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第第页第第1页2019第九章酶免疫技术一、一、A11、检测HIV感染的初筛试验常用A、对流电泳法B、酶免疫法C、免疫荧光法D、免疫印迹法E、PCR法2、检测HBsAg最常用的方法为A、凝集试验B、酶联免疫吸附试验C、荧光免疫法D、分子生物学法E、火箭电泳3、HRP与TMB反应后,加H2sO4终止反应前呈A、蓝色B、橙黄色C、棕黄色D、黄色E、紫色HRP与底物OPD反应后的测定波长为278nm450nm403nm495nm492nm5、用于标记的HRP的RZ值应大于2.43.01.53.55.06、酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为下述哪几种类型A、均相异相B、同相均相C、异相固相D、口相均相E、口相异相7、在ELISA技术中,将抗原或抗体固相化的过程称为A、封闭

B、固定C、包被D、吸附E、结合8、辣根过氧化物酶的酶活性基团为A、糖蛋白B、亚铁血红素C、活跃糖基D、醛基E、羟基9、下列说法错误的是A、TMB是ELISA中应用最广泛的底物B、一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物AP系统的敏感性一般高于应用HRPB、一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统AP较难得到高纯度制剂,稳定性较HRP低,价格较HRP高,制备酶结合物时得率也较HRP低E、B□半乳糖苷酸的底物常用10E、B□半乳糖苷酸的底物常用10、下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的4-甲基酮基-R-D半乳糖苷A、可测定产物生成量B、可测定底物消耗量C、C、需最适pHD、口最适温度D、口最适温度E、与底物浓度无关11、HRP与底物TMB反应后的测定波长为A、278nmB、450nmC、403nmDA、278nmB、450nmC、403nmD、495nmE、492nm12、ELISA板包口后,最常用的封闭物质是A、人白蛋白B、人球蛋白C、牛血清白蛋白D、牛血清球蛋白E、鼠白蛋白13、选择ELISA的标记用口,下面哪一项特性是不需要的A、具有可与抗原、抗体结合的基团B、标记抗原后,口活性保持稳定C、当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制D、酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好E、口的稳定性、可溶性好14、酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用A、抗原稀释法B、抗体稀释法C、口标记物稀释法D、棋盘滴定法E、A+B15、ELISA双抗原夹心法检测抗体时,固相载体包被物是A、口标记的抗原B、口标记的抗体C、未标记的已知抗原D、未标记的已知抗体E、未标记的抗抗体16、酶联免疫吸附试验(ELISA)中应用最多的底物是A、邻苯二胺(OPD)B、四甲基联苯胺(TMB)C、ABTSD、对硝基苯磷酸酯E、以上都不是17、在双位点ELISA实验中,造成抗原检测值低于实际含量的常见原因是A、固相抗体过多B、反应时间不够C、标记抗体过多D、口测物过浓E、酶活性过高18、酶免疫技术中酶的要求A、酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高B、易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定C、作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响D、酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好E、以上都是19、下述哪一种酶联免疫吸附实验方法最常用于抗原测定A、间接法ELISAB、反向间接法ELISAC、竞争法ELISAD、双抗体夹心法ELISAE、捕获法20、ELISA中最常用的固相载体是A、聚氯乙烯B、聚苯乙烯C、三聚氰胺

D、琼脂糖EDODO二、B1、A.DOOB.双抗体夹心法测抗原DOODOOODODOODOO<1>、以下示意图是哪一种ELISA检测模式ELISA检测模式<2>、以下示意图是哪一种ABCD<3>、以下示意图是哪一种

EELISA检测模式【答案解析【答案解析2、【正确答案【答案解析3、【正确答案【答案解析ABCDE答案部分一、A11、【正确答案】B口酶联免疫吸附试验是最常用的HIVO体初筛试验。】B口检测HBsAg最常用的方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)。】A口TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色,最大吸收峰波长为450nm。4、

【正确答案】E【答案解析口OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下口橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。5、【正确答案】B【答案解析6、口用于酶免疫技术的HRP,其RZ值应大于3.0。【正确答案】A【答案解析两类。】酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相和异相这7、【正确答案】C【答案解析8、】将抗原或抗体结合在固相载体上的过程称为包被。【正确答案】B【答案解析9、】辣根过氧化物酶由糖蛋白和亚铁血红素组成,其酶活性基团为亚铁血红素。【正确答案】B【答案解析口邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物。一般采用对硝基苯磷酸酯作为碱性磷酸酶(APDO底物。在ELISA中应用AP系统,其敏感性一般高于应用HRP系统,空白值也较低。但AP较难得到高纯度制剂,稳定性较HRP低,价格较HRP高,制备酶结合物时得率也较HRP低。在ELISA中,B-半乳糖苷酸的底物常用10、4-甲基酮基-R-D半乳糖苷。【正确答案】E【答案解析耗量来反映。口酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物,反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消11、【正确答案】B【答案解析口TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色,最大吸收峰波长为450nm。12、【正确答案】C【答案解析13、口ELISA板包口后最常用的封闭物质是牛血清白蛋白。【正确答案】C【答案解析14、口选择ELISA的标记用口,保证标记抗原后,口活性保持稳定。【正确答案】D【答案解析15、】最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、抗原作一系列的稀释,即棋盘滴定。【正确答案】C【答案解析】间接法测抗体是检测抗体最常用的方法,其操作步骤如下:①将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原,洗涤;②加稀释的受检血清;③加酶标抗抗体;④加底物显色。由此可知固相载体包被物是未标记的已知抗原。16、【正确答案】B【答案解析口TMB具有稳定性好,成色无需避光,无口突变作用等优点,已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。17、【正确答案】D【答案解析】测定时将含待测抗原标本和酶标抗体同时加入进行反应,两种抗体互不干扰,经过一次温育和洗涤后,即可加入底物进行显色测定。但当待测抗原浓度过高时,过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成,出现钩状效应。18、【正确答案】E【答案解析】1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后,酶活性可出现抑制或激活。4.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。19、【正确答案】D【答案解析口ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体,口抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。20、【正确答案】B【答案解析】目前国内外一般均使用聚苯乙烯塑料,此种材料具有很好的光透性和蛋白吸附能力,且很容易加工成试管、微孔板、微球、珠、膜等形状的固相,价格低廉。二、B1、【正确答案】B【答案解析】双抗体夹心法基本原理是先将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体;加入待测标本并温育,使标本中的抗原与固相抗体充分反应,形成固相抗原抗体复合物,洗涤除去其他未结合物;然后加入酶标抗体并温育。使固相抗原抗体复合物与酶标抗体结合,形成固相抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物(双抗体夹心),洗涤除去未结合酶标记抗体;加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物,根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量检测。【正确答案】C【答案解析】竞争法原理为先用抗小分子的特异性抗体如同双抗体夹心法一样包被固相,然后同时加入待测样本和酶标记的小分子,待测样本中的小分子与酶标小分子竞争与固相上的抗小分子

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