酸类非甾体抗炎药物的分析

酸类非甾体抗炎药物的分析课件安徽医科大学陈纭老师第一页，共八十七页，2022年，8月28日羧酸芳酸安徽医科大学陈纭老师第二页，共八十七页，2022年，8月28日胺芳胺芳伯氨基安徽医科大学陈纭老师第三页，共八十七页，2022年，8月28日常见的芳酸类非甾体抗炎药物水杨酸类安徽医科大学陈纭老师第四页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第五页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第六页，共八十七页，2022年，8月28日贝诺酯安徽医科大学陈纭老师第七页，共八十七页，2022年，8月28日邻氨基苯甲酸类甲芬那酸(mefenamicacid)安徽医科大学陈纭老师第八页，共八十七页，2022年，8月28日双氯芬酸钠邻氨基苯乙酸类安徽医科大学陈纭老师第九页，共八十七页，2022年，8月28日布洛芬芳基丙酸类安徽医科大学陈纭老师第十页，共八十七页，2022年，8月28日酮洛芬安徽医科大学陈纭老师第十一页，共八十七页，2022年，8月28日萘普生安徽医科大学陈纭老师第十二页，共八十七页，2022年，8月28日吲哚乙酸类吲哚美辛安徽医科大学陈纭老师第十三页，共八十七页，2022年，8月28日苯并噻嗪甲酸类吡罗昔康安徽医科大学陈纭老师第十四页，共八十七页，2022年，8月28日美洛昔康安徽医科大学陈纭老师第十五页，共八十七页，2022年，8月28日其他非甾体抗炎药物对乙酰氨基酚安徽医科大学陈纭老师第十六页，共八十七页，2022年，8月28日第一节结构与性质

一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐

共同点：苯环、羧基

不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基、杂环等）

安徽医科大学陈纭老师第十七页，共八十七页，2022年，8月28日二、性质

（一）物理性质

（1）固体具有一定的熔点

（2）溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。

安徽医科大学陈纭老师第十八页，共八十七页，2022年，8月28日（二）化学性质

1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸；

—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强安徽医科大学陈纭老师第十九页，共八十七页，2022年，8月28日—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱

邻位取代>间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强安徽医科大学陈纭老师第二十页，共八十七页，2022年，8月28日2.酯键、酰胺键可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。3.UV安徽医科大学陈纭老师第二十一页，共八十七页，2022年，8月28日4.IR5.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。6.色谱法—制剂分析安徽医科大学陈纭老师第二十二页，共八十七页，2022年，8月28日第二节鉴别试验

一、FeCl3反应

具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物安徽医科大学陈纭老师第二十三页，共八十七页，2022年，8月28日

直接：水杨酸、双水杨酯、对乙酰氨基酚

水杨酸ChP（2010）[鉴别]（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。安徽医科大学陈纭老师第二十四页，共八十七页，2022年，8月28日

间接：阿司匹林、贝诺酯

阿司匹林ChP（2010）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。安徽医科大学陈纭老师第二十五页，共八十七页，2022年，8月28日二缩合反应安徽医科大学陈纭老师第二十六页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第二十七页，共八十七页，2022年，8月28日三、芳伯氨基反应重氮化—偶合反应

具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，如对乙酰氨基酚

安徽医科大学陈纭老师第二十八页，共八十七页，2022年，8月28日四、氧化反应安徽医科大学陈纭老师第二十九页，共八十七页，2022年，8月28日五、水解反应

乙醇和硫酸△

（香味）

安徽医科大学陈纭老师第三十页，共八十七页，2022年，8月28日1.测定λmax；λmin。

例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml；λmax；265nm,273nm;λmin。245nm,271nm。2.测定λmax

例如：双氯芬酸钠，20μg/mlλmax=276nm;

3.在λmax处测定一定浓度供试液的吸收度A

。

例如：20μg/ml甲酚钠酸甲醇液在λmax=279nm，A=0.69~0.74；在λmax=350nm，A=0.56~0.60。

紫外吸收光谱法安徽医科大学陈纭老师第三十一页，共八十七页，2022年，8月28日

4.在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收度比值法）

例如：对氨基水杨酸钠10μg/ml;A265/A299=1.56~1.56再例如：二氟尼柳20μg/ml（盐酸乙醇液）;A251/A315=4.2~4.6

安徽医科大学陈纭老师第三十二页，共八十七页，2022年，8月28日红外吸收光谱法水杨酸的红外吸收图谱3300~2500cm-1O-H1660cm-1C=O1610,15701480,1440苯环C=C775cm-1Ar-H安徽医科大学陈纭老师第三十三页，共八十七页，2022年，8月28日返回3700~2900cm-1N-H、O-H1640cm-1N-H1580cm-11500cm-1C=C1300cm-1C-N1188cm-1C-O对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱安徽医科大学陈纭老师第三十四页，共八十七页，2022年，8月28日八、色谱法

安徽医科大学陈纭老师第三十五页，共八十七页，2022年，8月28日一、阿司匹林（一）溶液的澄清度限制无羧基的杂质检查原理

阿司匹林可溶于碳酸钠无羧基杂质不溶于碳酸钠第三节特殊杂质检查

安徽医科大学陈纭老师第三十六页，共八十七页，2022年，8月28日（二）、阿司匹林中水杨酸的检查

1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）安徽医科大学陈纭老师第三十七页，共八十七页，2022年，8月28日2.检查方法ChP(2005):对照法

反应原理三氯化铁反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）安徽医科大学陈纭老师第三十八页，共八十七页，2022年，8月28日ChP(2010):HPLC法

色谱柱：ODS流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)供试品溶液：10mg/L的1%冰醋酸甲醇溶液检测波长：303nm

外标法以峰面积计，游离水杨酸≤0.1%安徽医科大学陈纭老师第三十九页，共八十七页，2022年，8月28日有关物质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）

ChP：HPLC法，ODS柱，流动相A:同游离水杨酸检查；流动相B：乙腈，梯度洗脱检测波长：276nm，供试液稀释液（0.5%）为对照，杂质峰（除水杨酸外）面积和≤对照液主峰面积。安徽医科大学陈纭老师第四十页，共八十七页，2022年，8月28日二、双水杨酯中有关物质的检查

水杨酸：杂质对照品法ChP(2010)有关物质：BP（2005）TLC，高低浓度对比法安徽医科大学陈纭老师第四十一页，共八十七页，2022年，8月28日

甲芬那酸是以邻-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下

缩合而成，因此成品药物中要检查铜盐及有关物质。

分光光度法：利用Cu2+与Na-DDC呈色后测定A

1.铜盐检查法

原子吸收分光光度法：BP（2000）

2.有关物质的检查

主要检查的是酰胺、二甲基苯胺和邻氯苯甲酸各国药典均采用HPLC法中的自身高低浓度对照法。三、甲芬那酸中特殊杂质的检查安徽医科大学陈纭老师第四十二页，共八十七页，2022年，8月28日第四节含量测定一、中和法1.直接滴定法pKa3～6安徽医科大学陈纭老师第四十三页，共八十七页，2022年，8月28日阿司匹林ChP（2010）

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。安徽医科大学陈纭老师第四十四页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第四十五页，共八十七页，2022年，8月28日（1）测定方法及计算Ka=3.27×10-4反应摩尔比为1∶1

（2）讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言安徽医科大学陈纭老师第四十六页，共八十七页，2022年，8月28日②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定安徽医科大学陈纭老师第四十七页，共八十七页，2022年，8月28日2.剩余滴定法

美洛昔康含量测定ChP（2010）：供试品加25ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）25ml，采用溴麝香草酚蓝指示液，盐酸滴定液（0.1mol/l）回滴。

安徽医科大学陈纭老师第四十八页，共八十七页，2022年，8月28日3.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林安徽医科大学陈纭老师第四十九页，共八十七页，2022年，8月28日USP（32）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。安徽医科大学陈纭老师第五十页，共八十七页，2022年，8月28日2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：安徽医科大学陈纭老师第五十一页，共八十七页，2022年，8月28日反应摩尔比为1∶2优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰安徽医科大学陈纭老师第五十二页，共八十七页，2022年，8月28日4.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片（ChP2005采用，2010改用HPLC法）如阿司匹林片的测定：安徽医科大学陈纭老师第五十三页，共八十七页，2022年，8月28日取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

安徽医科大学陈纭老师第五十四页，共八十七页，2022年，8月28日第一步中和安徽医科大学陈纭老师第五十五页，共八十七页，2022年，8月28日第二步水解后剩余滴定水解：安徽医科大学陈纭老师第五十六页，共八十七页，2022年，8月28日2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O反应摩尔比为1∶1本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰

剩余滴定：安徽医科大学陈纭老师第五十七页，共八十七页，2022年，8月28日片剂含量测定结果的计算

安徽医科大学陈纭老师第五十八页，共八十七页，2022年，8月28日5.非水碱量法如吡罗昔康

冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点

安徽医科大学陈纭老师第五十九页，共八十七页，2022年，8月28日二、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法二氟尼柳、美洛昔康、尼美舒利、对乙酰氨基酚制剂.ChP（2010）安徽医科大学陈纭老师第六十页，共八十七页，2022年，8月28日精密量取本品适量（约相当于二氟尼柳0.1g），置100ml量瓶中，用0.1mol/l盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5m1，置100ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于315nm的波长处测定吸收度，按对照法计算含量。安徽医科大学陈纭老师第六十一页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第六十二页，共八十七页，2022年，8月28日2.柱分配色谱—紫外分光光度法USP（32）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3

SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3AAS、SA保留冰醋酸洗脱，280nm测AAS量安徽医科大学陈纭老师第六十三页，共八十七页，2022年，8月28日供试品液：CHCl3液洗脱液1：CHCl3洗脱液2：HAC-乙醚硅藻土，FeCl3-尿素玻璃棉硅藻土，NaHCO3供试品液：CHCl3-HCl液洗脱液1：HAC-CHCl3

(1:10)10ml洗脱液2：HAC-CHCl3(1:100)85ml

1-杂质先洗脱2-SA后洗脱max=306nmAu＜As1-杂质先洗脱2-ASA后洗脱max=280nmASA(mg)=C(Au/As)安徽医科大学陈纭老师第六十四页，共八十七页，2022年，8月28日三、HPLC阿司匹林栓剂ChP（2010）离子抑制RP色谱法外标法定量流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)检测波长：276nm安徽医科大学陈纭老师第六十五页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第六十六页，共八十七页，2022年，8月28日安徽医科大学陈纭老师第六十七页，共八十七页，2022年，8月28日例1．鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是

A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾

安徽医科大学陈纭老师第六十八页，共八十七页，2022年，8月28日例2.乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为

A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.两步滴定法D.柱色谱法E.双相滴定法

安徽医科大学陈纭老师第六十九页，共八十七页，2022年，8月28日例3．测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是

A.重量法B.酸碱滴定法C.高效液相色谱法D.络合滴定法E.高锰酸钾法

安徽医科大学陈纭老师第七十页，共八十七页，2022年，8月28日例4.两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是

A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg

安徽医科大学陈纭老师第七十一页，共八十七页，2022年，8月28日反应摩尔比为1∶1T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c——滴定液浓度，mol/LM——被测物的摩尔质量，g/moln——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1∶n安徽医科大学陈纭老师第七十二页，共八十七页，2022年，8月28日例5.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是

A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠E.醋酸苯酯

安徽医科大学陈纭老师第七十三页，共八十七页，2022年，8月28日例6.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1

安徽医科大学陈纭老师第七十四页，共八十七页，2022年，8月28日例7.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点E.有利于第二步滴定

安徽医科大学陈纭老师第七十五页，共八十七页，2022年，8月28日例8.采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为A.2:1B.1:2C.1:1D.3:1E.以上都不对

安徽医科大学陈纭老师第七十六页，共八十七页，2022年，8月28日例9.阿司匹林中含量最高的杂质为A.乙酰水杨酸酐B.乙酰水杨酸水杨酸C.水杨酸D.水杨酰水杨酸E.以上都不对

安徽医科大学陈纭老师第七十七页，共八十七页，2022年，8月28日例10.用直接滴定法测定阿司匹林含量A.反应摩尔比为1：1B.在中性乙醇溶液中滴定

C.用盐酸滴定液滴定

D.以中性红为指示剂E.滴定时应在不断振摇下稍快进行

安徽医科大学陈纭老师第七十八页，共八十七页，2022年，8月28日3.按规定对药品检验完毕后，应对检查结果进行A、与标准比较B、校正C、