DB44T 1011-2012水体中甲基睾丸酮的测定

DB44/T1011—2012DB44/T1011—2012ICS13.060Z16备案号：34644-2012DB44省地方标准DB44/T1011—2012水体中甲基睾丸酮的测定Determinationofmethyltestosteroneresiduesinwater2012-09-15实施2012-06-042012-09-15实施广东省质量技术监督局发布-XX- —■—刖 5本标准按照GB/T1.1-2009的规定进行起草。本标准的附录A为资料性附录。本标准由广东省海洋与渔业局提出。本标准由广东省水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所、中山市渔农养殖科技开发加工园。本标准主要起草人：杨贤庆、邓建朝、岑剑伟、吴燕燕、魏涯、黄卉、陈曼华。水体中甲基睾丸酮的测定1范围本标准规定水体中甲基睾丸酮残留量的高效液相色谱检测方法。本标准适用于水体中甲基睾丸酮残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理以二氯甲烷提取水体中残留的甲基睾丸酮，提取液蒸发至近干后，用流动相溶解定容，经微孔滤膜过滤，用反相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量。4试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682一级水的标准。4.1甲醇：色谱纯。2二氯甲烷。30.5%乙酸溶液：取0.5mL冰乙酸于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。4.4甲基睾丸酮标准储备液（200Mg/mL）:准确称取甲基睾丸酮标准品（含量N98%）10.0mg,用甲醇（4.1）溶解，定容于50mL容量瓶中，-18C避光保存。4.5甲基睾丸酮标准工作液：准确吸取适量甲基睾丸酮标准储备液（4.4）,用甲醇（4.1）逐级稀释成浓度为0.05dg/mL〜50M-g/mL的标准工作液。5仪器5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。2电子分析天平：感量0.0001go5.3萃取振荡仪。4旋转蒸发器。6色谱条件1色谱柱：成柱，250mn）X4.6mm（i.d.）,粒度5pm；或与之相当的色谱柱。6.2流动相组成：甲醇（4.1）+0.5%乙酸溶液（4.3）=77+23（V1+V2）.3流速：1.0mL/minoDB44/T1011—2012DB44/T1011—2012226.4柱温：30'Co6.5进样量：20此。6.5检测器：检测波长254nmo7操作方法7.1样品制备将水样混合均匀，12h内测定；如不能立即测定，应放置于0-C-4-C冰箱中，48h内测定。7.2提取和净化先将水样用0.45師膜过滤，除去固体杂质。准确移取100mL水样于250mL分液漏斗，加入30mL二氯甲烷，震摇5min,静置分层，将二氯甲烷层移至100mL的梨形瓶。向分液漏斗加入30mL二氯甲烷重复上述步骤一次，静置分层后，将二氯甲烷层并入同一梨形瓶，于45C条件下减压蒸发至近干。残留物用1.0mL流动相溶解，取溶解液过0.45師微孔滤膜，供液相色谱测定。7.3色谱分析将标准工作液和样品提取液置于液相色谱仪进样器中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内，根据标准品的保留时间定性，外标法定量。标准色谱图参见附录A中图A.1-8计算试样中甲基睾丸酮的残留量按照公式（1）计算，计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字。X=_x—x.x]ooo （1）4x^式中：—试样中甲基睾丸酮含量，单位为微克每升（Ug/L）；cs——标准溶液中甲基睾丸酮含量，单位为微克每毫升（M/mL）;A—试液峰面积响应值；4 标准溶液峰面积响应值；-—试液定容体积，单位为毫升（mL）;H——试样体积，单位为毫升（mL）.9线性范围甲基睾丸酮标准溶液的线性范围：0.05囹/mL〜50dg/mL。10检测限、精密度和回收率10.1检测限本方法的检测限：0.5M-g/LoDB44/T1011—2012DB44/T1011—2012#10.2精密度本方法的相对标准偏差W10%。10.3回收率本方法甲基睾丸酮