学科重点2011分子生物学

1、反义RNA：碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA。可以作为一根据反义RNA的作用机制可将其分为3类反义RNA直接作用于靶mRNASD序列，直接抑制翻译；Ⅱ类反义RNAmRNA的非编码区结合，引起mRNARNAmRNA2、生物：又称DNA或，它们是DNA杂交探针技术与半导体工光标记的DNA样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进AUGAUG8～13SD因澳大利亚学者(Shine)和(Dalgarno 16SrRNA3’端的互补序列配对结合，使起 子定位于翻译起始部位5、表达：是指生物组中结构所携带的遗传信息经过转录、翻译等6、核酸探针：能与特定目标核酸序列发生杂交，并含示踪物的核酸片段(DNARNA件而调节转录活性的蛋白质因子。在结构上含有与DNA结合的结构域（DNA能识别并结合上游调控区的顺式作用元件对表达有正性和负性调控作用其活性调8、粘粒：又称质粒，是一类由人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列质粒子的杂种质粒载体它是为克隆和增殖真核组DNA的大区段而设计的，是组建真核生物文库及从多种生物中分离的有效。9.：酵母人工(yeastarifcialhromooe，，结构上能够模拟真正酵母染色体的线状DNA分某种生物的一段的酵母人工YAC有天然所的功能元件包括一个着丝粒一个DNA起两个端粒YAC能够容长达几百b外源DNA这是质粒和黏粒办不到的大片段的插入更有可能包含完整的在移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整组文库所需的克隆数目。10、转动物：应用转技术培育的携带外源并能稳定遗传的动物、：12敲除敲除就是通过同源重组将外源定点整合入靶细胞组上某一确、：13.诊断：是以DNA和RNA为诊断材料，通过检查的存在、缺陷或表达异常，对人得到一群完全相同的片段，又称DNA克隆，通过无性繁殖过程所产生的与亲代完15、组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和16、质粒：是存在于细菌外的、具有自主能力的环状双链DNA分子DNADNA17RNA是指在进化过程中高度保守的由双链RNA（dsRNA）诱发的同源mRNA18、蛋白质组学：在整体水平上研究细胞内蛋白质组成及其活动规律的科学。的整体而全面的认识。异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子.加。DNA不同生物的重复序列不同。TTAGGGAATCCC.polymorphism，之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。由于碱基组成的变化而RFLP。23RNADNARNADNADNADNA、平的变化以及是否存在异常的外源核酸，DNARNA、的存在、缺陷或表达异常，对 外合成放大技术，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程，可用于已知序列或部分已知序列的检测；或扩增出 1、简 治疗的基本程序 2*的转运3*选择治疗用靶细胞4*治疗性的导入5*外源 的筛检6*导入体内2、简述 产物的抑癌机制；RbE2F（G1/S、SRbE2F殖3cAMPcAMP－PKAG（GTP，α与βγ解离）③G④AC催化ATP生成CAMP⑤CAMP活化PKA（依赖CAMP的蛋白激酶）⑥PKA使目标CAMP－PKA途径-失活：信息分子与受体解离，受体失活→G蛋白失活（GTP被水GDP，αβγ亚基重新聚合）→AC→CAMP→PKA4PCR作为引物的一对寡核苷酸与模板DNA同源序列按照碱基互补配对原则形成局部TaqDNADNA25-30DNA5、真核生物和原核生物组的特点1、原 组的特点①原核生 组通常仅由一条环状双链DNA分子组成②子结构是原核生物组的结构特点之一原核生物的绝大多数结 子可转录出多顺反子mRNA。 组序列中编码区所占的比例较大。可表达约50%， ④在原核生 组中的非编码区内主要是一些调控序列 ⑥细 组中的可移动成分能产生转座现象2、真 组的特点，①真核生 组远大于原核生 ，②组由DNA和外DNA组成③真核为单顺反子，而细菌和的结构多为多顺反子④组中非编码区多于编码区⑤真核多为不连续的断裂，由外显子和内含子镶嵌而成⑦功能相关的构成各种；还存在一些假⑨体细胞为双倍体，而和为单倍体1、DNA结合域有不同的结构模式：①锌指结构借助半胱氨酸和组氨酸与锌离子DNA60旋结构的区域，称为同源结构域,简称同源域。③亮氨酸拉链结构使两个单体结DNAα2DNA①一般具有三个功能域：DNA③对的表达有正性或负性调控作用，激活和阻遏的表达7、 聚合酶的功能一、DNA（DNA3’聚合酶活性；5’3’外切酶活性；3’5’cDNADNA3’SangerDNAⅠklenow：5’3’聚合酶；3’5’外切酶；5’3’外切酶活性8、以乳糖子例，说明细菌表达的调控原理1、乳糖子的组成：大肠杆菌乳糖子含Z、Y、A三个结构，分别编码半乳糖苷酶透酶和半乳糖苷乙酰转移酶此外还有一个元件O一个动子P和一个调节I（是调节，编码产生阻遏蛋白。2阻遏蛋白的负性调节没有乳糖存在时，I编码的阻遏蛋白结合于序列O处，抑制RNA聚合酶与启动子结合，乳糖子处于阻遏状态，不能合成分3、CAP的正性调节：lac启动子是弱启动子，在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖子启动序列附近的结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构转录，调节蛋白结合于子后促进结构的转录，对乳糖子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。4、协调调节：乳糖子中的I编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控9、DNA1紫外线引起DNA损伤：①形成胸腺嘧啶二聚体②引起DNA之间的交联DNA与DNA2、电力辐射引起DNA损伤：①可导致碱基变化：由.OH自由基引起，包括DNA的变化：脱氧核糖分解，最后可引起DNA链断裂。③可导致DNA断裂：使脱氧核DNADNA-DNA3DNADNADNA456、DNA也会产生自发性损伤：①DNA时产生碱基错配；②DNA修复使产生基错配；③碱基自发改变导致DNA损伤：互变异构位导致DNA突变；脱氨基作用DNADNA101、必须有自身的子2、载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA3、载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和重组子45DNA11、何谓工程？试述其产生的背景与研究内容、工程(geneticengineering)：有目的地通过分子克隆技术，利用克隆表达特定的蛋白或多肽产物，或定向改造结构所用的方法及相关的工作统称为工程。、目的的获取：从生物有机体的组中分离带有目的的DNA片段重组在体外将带有目的的DNA片段连接到能自我并具有选择标志的将重组分子导入受体细胞（细菌）:K-12DNA分析和表达将选出的细胞克隆的目的进行进一步分析并实现功能蛋白的12DNA，P53DNAp53p53p53蛋白1p21G1P21抑制cyclin-CDK活性，RB磷酸化少结合E2F，E2F不能作用于靶表DNA合成酶，细胞从G1期进入S2GADD45DNA3Bax、IGF-BP3、Fas13DNAP53DNADNAChk2P53P53，P53（1）p21cyclin-Cdk1G1、G2（2）14-3-3，Cdc25C，G214、原癌活化的机制(1)点突变；(2)扩增；(3)重排 易位 启动子及增强子的插入；(6) 的协同作用15 治疗的策略和技术方（一 治疗的主要策、 置换或称矫正：用正常的置换组中的缺陷，不影响 、 添加或称增补：不去除异常 （1）（2）使之不能表达，以达到治疗疾病的目的。如利用反义RNA、核酶、小干扰RNA等抑制或降解相应的mRNA，或导入，使细胞“。（二）干预的几种方1RNA：mRNA（RNA）RNAmRNA2RNA,(RNA),3、RNARNAmRNADicerRN（siRNA，21-23bp，siRNA（由核酸内切酶和解旋酶等组成）RNA（RISCRNA4、技术：又称为前体药物酶转化，可将无毒的前体药物代谢为细胞毒性药物，使导入的细胞“。HSV-tk/GCVCD/5-FC16、目前诊断方法有哪些（一）核酸分子杂交的主要类型:（1）Southernblot（2）Northern（3）（4）（5）DNA（二）PCR，（四）DNA分子多态性分析:在人群中间DNA序列存在着差异称为DNA多（RFLP（VNTR（SNPAluI，（五）（六）DNA17、IP3、DG由PIP2水解产生的IP3是水溶性的小分子物质，离开细胞膜后能在细胞质内很快地扩散，IP3Ca2+-通道结合后，就能使内质网腔里的Ca2+释放到细胞质而且释放的Ca2+具有正反馈效应即释出的Ca2+结合到Ca2+Ca2+释放。DGC(proteinkinaseC,PKC)，PKCCa2+IP3Ca2+PKCCa2+DG胞膜磷脂成分中的磷脂酰丝氨酸的共同作用下激活PKC。哺乳动物中脑细胞的PKCPKC因子磷酸化并激活，从而调控相关的表达。18构域()组成的例如酵母的转录激活因子GAL4，在N端有一个由147个氨基酸组成的DNA结合域(DNAbinding,BD)，C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(transcriptionactivation,AD)。GAL4分子的DNA结合域可以和上游激活序列(upstreamactivatingsequence，UAS)结合，而转录激活域则能激活UAS下游的进行转录。但是，单独的DNA结合域不能激活19.（1）20.①Grb2ShcSh2与胰岛素受体结合后，MAPk途径被激活。Grb2预先与哺乳动物鸟嘌呤核苷酸交换因子（mSOS）连接（mSOS为一个核苷交换蛋白，RasGDPGTPRas。RasRaf的