孔的盖子，至于冰箱中冷冻(为低温真空干燥作准备)storedinrefrigerator-10℃真空低温干燥(freezedry)关闭排气阀、排水阀，检查油泵中油量多少。打开机器和油泵预热30分钟（warmup）；将样品放入，一般一次可放入3个eppi板（288个样品左右），主干燥程序，48h；真空度atm降至1.030mbar(maindryingprocess)调节程序至干燥后程序，24h；(afterdryprocess)

真空1.030mbar降至0.003~0.005mbar调节至待机程序小心打开排气阀，使压力升至1atm然后取出样品，打开排水阀，关闭机器和泵纤维素称量weighofcellulose使用半微量天平（与称量木材使用同一天平）精度0.01mg同位素测定premeasurement需要量theamountofcelluloseneeded:

18O300μg，13C500μg

银（18O,Silvercapsule）或者钛（13C,Titaniumcapsule）胶囊裹住；再次干燥：高温、真空将所有的水除去removeallthewaterinsamples;测定：质谱仪spectrometryDrybefroeanalysiswithmassspectrometrySamplesformassspectrometry:O18silvercapsule;C13Titaniumcapsule废液处理ThewasteNaClO27%注意溶液有气体产生,废液应敞口至于通风橱一段时间,然后再拧紧Gaswillemitfromthewaste