食品安全快速检测技术-农药残留检测专题讲课讲稿

食品安全快速检测技术--农药残留检测专题2/7/20232/7/2023酶抑制率法2/7/2023注意事项2/7/2023项目二农药残留快速检测实验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测GB/T5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测一、实验目的：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定2/7/2023项目二农药残留快速检测2/7/2023项目二农药残留快速检测2/7/2023快速检测试纸法2/7/2023项目二农药残留快速检测四、速测卡测定农药残留的主要步骤1）整体测定法剪成1cm碎片，取5g放入带盖瓶，加入10ml缓冲液，振摇50次，静置2min。取1片速测片，用白色药品蘸取提取液，放置10min以上进行预反应速测卡对折，用手捏3min或用恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应，每批设定一个空白2/7/2023项目二农药残留快速检测四.速测卡测定农药残留的主要步骤2）表面测定法（粗筛法）滴2-3滴缓冲液溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦取1片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上放置10min以上，进行预反应将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。每批测定设一个空白对照2/7/2023请注意2/7/20232/7/2023项目二农药残留快速检测五、速测卡测定农药残留的注意事项1）空白对照2）次生物质3）预反应温度4）反应时间5）滴加溶液的数量6）预反应时间一致7）观察结果时间1min2/7/2023项目二农药残留快速检测六、检测结果判断

1、结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。与空白对照卡比较：白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。对阳性结果的样品可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。

2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。2/7/2023说明2/7/2023知识扩展12/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/2023项目二农药残留快速检测第二法：酶抑制率分光光度法2/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/2023项目二农药残留快速检测开机：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1min自检完毕后，仪器进入待机检测状态2/7/2023项目二农药残留快速检测2、试剂配制2.1、缓冲液：取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中，搅拌溶解制成磷酸缓冲液（pH7.6）,常温保存。2.2、显色剂：取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解，使用时取100μL，4℃冰箱保存。2.3、底物：取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取100μL，4℃冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取20μL，4℃冰箱保存。2.4、胆碱酯酶：酶制剂无需配制，可直接取用，使用时取100μL，4℃冰箱保存。2/7/2023项目二农药残留快速检测3、样品提取取2g果蔬样品（块茎类取4g)，叶菜剪成25px左右见方的碎片，块茎类取横截面样品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL缓冲液，振荡1～2min，倒出提取液，静置2min，待测2/7/2023项目二农药残留快速检测4、测试1）对照测试：2.5mL缓冲液——加入100μL酶液——显色剂——混匀，静置10min——加入100μL（或20μL）底物——摇匀，立即倒入比色杯中。及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖。按〈B〉键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，计时完毕，显示屏显示吸光度增量(ΔC)及抑制率。在进行对照测试时，2～8通道可同时进行样品测试。2/7/2023项目二农药残留快速检测4、测试2）样品测试：2.5mL待测液——加入100μL酶液和显色剂，混匀——静置10min——加入100μL（或20μL）底物，摇匀并立即倒入比色杯中。及时放入仪器的测量室通道，合上盖。按〈M〉键，显示屏下方延迟