标准解读

《GB/T 31797-2015 啤酒花潜隐类病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准，主要针对啤酒花中可能存在的潜隐类病毒进行检测与鉴定。该标准详细规定了从样本采集到最终结果分析的一系列流程，旨在为啤酒花的健康状态提供科学依据，保障农业生产和食品安全。

首先，在样品采集方面，标准明确了不同生长阶段及部位（如叶片、茎部）作为取样对象，并给出了具体的操作指南，包括如何选取代表性植株以及采样数量的要求等。这一步骤对于确保后续检测准确性至关重要。

接着是样品处理部分，介绍了将收集到的新鲜或干燥植物材料制备成适合实验条件下的形式，比如通过研磨、过滤等方式获取细胞液或者提取RNA/DNA。此外还涉及到了保存条件和时间限制等内容，保证待测物质处于最佳状态。

核心内容之一是关于病毒核酸的提取与纯化技术。这部分描述了几种常用的方法来高效地从复杂背景中分离出目标序列，并强调了减少非特异性吸附的重要性。同时指出应根据实际情况选择合适的技术路线。

随后进入到了PCR扩增反应环节，这是整个鉴定过程中最为关键的步骤之一。标准不仅列出了推荐使用的引物序列及其对应的目标区域信息，而且对反应体系构建、循环参数设定等方面也做了明确规定。为了提高灵敏度和特异性，还特别提到了多重PCR策略的应用可能性。

最后是对扩增产物进行电泳分析或测序验证的过程。通过比较条带大小、位置等特征与预期模式是否一致，可以初步判断是否存在特定类型的潜隐类病毒；进一步地，通过对阳性样本进行直接测序并与数据库比对，则能够实现更为精确的物种鉴定。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2015-07-03 颁布
  • 2015-11-27 实施
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GB/T 31797-2015啤酒花潜隐类病毒检疫鉴定方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T31797—2015

啤酒花潜隐类病毒检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofHoplatentviroid

2015-07-03发布2015-11-27实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T31797—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国宁波出入境检验检疫局中华人民共和国北京出入境检验检疫

:、

局中华人民共和国新疆出入境检验检疫局中国农业科学研究院植物保护研究所石河子大学

、、、。

本标准主要起草人郭立新邓丛良段维军张祥林李世访姜冬梅荣德福刘升学

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T31797—2015

啤酒花潜隐类病毒检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了啤酒花潜隐类病毒的检疫鉴定方法

。

本标准适用于啤酒花Humulusluulus及其无性繁殖材料种子花粉上啤酒花潜隐类病毒的检

(p)、、

疫鉴定同时也适用于葎草Humulusaonicus和异株荨麻Urticadioica上啤酒花潜隐类病毒的检

,(jp)()

疫鉴定

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3仪器设备主要用具和主要试剂

、

31仪器设备

.

电子天平感量普通天平感量高速冷冻离心机小型瞬时离心机普通冰箱超

(0.001g)、(0.1g)、、、、

低温冰箱制冰机涡旋振荡器磁力搅拌器高压灭菌锅计仪微波炉电泳仪电

(-80℃)、、、、、pH、PCR、、、

泳槽凝胶分析成像系统实时荧光仪杂交炉塑料薄膜封口机紫外交联仪暗箱摇床可调移

、、PCR、、、、、、

液器

(2.5μL,10μL,20μL,200μL,1000μL,5000μL)。

32主要用具

.

无吸头无离心管

RNase(10μL,20μL,200μL,1000μL,5000μL)、RNase(1.5mL,5mL,

研钵研棒磁性分离架反应管实时荧光孔反应板杂交瓶杂交膜杂交

10mL)、、、、PCR(200μL)、96、、、

袋光片

、X。

33主要试剂

.

除另有规定外所有试剂均为分析纯实验用水应符合中相关规定检测试

,,GB/T6682。RT-PCR

剂见附录实时荧光检测试剂见附录斑点杂交检测试剂见附录

B;RT-PCRC;D。

4检测样品制备

41种子类

.

随机抽取至少粒种子样品进行表面消毒后置于铺有吸水纸的白瓷盘或培养皿中在适宜的发

50,,,

芽温度条件下催芽直至长出第一对真叶发芽时间大约一周或者在消毒的土壤中直接种植直至长

,();,

出第一对真叶取

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