标准解读

《GB/T 28981-2012 齿兰环斑病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准，主要针对齿兰环斑病毒（ORSV）的检测与鉴定提供了具体的操作指南。该标准适用于进出口花卉、观赏植物以及相关繁殖材料中齿兰环斑病毒的检疫和监测工作。它详细规定了从样本采集到最终结果报告的一系列流程。

首先，在样本准备阶段，标准明确了如何正确选取待检样品，并对不同类型的植物材料提出了具体的取样要求，确保所取得的样本能够准确反映被测对象的实际状况。

接着是病毒提取过程，这部分内容介绍了使用何种试剂及设备进行病毒RNA或DNA的有效分离与纯化，为后续检测打下基础。

对于检测方法，《GB/T 28981-2012》推荐采用RT-PCR技术作为主要手段来识别齿兰环斑病毒的存在与否。文中不仅给出了详细的实验步骤，还包括了所需引物序列等关键信息，以保证实验操作的一致性和可靠性。

此外，标准还涉及到了阳性对照品的选择与制备方法，这对于验证检测系统的有效性至关重要。同时，也强调了实验室安全措施和个人防护的重要性，确保所有操作都在符合生物安全规范的前提下进行。

最后，在结果分析部分，标准指导了如何根据电泳图谱或其他形式的数据来判断样品是否感染了齿兰环斑病毒，并要求记录完整的实验数据与结论，以便于追踪复查。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-12-31 颁布
  • 2013-06-01 实施
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T28981—2012

齿兰环斑病毒检疫鉴定方法

Detectionandidentificationofodontoglossumringspotvirus

2012-12-31发布2013-06-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T28981—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国宁波出入境检验检疫局中华人民共和国上海出入境检验检疫

:、

局中国检验检疫科学研究院中华人民共和国浙江出入境检验检疫局

、、。

本标准主要起草人闻伟刚陈先锋杨翠云郭立新鲁洁张永江张明哲徐瑛崔俊霞张慧丽

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28981—2012

齿兰环斑病毒检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了齿兰环斑病毒血清学和分子生物学特征的检测方法

。

本标准适用于种子种球花卉和种苗等植物材料中齿兰环斑病毒的检测也适用于蚜虫等传播媒

、、,

介中该病毒的检测

。

2齿兰环斑病毒基本信息

中文名齿兰环斑病毒

:

学名

:odontoglossumringspotvirus

缩写

:ORSV

属烟草花叶病毒属Tobamovirus齿兰环斑病毒其他信息参见附录

(),A。

3方法原理

利用基于抗原抗体反应的双抗夹心酶联免疫吸附测定

(Doubleantibodysandwichenzyme-linked

体外合成技术的反转录聚合酶链式反应

immunosorbentassay,DAS-ELISA)、DNA(Reverse

实时荧光反转录聚合酶链式反应

transcriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、(real-time

进行检测鉴定

fluorescentRT-PCR)。

4仪器设备用具和试剂

、

41仪器设备

.

仪实时荧光仪超净工作台电子天平感量电泳仪电泳槽凝胶成像系统

PCR、PCR、、(:0.001g)、、、、

高速冷冻离心机超低温冰箱高压灭菌锅小型食品加工机微波炉酶标仪

、(-80℃)、、、、。

42用具

.

可调式微量移液器及相应的无吸头无

(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、

离心管管和研钵等

RNase、PCR。

43试剂

.

主要试剂和缓冲液见附录和附录

BC。

5检测

51样品制备

.

取种子种球鳞片或畸形变色症状的叶片等植物组织

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