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第8动物的克隆(一目标导航1.简述动物细胞、组织培养与体细胞克隆。2.说出动物组织培养技术的发动物克隆的技术基础 1.动物细胞、组织培养:首先,将动物体内的 取出,经 些细胞得以生存,并保持生长、乃至接触抑制和有规律的衰老、等生命活动现象(2)传代培养: 分成若干份,接种到若干份培养基上,使其继 ①概念:在组织培养过程中 ②种类 (2)概念:把 从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的 特点 ②添加 细胞工程 水平上的生物工程,其主要技术 2.细胞杂交:细胞融合可以在 进行,其 知识点 动物细胞培 A.都需要用CO2培养箱 知识点 动物细胞融材料一由于细胞的密度不同,在地面上受重力影响,细胞的融合非常,在太空进行此实验比在地面实验的细胞融合率要高很多神舟”六号飞船上进行了B淋巴细胞和骨160min 动物甲、乙的产生分别属于哪种生殖 , (4)人工诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方法相同的是都可用物理法和化学法此外动物细胞融合还可 B.灭活C.电刺 D.离 原代培 B.传代培C.细胞 D.细胞()进行动物细胞培养时,最好选用的培养材料是()B.成熟动物的体细C.动物的卵细D.健康动物胚胎或幼龄动物的体细胞 动物细胞融合和植物原生融合决定于( C.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的、电激、紫外线照射 D.DNADNA在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞生长到细胞表面 时,细胞会停止增殖,这种现象称为细胞的 用的酶 随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞停止,进而出 的量 现用某种大分子对细胞进行染色时观察到死细胞被染色而活细胞不染色, 检查某种毒物是否能改变细胞的数目,最好选用细胞到 进行。细胞+(3)CRD,求每组平均值并进行统计分 (3)实验中采用3H-TdR的原因 家蚕细具有高效表达外源的能力将人干扰素导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。进行转操作前,需 采用PCR技术可验证干扰素是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、
第8动物的克隆(一一、动物的细胞和组织培养1.一部分组织机械消化或胰酶消化单个细胞2.(2)原代培养的细胞生长增殖3.(1)①可连续传代②连续细胞系有限细胞系4.(1)一个单细胞细胞群体细胞克隆(2)(3)单个细胞(4)①选择适宜的培养基③以滋养细胞支持生长二细胞细胞培养 细胞融合1.两个或多个细胞融合成一个细胞的现象2.型相同或不同的细胞间型不同的细胞间的融合1.D层细胞相互接触后停止生长克隆培养法培养过程中仅有极少数细胞的型会发生改10性,可以进行传代培养。]思路导引准确理解细胞培养的技术要求及现象,逐一辨析各选项。知识动物细胞培养概念:从动物中取出相关的组织,将它们分散成单个细胞,然后,放在适宜的②接触抑制:当贴壁细胞生长到表面相互接触时,细胞就会停止增殖的现象10滞大部分细胞衰老但是有极少数细胞能度“而继续传下去这些存活的细400⑥细胞系:当细胞株传至50代以后又会出现“”不能再传下去。但有部分细胞遗传物质发生了改变而且带有的特点获得不死性可在培养条件下的传代下去,这种传代的细胞称为细胞系。2.C养液中还需要加入一定的动物其气体环境是95%空+5%的二化碳以维持培养pH必须在条件下进行再分化过程则需要一定的光照条件动物细胞培养就是细胞的增殖,不能体现细胞的全能性,而植物组织培养体现了植物细胞的全能性。]归纳提 动物细胞培养与植物组织培养的比快速繁殖,培育无植株培育成植物或组细胞有分化,无细胞无分化,有可能②都是细胞有丝过 成分中有动物。3.(1)克服了远缘杂交不亲和的解决了因两种细胞密度不同而难以融合的问(2)有性生殖;无性生殖(3)三(4 障的从而能够按照人们的意愿把来自不同物种的不同组织类型的细胞融合起来,克服了远缘杂交不亲和的。若在太空中进行细胞融合,可以解决因两种细胞密度不同而难以融合的问题。(2)动物甲是通过精卵结合产生的,属于有性生殖,而乙是通过体细都是细胞膜的流动性。(4)动物细胞融合,除了可以利用诱导植物原生融合的方法外,知识动物细胞融②融合成功的标志:杂交细胞进行有丝4.B[植物细胞与动物细胞相比由于具有细胞壁结构而无法直接进行融合,所以融合归纳提升导原生融克服远缘杂交不亲和的,扩展杂单克隆抗体、、干扰素特别提 动、植物细胞融合的主要不同点①灭活的是动物细胞融合常用的诱导剂,植物体细胞杂交不用此诱导剂1.A[在进行动物细胞培养前,先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开,以增加2.B[物理、化学方法在动植物细胞融合时都可用,灭活的诱导是动物细胞融合3.D[细胞系细胞的遗传物质发生了改变,而且带有的特点,可在培养条件下无4.B[在植物组织培养过程中所用的是固体培养基,而在动物细胞培养过程中需制成5.D[在进行动物细胞培养时,用的是健康幼龄动物细胞或胚胎,这类细胞有旺盛的6.A[大规模生产干扰素,用于抵抗细菌产生的外毒素,应该属于工程和发酵工7.A9CRNAB胰蛋白酶可分解动物组织细胞间的物质从而将组织分散成单个细胞,C项正。DNA连接可连接两个DNA片段形磷酸二酯键,D误]10.(1)相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶(2)衰老甚至不死(无限增殖)降低由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性,大分子能够进入死细胞内而)有丝中(5)抗解析(1)动物细胞培养过程中当贴壁细胞生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止增殖这种现象称为细胞的接触抑制此时瓶壁上形成单层细胞要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用胰蛋白酶处理。(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止进而出现衰老甚至但极少数细胞可以连续增殖其中有些细胞会因遗传物质之为细胞系(朝方向发展)。(3)大分子对细胞进行染色时,活细胞不能染色,原因是活细胞的膜具有选择透过性,大分子不能进入活细胞内。(4)检查某种毒物是否能改变细胞的数目,最好选用细胞到有丝中期的细胞进行显微镜观察,因为在有丝中期形态稳定、数目清晰,便于观察。(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后发生了排斥现象这是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行11.(1)XY(DNA如果乙组CRD明显高于甲组,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)有促进作用;如果乙CRD组基本相同,说明X对Y细胞增殖(DNA无影响;如果乙组CRD低于甲组,说明XY细胞增殖(DNA有抑制作用(3)3H-TdRDNA的原料之一,可根CRD(DNA解析(1)该实验的变量为某物质(X)的有无,因变量为细胞内的放射性强度的大小。-TdR是用来合成DNA的原料,若细胞旺盛,则细胞内的放射性强度的平均值(CRD)就比较高。所以该实验的目的是探究X对Y细胞增殖(DNA合成)的影响。(2)X对Y细胞增殖(DNA合成)的影响可能是促进、抑制或无任何作用。如果乙组CRD明显高于甲组,说明X对Y(DNACRDXY(DNA合成)无影响;如果乙组CRD明显低于甲组,说明XY细胞增殖(DNA合成)有抑制作用。(3)碱基T
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