生物：第一章《基因工程》课件(浙教版选修3)

选修三现代生物科技第一章基因工程

1．在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。简述获得转基因发光玫瑰植株的完整技术流程。侵染荧光基因

含kan质粒重组质粒土壤农杆菌含重组质粒土壤农杆菌A构建导入B培养选择转基因发光植株再生植株愈伤组织离体玫瑰叶片组织C诱导选择分化D检测（1）A过程需要的酶有

。（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是

。（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

。（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用

作为探针。限制性内切酶和DNA连接酶具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存卡那霉素放射性同位素标记的荧光基因基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。根据图示,判断下列操作正确的是（）

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割A（山东）2.继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是

。（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入

中，原因是

。（3）通常采用

技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的

细胞中特异表达。（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的

转入

细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为

。显微注射技术

受精卵（或早期胚胎）受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达DNA分子杂交（核酸探针）膀胱上皮去核的卵核移植（或克隆）细胞核对某一DNA进行酶切，用A限制性内切酶酶切时，得到1个DNA片段，用B限制性内切酶酶切时，得到3个DNA片段，若同时用A、B限制性内切酶酶切时，得到4个DAN片段，则可判断该DNA有

个A限制性内切酶切点，有

个B限制性内切酶切点。13

第一步：获取目的基因（目的基因的序列已知）①化学方法合成目的基因②PCR(聚合酶链式反应)扩增目的基因2、从基因文库中获取目的基因（目的基因的序列未知）1、人工合成目的基因(根据已知蛋白质的氨基酸序列直接合成)（1）来源：（2）作用：原核生物(主要)识别和切割DNA分子内特定核苷酸序列

即:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。（3）特点：专一性(特异性)1、限制性核酸内切酶磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键（4）作用部位:（5）作用结果:产生黏性末端或平末端第二步：形成重组DNA分子2、“分子缝合针”

——DNA连接酶（1）作用：连接DNA片段间的磷酸二酯键，将外源基因和载体连接在一起（2）常用种类：①E.coliDNA连接酶：来源：大肠杆菌作用：只连接黏性末端②T4DNA连接酶：来源：T4噬菌体作用：连接黏性末端、平末端DNA连接酶比较DNA聚合酶3、“分子运输车”——运载体⒈载体需要的条件：⑴能在受体细胞中自主复制、表达并稳定保存⑵有1~多个限制酶切点，以便与外源基因连接⑶有某些标记基因，便于筛选

⑷对受体细胞无害⒉常用运载体：

⑴质粒⑵噬菌体或某些动植物病毒（最常用：大肠杆菌的质粒）：环状双链DNA1.将目的基因导入植物细胞农杆菌转化法基因枪法2.将目的基因导入动物细胞显微注射技术（最多、最有效）3.将目的基因导入微生物细胞CaCl2处理，以增加细菌细胞壁的通透性。花粉管通道法第三步：将重组DNA分子导入受体细胞第四步：筛选含有目的基因的受体细胞检测:转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因常用方法：利用标记基因(抗性基因)进行筛选或DNA分子杂交技术

基因工程是否获得成功，最重要的是要看目的基因是否在受体细胞中得到表达。第五步：目的基因表达1、检测目的基因是否转录出了mRNA？

DNA—RNA分子杂交技术2、检测目的基因是否翻译成蛋白质（表达）？抗原—抗体杂交如何检测目的基因是否表达？检测是否产生了目的基因产物。；/猫先生电竞lqu93hmo个学习的机会，咱们小学堂准备同时开办一期夜校，专门招收十五岁以上，三十岁以下的年青人。上夜校不耽误白天家里和地里的活计，也是免费学习，包括课本！”二狗子和大头听了，兴奋地带头鼓掌并大声欢呼起来：“好哇，太好啦！”耿正笑着示意大家安静，继续说“还有哇，希望大家伙儿回去后，记着转告那些今天不在场的左邻右舍们，也欢迎他们来学堂为自家的娃娃们报名。当然，愿意上夜校，年龄也合适的大人们也一样欢迎。有劳各位了，有劳各位了！”耿正说到最后，还连连向大家点头拱手表示感谢。大家伙儿笑得更开心了，七嘴八舌地说：“这有什么啊，顺便一句话的事儿！”“不用你说，俺们记着呢！”“嗨，俺先给俺家的娃儿报上名！这到时候哇，不等俺和邻家大人们说，娃儿们自己就把这个消息传扬开了！”“娃娃们传扬是他们自己的事，反正啊，俺是一定要和大人们说的！”在乡亲们热情洋溢的议论声中，刚刚喝完庆功酒的乡民们纷纷为自家的娃娃报名。耿英把报名学童的名字、性别、年龄，以及家长的名字，认真地填写在事先拟定画好的表格里。二狗子和大头，还有另外的几个大龄青年也都当场报了名，热切希望上夜校班学习。在随后的几天内，又有不少乡民专程来小学堂为自家的娃娃报名。还有不少的大龄青年则高高兴兴地跑来为自己报名，希望利用晚上的时间，使自己成为文化人儿。六亩试种的水稻获得了很不错的收成，这让耿老爹一家人喜上加喜。辛苦半年多了，一天天看着这些南方水稻在故乡的土地上试种成功的耿老爹，更是笑得合不拢嘴！新打的稻谷已经晒干了。耿老爹决定在儿女们的婚宴上，加上一道北方人非常稀罕的，香喷喷的白米肉丁炒饭！留了足够的稻种，自家留了一部分，送给左邻右舍各几麻袋，又分送给其他街坊邻居一些以后，耿老爹就让耿正和耿直把剩余的稻谷全部送到了舅舅家。从此之后，耿老爹妻弟一家在“三六九镇”上开的饭铺里，又增加了一道香喷喷的清蒸白米饭，以及各种口味儿的炒米饭。8第百三四回五道庙前谢佑恩|（供品多多心虔诚，五道庙前谢佑恩；各人祷告大不同，返回路上笑不停。）八月十六一大早，郭氏提前准备好了简单的早饭。饭后，来不及洗刷收拾，又开始准备供品、香火和纸元宝等等一应敬