大环内酯类药物抗菌作用分子机制及其支原体耐药性研究进展755

---------------------------------------------------------大环内酯类药物抗菌作用分子机制及其支原体耐药性研究进展吴聪明中国农业大学动物医学院大环内酯(Macrolides)类药物是由链霉菌产生或半合成的一类以一个大环内酯为母体，通过羟基，以苷键和1~3个糖分子相连而成的弱碱性抗生素。按其内酯环上碳原子数的不市以来，迄今已开发出大环内酯药物逾百种，用于临床的已有十几种。大环内酯类抗生素除对革兰氏阳性菌有较强的抗菌活性外，对耐青霉素金黄色葡萄球对大环内酯类药物原有结构进行改造，获得了一系列抗菌活性更强、药动学参数更优的第二二代大环内酯类抗生素具有：1)对酸稳定，口服生物利用度高；2)血浆药物浓度、组织体液克服诱导耐药性为方向，开始了第三代大环内酯类药物的研究，至今已开发出了酮内酯 (Ketolides)、酰内酯(Acylides)、氮内酯(Azzilides)等大环内酯药物新亚类，其中酮内酯类的泰利霉素(telithromycin)已被批准用于临床，有效控制了多重耐药肺炎链球菌等感染(1-4)。新型大环内酯类药物研发方兴未艾，但随着大环内酯类药物在人医及兽医物的疗效(5-8)。条件。本文对大环内酯类药物的抗菌作用机制尤其是分子机制文献进行了综述，并跟踪了支原体对大环内酯类药物耐药性的研究进展。---------------------------------------------------------十四元大环内酯类红霉素(Erythromycin)、克拉霉素(Clarithromycin)、地红霉素 以及十六元大环内酯类螺旋霉素(Spiramycin)、交沙霉素(Josamycin)、泰乐菌素(Tylosin)和麦迪霉素(Midecamycin)等在结构上与红霉素相似，与细菌的靶结合位点也与红霉素基本相同。一些不属于大环内酯类的抗生素，如林可胺类(Lincosamide)和链阳性霉素B (StreptograminB)虽然与大环内酯类的分子结构不同，但因为它们与大环内酯类药物同细菌rRNA的结合位点存在较大的重叠，故称为MLS药物。B大环内酯类药物对细菌的作用靶位是核糖体，细菌核糖体由30S小亚基和50S大亚基组成，大亚基又由23SrRNA和核糖体蛋白组成，23SrRNA分Ⅰ~Ⅵ个域，根据碱基互补配对原则折叠成二级结构，并与核糖体蛋白作用维持其立体构象(见图一)。早前利用生化和遗传学技术绘制了大环内酯类药物在细菌核糖体大亚基上的结合作用部位(9-14)。但有关各种---------------------------------------------------------其与抗生素复合体的晶体结构以后，才开始得以阐明(15-18)。---------------------------------------------------------核糖体及其抗生素复合体晶体衍射证实了RNA是构成大环内酯类药物结合靶位的主要成分(见图四)。即23SrRNAⅤ域内的许多核苷残基与大环内酯类药物分子相互作用，尤其是，素和其它十四元环药物的脱氧氨基糖(desosamine，德糖胺)侧链与23SrRNAⅤ域A2058和A2059(按E.coli核苷酸序列编号)分子上的氮原子形成氢键。23SrRNAⅤ域2611-2057位的碱基尤其是2057位的核苷，也可能与十四元内酯环C5位的脱氧氨基糖形成氢键(18)，还可直接与内酯环产生疏水作用(16)。此外，脱氧氨基糖侧链还能与G2505的磷酸骨架发生相互作用，十六元内酯环C5位的碳霉胺糖-碳霉糖(mycaminose-mycarose)侧链也能与2058位的腺苷形成氢键，表明该位置核苷是所有大环内酯药物的主要结合部位之一。泰乐菌素、碳霉素A(carbomycinA)和螺旋霉素C5位的碳霉胺糖-碳霉糖还可能与23SrRNAⅤ域的其它区域产生疏水作用。内酯环C5位的糖基与2057-2059之间的相互作用可解释为什么该部位的核苷突变或2058位腺苷二甲基化可造成大环内酯类药物耐药性(18)。内酯环与核糖体之间的相互作用可占药物自由结合能的25%(19)。其中内酯环与23SrRNAⅤ域2057-2059位碱基形成的疏水作用尤为突出(19)。Haloarculamarismortui的核糖体大亚基与十六元环泰乐菌素、碳霉素A和螺旋霉素形成的复合体结晶结构衍射(16)结果表明，内酯环C6位的乙醛基与23SrRNAⅤ域A2062的N6形成了一个可逆性的共价键，从而增强了这些药物的结合能。这种相互作用在十四元环红霉素和十五元环阿齐霉素不存在，因为它们内酯环的C6位是一个十四、十五元环敏感性无影响。酮内酯是最近开发出的新三代大环内酯类药物。它们以内酯环C3位的克拉定糖被酮基取代为特征，多数酮内酯药物还含有烷芳基侧链及一个11，12-氨基甲酸。与结构改造前的大环内酯类药物相比，酮内酯药物与核糖体之间具有更强的结合力(20，21)。最近解析了酮内酯药物——ABT-773与D.radiodurans核糖体复合体的结晶，结果未能获得酮内酯亲和力提高的分子线索。红霉素及其它十四元环药物的内酯环上11，12位的羟基能与23SrRNA的U2609形成氢键。在ABT-773(及其它酮内酯药物)结构上由氨基甲酸取代了羟基，在D.radiodurans50S亚单位中也与能与U2609形成氢键。生化证据表明这种相互作用对酮内酯比对红霉素及其它十四元环药物更重要，因为U2609→C可造成细菌对酮内酯耐药而对其它药据表明各种大环内酯类药物包括红霉素、酮内酯和泰乐菌素与23SrRNA---------------------------------------------------------Ⅱ域内的35螺旋(helix35)还存在相互作用(10，14)。细菌23SrRNA的35螺旋发生突变或转录后修饰可引起大环内酯低水平耐药(14，22)。晶体结构显示十六元环泰乐菌素的粘多糖(mucinose)侧链完全可到达35螺旋并与之结合(19)，但却没有发现十四元环红霉素、ABT-773和阿齐霉素与35螺旋的相互作用(18)。目前，除酮内酯11，12-氨基甲酸与23SrRNA的U2609存在相互作用外，在晶体衍射研究中还未发现酮内酯侧链与核糖体之间与23SrRNA结合力进一步增强的主要因素。大环内酯药物分子通过其功能基团与核糖体的23SrRNA之间形成的疏水作用和氢键作用(一些十六元环药物还存在共价键作用)限制在作用靶位，这些与rRNA的相互作用占据了互作用。如泰乐菌素的粘多糖侧链与L22相互作用，螺旋霉素的糖胺(furosamine)残基与L4相互作用(19)。核蛋白与大环内酯分子之间的相互作用可解释为什么核蛋白L22和L4域的编码基因突变可引起大环内酯类药物耐药(23-26)。大环内酯类药物对蛋白质合成抑制的详细分子机制取决于药物特定的化学结构。因为药物分子结构影响其与核糖体的相互作用及抑制作用方式。大环内酯类药物对蛋白质合成抑制可归纳为四种方式：1)在翻译早期抑制新生肽链的延伸(27，28)；2)促使肽基转移RNA以上大环内酯类药物的作用方式与它们在细菌核糖体上的结合靶位有关。大环内酯类药物的结合靶位在核糖体大亚基内新生肽出口通道的肽基转移酶中心附近。药物分子内酯环C5位的糖基伸至肽基转移酶中心，十六元环泰乐菌素、螺旋霉素和碳霉素A (carbomycinA)C5位的碳霉胺糖-碳霉糖侧链较长，可伸至肽基转移酶的活性部分直接干扰肽键形成的催化过程(16，30)。十四元环红霉素等药物分子由于C5位的脱氧氨基糖残基较短，达不到肽基转移酶位置，从而使得它们缺乏转肽作用的抑制效应(31-33)。大环内酯类药物对蛋白合成抑制的主要机制与它们结合在新生肽出口通道有关。出口通图二、图三)(15，34-36)。早期认为核糖体内新生肽的合成过程中这个通道是惰性的、不活动的，事实上整个通道是一个极其活跃的功能单元(37)。研究表明，核糖体与通道内通道相对较宽(平均约15------------------------------------------------------------------------------------------------------------------埃)，但距离肽基转移酶中心不远却有一个由糖蛋白L4和L22域形成的狭窄部(宽约10埃)。大环内酯类药物紧紧接合于这个狭窄部，对正在生长延伸的多肽链起着分子路障 (molecularroadblock)作用(16，18，37)。刚开始几个氨基酸可自如形成新生肽，但迫使多须的延伸过程停止下来。一旦多肽合成受到抑制，肽基转移RNA也就会从核糖体上解至今仍未能确定结合有大环内酯药物的核糖体所能催化新生肽生长的长度。在聚腺苷依赖(poly(A)-dependent)无细胞翻译系统中，大环内酯可引起二-赖氨酸的积聚，但抑制了更长肽链的合成；在聚尿苷依赖(poly(U)-dependent)蛋白合成系统中，红霉素引起了二-苯丙氨酸、三-苯丙氨酸的积聚，而抑制了更长肽链的生成(32，33)。最近从人工合成mRNA驱动的体外翻译系统中观察到红霉素可引起携带6-8个氨基酸肽链的肽基转移RNA积聚，这种现象似乎与以上述红霉素对短肽延伸抑制情况相矛盾。此外，酮内酯类药物替利霉素 (telithromycin)可使核糖体合成9-12氨基酸的新生肽。模型研究表明肽基转移酶中心至大环内酯结合狭窄部的间距仅仅适合容纳6-8个氨基酸(18)。因此，红霉素为什么会影响二肽的延伸？替利霉素为什么又会让12氨基酸的新生肽合成？是否新生肽以特定方式在核糖体内折叠？是否在大环内酯类药物抑制作用下新生肽生长长度取决于肽内氨基酸的构成环内酯类药物分子和新生肽竞争同一出口通道，如果特定肽链同大环内酯类药物分子一样与出口通道壁之间存在亲和力，则有可能通过竞争将药物分子从结合部位挤出，如果是这样，不同蛋白合成受大环内酯类药物分子抑制的程度就会存在差异，差异性取决于药物结构、新大环内酯类药物干扰核糖体组装可能进一步增强了它们对蛋白合成的抑制作用(40，NASS合上，从而影响了特定分子构象重排，阻止了具完整功能50S大亚基的组装，无功能的50S大亚基中间产物因不能进一步形成有功能的核糖体而最终被核糖核酸酶降解掉(42)。目前合成抑制的背景下，目前仍不明白是否组装抑制造成的核糖体减少会加剧蛋白合成抑制程---------------------------------------------------------II域35发夹(Hairpin35)和V域中心环框内放大示意；圆圈中的核苷酸为大环内酯类药物主要结合靶位图二核糖体新生肽出口通道内的红霉素作用部位(正向观)图三新生肽通道内红霉素作用部位(侧面观)图四细菌(D.radiodurans)核糖体50S亚基内红霉素的结合靶位(立体观)---------------------------------------------------------RNA方兴未艾。阐明大环内酯类药物的抗菌作用机制尤其是药物分子与细菌核糖体之间相互作用的分子机制，是改造该类抗菌药物避免细菌耐药性的理论基础。未阐明。如在大环内酯类药物抑制核糖体的翻译过程中大环内酯类药物抑制合成的新生肽长度以及延伸抑制与新生肽序列的关系，在大环内酯类药物抑制50S大亚基组装的过程中药物分子究竟与50S大亚基什么样的中间产物结合以及它们的结合靶位等问题，大环内酯类药物分子诱导肽基转移RNA解离动力学的详细过程，是否所有蛋白翻译都被抑制到同一程度，一些蛋白翻译被大环内酯类抑制比其它被抑制更有效？等等问题。相信随着更多核糖体及其展各种支原体(Mycoplasmas)对大环内酯类药物呈现不同的固有耐药表型。人源支原体中，肺炎支原体(M.pneumoniae)(43)对所有MLSKs均敏感；人型支原体(M.hominis) (44)对十四、十五元环内酯、酮内酯(telithromycin)、奎奴普丁(Quirupristin)耐药而对十六元环内酯(螺旋霉素、泰乐菌素除外)和林可胺类药物敏感；发酵支原体(M.rmentanshyopneumoniae)(46)对十四元环内酯耐药而对十六元环内酯和林可胺类药物敏感；鸡毒Mgallisepticum衣阿华支原体(M.iowae)(47)对十四、十六元环内酯和林此外，絮状支原体(M.flocculare)(48)对十四元环内酯耐药而对十六元环内酯和林可胺。---------------------------------------------------------支原体固有的大环内酯类药物耐药表型多样化吸引人们对其耐药机理进行深入研究。Furneri等(49)对3株人型支原体(PG21、CT-PAF、CT-Mh1)进行研究。克隆测定菌株的株人型支原体23SrRNAⅤ域中间环的2057位(对应大肠杆菌序号)为腺嘌呤(A)。红霉素敏感肺炎支原体23SrRNAⅤ域的2057位(对应大肠杆菌序号)为鸟嘌呤(G)(43)，已观察到大肠杆菌的23SrRNA2057位发生G→A替换突变可造成红霉素耐药但仍对十六元环内酯和林可胺类药物敏感(35)。因此推测3株菌支原体的红霉素固有耐药表型与该突变有关。S.Pereyre等(44)比较研究了人型支原体对十四、十五元环内酯类药物的固有耐药性和肺炎支原体对大环内酯类药物的天然敏感性的遗传基础。在确定人型支原体存在两个核糖L4和L22编码基因，并与大肠杆菌及其它肺炎支原体的对应序列进行比较，结果人型支原体和发酵支原体在两个操纵子上的23SrRNAⅤ域核甘酸序列的2057位是腺嘌呤(A)而肺炎支原本是鸟嘌呤(G)，人型支原体在2610位是尿嘧啶(U)而肺炎支原本是胞嘧啶(C)；人型支原体和发酵支原体在两个操纵子上的23SrRNAⅡ域核甘酸序列752位是腺嘌呤(A)因此，尽管人型支原体和发酵支原体在752位是腺嘌呤(A)而肺炎支原体是胞嘧啶(C)，物水平降低而耐药的情况。A它们也存在G2057A替换，因此认为这些菌株对十四元环内酯固有耐药、对十六元环内酯和---------------------------------------------------------研究报道了肺炎支原本对红霉素耐药性的分子机制。他们以红霉素诱导肺炎支原体M129模式株的耐药性，结果获得M129-ER1和M129-ER2两个突变子，对大环内酯-林可霉素-B型链阳性菌素(MLS)表现高水平耐药，其中M129-ER1对十四元环内酯(红霉素和竹桃霉素)、林可BER(麦迪霉素、螺旋霉素和泰乐菌素)表现出比M129-ER1更高耐药水平。测定23SrRNA基因Ⅴ域核苷酸序列，结果发现M129ER1株在中央环的2063位(大肠杆菌序号应为2058)发生了A→G替换，M129-ER2株在2064位(大肠杆菌序号应为2058)发生了A→G替换。与其它大环内酯类菌株的耐药表型密切相关。突变子分离得到的核糖体与[14C]标记红霉素的亲和力显著降低于G变对十六元环内酯药物更高水平的耐药性。Pereyre等(43)进一步研究肺炎支原体M129株对多种大环内酯类药物及其它相关药物的诱导耐药性并探讨其耐药分子机理。在亚抑菌浓度 (subinhibitoryconcentrations)下经过23~50次传代诱导获得耐药突变子。除奎奴普丁(quinupristin)外，突变子对其它选择药物的MIC均有提高。克隆测定突变子23SrRNA基因II域和V域以及核蛋白L4、L22编码基因核苷酸序列并与原菌株M129比较，结果在红霉素A(ErythromycinA)、阿齐霉素(azithromycin)、交沙霉素(josamycin)、奎奴普丁-达福普丁(quinupristin-dalfopristin)和替利霉素(telithromycin)突变子中，23SrRNAII域没有发生突变，而V域发生了C2611A和A2062G(大肠杆菌序号)点突变；克林霉素(clindamycin)、替利霉素突变子在核蛋白L4中分别发生了H70R和H70L(肺炎支原体序号)单氨基酸突变；奎奴普丁-达福普丁和原始霉素(pristinamycin)突变子在核蛋白L4的60位(肺炎支原体序号)插入了1个、2个或3个相连甘氨酸；替利霉素突变子在核蛋白L22发生了P112R和A114T(肺炎支原体序号)替换以及111IPRA114(肺炎支原体序号)缺失。红霉素A和VCA感株在含红霉素的培养基中传代培养。结果筛选出11株红霉素耐药肺炎支原体，其中3株在23SrRNA基因发生了A2063G(大肠杆菌应为2058位)点突变，对十四元环内酯类(红霉素和点突变，对十四元环内酯类和十六元环均表现出高水平耐药；3株发生了A---------------------------------------------------------克拉霉素低水平耐药的肺炎支原体不存在2063位和2064位点突变，可能存在其它耐药机制。Okazaki等(51)还从克林霉素和克拉霉素治疗无效的肺炎病人分离出1株肺炎支原体，克隆测序23SrRNA基因发现其存在A2063G点突变。Matsuoka等(52)检测了日本2000-2003年临床分离的13株大环内酯耐药肺炎支原体(12株高水平耐药M，1株低水平耐药)23SrRNA换突变(对应大肠杆菌2058位)，1株发生了A→C突变；1株在2064位(对应大肠杆菌2059位)发生了A→G替换突变；低水平耐药株在2617位(对应大肠杆菌2611位)发生了C→G颠SrRNAIILL说明肺炎支SrRNA2064位点突变造成。Furneri等(53)在体外用交沙霉素诱导人型支原体PG21株的耐药性，并研究其耐药分子机理。获得PG-21/JR和PG-21/JR2两个突变子，对十六元内酯类药物(交沙霉素和Miocamycin)耐药，但林可胺类药物(克林霉素和林可霉素)敏感。23SrRNA基因克隆测序点突变与菌株的耐药表型有关。Pereyre等(44)从临床分离到两株交沙霉素耐药人型支原体MHb1和MHb2。MHb1对十六可霉素和克林霉素)均高水平耐药，MHb2对十六元环内酯类和替利霉素高水平耐药而对林可胺类药物仅中度耐药，两菌株对奎奴普丁-达福普丁和原始霉素仍敏感。克隆测定各菌株发生了A2059G和C2611U(大肠杆菌序号)替换突变，而DNAMHb2相同操纵子(rrnB)仅发生了A2059G替换突变；两临床菌株与PG21模式株的23SrRNAII域35发夹(hairpin35)的核苷酸序列相同；检测核蛋白L4和L22编码基因核苷酸序列，同样与PG21模式株一致。推测两来菌株的大环内酯类耐药表型，其中23SrRNAV域A2059G替换突变可造成菌株的十六元环内酯类药物耐药表型，而C2611U突变可能与菌株的林可胺类耐药性显著提高有关。---------------------------------------------------------支原体耐药性研究，发现鸡毒支原体极易对红霉素产生耐药性。Zanella等(55)在体外诱出现；而泰乐菌素耐药性则需9-11代诱导才出现。诱导耐药株对多种大环内酯类抗生素存霉素诱导耐药株对泰乐菌素仅敏感性有所降低，不存在交叉耐药性。Gautier-Bouchardon定耐受泰乐菌素。衣阿华支原体比鸡毒支原体及滑液支原体更易诱导出大环内酯类耐药性，提示大环内酯类抗生素耐药性的诱导速度快慢受支原体种类及药物性质的影响。因此等推测衣阿华支原体比鸡毒支原体及滑液支原体有更高的突变率。Takahashi等(56)体外诱导鸡毒支原体对泰乐菌素的耐药性，经10次传代诱导获得的菌株对泰乐菌素的最小抑菌浓度仅至今仍缺乏动物源支原体大环内酯类药物耐药性分子机制的研究报道。已有研究表明，细菌可通过药物主动外排、药物修饰失活、)药物靶位改变、产生抗性肽等四种途径对大环内酯类药物耐药(57)。综述可见，23SrRNA和核糖体蛋白突变是支原体对大环内酯类耐药的主要机制。至今未发现支原体内存在甲基转移酶编码基因(43，58)。已获得了由ABC型外排泵介导人型支原体对大环内酯类耐药的生理生化证据，在生殖道支原体、肺炎支原体(59)和猪肺炎支原体 素等大环内酯类药物大量广泛用于防治食品动物支原体感染(如猪气喘病、鸡慢性呼吸道病以几个方面加强支原体大环内酯类耐药性研究：---------------------------------------------------------1)加强动物源致病性支原体尤其是猪肺炎支原体和鸡毒支原体的大环内酯类耐药性机2)深入开展支原体临床株的大环内酯类耐药性研究，获得支原体临床株核糖体RNA及核蛋白的耐药突变位点及突变发生频率，确定突变与耐药表型的关系。ABC制。4)建立快速检测方法监控人和动物致病性支原体大环内酯类耐药性的发生和发展。1.Kirst,H.A.Macrolideantibioticsinfood-animalhealth.Exp.Opin.Invest.Drugs.1997,6:103-1173.张桂枝,罗永煌.大环内酯类抗生素研究进展.动物医学进展.2004,25(3):33-364.张建民,第三代大环内酯酮内酯类抗生素.国外医药抗生素分册.2000,21(1):3-,215.姜成刚,佟恒敏,李艳华.大环内酯类药物对链球菌耐药性及耐药机制.黑龙江畜牧兽医.2005,3:55-566.王明贵,张婴元.细菌对大环内酯类抗生素耐药机制的研究进展.国外医药抗生素分册.2000,21(1):13-157.杨慧,沈叙庄.肺炎链球菌对于大环内酯类抗生素的耐药.国外医药抗生素分册.2005,26(2):74-778.曾雪峰,雷秉钧,吕晓菊,范昕建,冯萍,俞汝佳.肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性杂志.2004,4(3):150-1539.Ettayebi,M.;Prasad,S.M.;Morgan,E.A.Chloramphenicol-erythromycin162:551-557enLHMauvaisPDouthwaiteSThemacrolideketolideantibioticMol.Microbiol.1999,31:623-632.11.Moazed,D.;Noller,H.F.Chloramphenicol,erythromycin,carbomycinandvernamycinBprotectoverlappingsitesinthepeptidyltransferaseregionof23SribosomalRNA.Biochimie1987,69:879-88412.Vester,B.;Garrett,R.A.Aplasmid-codedandsitedirectedmutationinforthemechanismofactionoferythromycin.---------------------------------------------------------Biochimie1987,69:891-90013.Weisblum,B.Erythromycinresistancebyribosomemodification.Antimicrob.AgentsChemother.1995,39:577-585XiongLShahSMauvaisPMankinAS.AketolideresistancemutationindomainIIof23SrRNArevealsproximityofhairpin35tothepeptidyltransferasecentre.Mol.Microbiol.1999,31:633-639905-920Mol.Cell2002,10:117-128subunitfromamesophiliceubacterium.Cell.2001,107:679-688SchlunzenFZarivachRHarmsJBashanA;Tocilj,A.;Albrecht,R.;antibioticsontheribosome:newresistancemutationidentifiesaspecificinteractionofketolideswithrRNA.J.Bacteriol.2002,183:6898-690720.Douthwaite,S.;Hansen,L.H.;Mauvais,P.MacrolideketolideinhibitionofIIof23SrRNA.Mol.Microbiol.2000,36:183-19321.Capobianco,J.O.;Cao,Z.S.;Shortridge,V.D.;Ma,Z.K.;Flamm,R.K.;Zhong,Chemother.2000,44:1562-156722.Liu,M.;Kirpekar,F.;VanWezel,G.P.;Douthwaite,S.ThetylosinresistancetsGin23SrRNA.Mol.Microbiol.2000,37:811-82023.Chittum,H.S.;Champney,W.S.RibosomalproteingenesequencechangesininresistantmutantsofEscherichiacoliJBacteriol6192-619824.Pardo,D.;Rosset,R.PropertiesofribosomesfromerythromycinresistantmutantsofEscherichiacoli.Mol.Gen.Genet.1977,156:267-271ticsandthetranslationapparatus.J.Mol.Med.1996,74:423-439---------------------------------------------------------26.Gregory,S.T.;Dahlberg,A.E.ErythromycinresistancemutationsinribosomalproteinsL22andL4perturbthehigherorderstructureof23SribosomalRNA.J.Mol.Biol.1999,289:827-83427.Mao,J.C.-H.;Robishaw,E.E.Erythromycin,apeptidyltransferaseeffector.Biochem.1972,11:4864-4872gate.Cell.2002,108:629-63629.Menninger,J.R.;Otto,D.P.Erythromycin,carbomycin,andspiramycininhibitproteinsynthesisbystimulatingthedissociationofpeptidyl-tRNAfromribosomes.Antimicrob.AgentsChemother.1982,21:810-81830.Poulsen,S.M.;Kofoed,C.;Vester,B.Inhibitionoftheribosomalpeptidyltransferasereactionbythemycarosemoietyoftheantibioticscarbomycin,spiramycinandtylosin.J.Mol.Biol.2000,304:471-481ofantimicrobialandantitumoragents;Corcoran,J.W.;Hahn,F.E.Eds.;Springer-Verlag:NewYork,Heidelberg,Berlin,1975,pp.459-47932.Mao,J.C.-H.;Robishaw,E.E.Effectsofmacrolidesonpeptide-bondformationandtranslocation.Biochem.1971,10:2054-2061action.Biochim.Biophys.Acta.1973,331:128-140.Acad.Sci.USA1982,79:3111-311536.Frank,J.;Zhu,J.;Penczek,P.;Li,Y.;Srivastava,S.;Verschoor,A.;Radermacher,M.;Grassucci,R.;Lata,R.K.;Agrawal,R.K.Amodelofproteinsynthesisbasedoncryo-electronmicroscopyoftheE.coliribosome.Nature.1995,376:441-444JdeScience.2002,297:1864-1867elCell.2002,108:591-59440.Chittum,H.S.;Champney,W.S.Erythromycininhibitstheassemblyofthelarge273-27941.Champney,W.S.;Tober,C.L.;Burdine,R.Acomparisonoftheinhibitionofbyninedifferentmacrolideantibiotics.---------------------------------------------------------Curr.Microbiol.1998,37:412-417Curr.Microbiol.1998,37:418-425460-46544.Pereyre,S.;Gonzalez,P.;Barbeyrac,B.;Darnige,A.;Renaudin,H.;Charron,A.;Raherison,S.;Bébéar,C.andBébéar,C.M.Mutationsin23SrRNAaccountforintrinsicresistancetomacrolidesinMycoplasmahominisandMycoplasmaAgentsChemother.2002,46:3142-3150J.H.Comparisonofmethodsforinvitrotestingofsusceptibilityofporcine47.Gautier-Bouchardon,A.V.;Reinhardt,A.K.;Kobisch,M.andKempf,I.Invitro