黄芩抗炎作用的药理研究述评

-.z.黄芩抗炎作用的药理研究述评【摘要】评述黄芩对不同炎症模型的治疗作用以及其抗炎的作用机制,发现黄芩可不同程度地改善炎症动物模型的表现,对炎症细胞模型的影响作用不同,可从不同环节阻断花生四烯酸通路,抑制细胞因子的分泌、释放和核因子的转录活性,抑制一氧化氮和*些黏附分子的合成,为黄芩抗炎作用的进一步深入研究提供有益的参考。【关键词】黄芩炎症述评黄芩,始载于"神农本草经",为多年生草本植物黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的枯燥根。其性味苦寒,有清热燥湿之效,主要用于湿热证,证见发热胸痞、食欲不振、小便缺少、舌苔黄腻等。其主要活性成分有黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、黄芩新素等,它们的分子构造不同,药理作用也有一定的差异,大多具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗癌和神经保护作用。本文就黄芩及其主要活性成分的抗炎作用作一评述,为黄芩抗炎作用的开发研究提供依据。1黄芩对不同炎症模型的药效作用1·1不同程度改善动物模型的炎性表现炎症的动物模型根据发病原因主要分为非特异性炎症反响模型、感染性炎症模型和变态反响性炎症模型。非特异性炎症反响模型模拟炎症不同病理时期造成毛细血管通透性模型、耳肿胀或足肿胀模型以及肉芽肿模型;变态反响性模型主要包括大鼠佐剂性关节炎模型、接触性皮炎模型等。有关黄芩的研究涉及多个病理模型,说明对不同类型的炎症有治疗作用。*菊福等[1]比拟**围场、**胶南、**黄龙、**太白几个不同产地黄芩70%乙醇提取物的药效作用研究显示,不同产地黄芩对小鼠耳肿胀和肉芽肿炎症模型具有不同作用,并发现作为道地药材的**围场黄芩较其它几个产地黄芩的抗炎作用为强,且未显示出任何毒副作用。耳肿胀模型是急性炎症模型,而肉芽肿模型是慢性炎症模型,由此说明黄芩对急慢性炎症具有不同程度的抗炎作用。陈曦等[2]用完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎模型,发现黄芩及黄芩和GlucosamineChondroitin联合用药,不仅明显抑制佐剂性关节炎大鼠的继发性足肿胀,对继发性反响的全身病症也有明显的改善作用,说明黄芩不仅对非特异性炎症反响有效,对免疫性炎症也有一定的治疗作用。黄芩的同种活性成分对不同的炎症动物模型敏感度不同,有人比拟黄芩素对佐剂性关节炎和角叉菜胶致大鼠足肿胀模型的作用,发现黄芩素在大鼠佐剂性关节炎中的抗炎活性大于在大鼠足趾水肿的抗炎活性[3],原因可能与两种炎症动物模型的发病机理不完全一样所致。黄芩的不同活性成分对同种炎症动物模型的作用强度也不尽一样。黄芩提取物中的3种主要黄酮(黄芩素、黄芩苷及汉黄芩苷)对角叉藻胶导致的爪水肿有强烈的抗炎活性,其中以黄芩苷的抑制作用最强[4]。1·2对不同的炎症细胞模型作用不同除利用整体动物进展体内的药效和机理研究外,一些研究者还在体外进展细胞培养,建立炎症细胞模型进展机理的研究。常用的炎症细胞模型有两种,一是LPS刺激的巨噬细胞模型,该模型较好的反映了急性炎症过程释放TNF、IL-1、NO和前列腺素。二是白细胞黏附模型,有时用HL60代替白细胞和ECV304,最好用原代细胞,这样活力较好,造模易成功。黄芩苷对LPS诱导的炎症具有一定的阻抑作用,但对CPN诱导的E-选择素表达增高却无影响,说明它的抗炎作用可能是有特异性的,对药物的调节作用也说明CPN和大肠杆菌LPS可能有不同的诱导炎症的机制[5]。2黄芩抗炎的机理研究2·1对炎症细胞的影响单核-巨噬细胞系统是机体免疫系统中的重要组成局部,它担负着重要的免疫防御功能。其中中性粒细胞具有趋化、吞噬和消化作用,参与机体的炎症部位,促进炎症反响。在炎症时,致炎物质产生,引起中性粒细胞趋化到炎症部位,促进炎症反响,而过强的炎症反响会加重组织的损伤。黄芩可显著抑制中性粒细胞的化学趋化运动,而对单核细胞无明显作用[6]。2·2对炎症分子的影响2·2·1从不同环节阻断花生四烯酸通路花生四烯酸通路是炎症发生的重要机制之一。在炎症刺激或炎症介质的作用下,细胞膜上的磷脂酶A2被激活,使膜磷脂释放花生四烯酸,它又分别通过环氧化酶(CO*)和脂氧酶(LO*)两条途径生成PGs和LTs。PGs能够抑制Th1型免疫反响,LTs具有强烈的细胞趋化性。研究说明黄芩苷能显著抑制PGE2[7]和LTB4、LTC4[8]的合成;汉黄芩素、黄芩素和黄芩苷能显著抑制脂多糖诱导的炎症反响,其机制在于抑制PGE2和白三烯C4的合成,其中以黄芩素和黄芩苷的作用最强[9];汉黄芩素能阻断LTB4的释放通路[10]。环氧化酶有两种异构形式,即CO*-2和CO*-1。CO*-1参与维持正常的生理功能,CO*-2是炎症过程的重要的限速酶。CO*-1存在于大多数组织之中,在整个细胞周期中维持稳定的水平;CO*-2在大多哺乳动物组织中无法检测到,但在受到诸如生长因子、肿瘤刺激因子、激素、细胞毒素和细胞因子等刺激后,被快速诱导。因此,CO*-1被称为固有型,CO*-2称为诱导型。黄芩素能通过阻止C/EBPβDNA绑定活性抑制CO*-2的基因表达[11],黄芩总黄酮还能抑制CO*-2的合成[12],从而抑制炎症反响。说明黄芩各活性成分对花生四烯酸的两条通路皆有阻断作用,不同的成分作用强度不一。研究的靶点多集中在炎症介质的释放,对通路的上游尤其是磷脂酶A2的作用未见报道。显然,抑制炎症介质的释放是直接的抗炎措施,也是权宜之计,如果生成炎症介质的根源没有控制,当药物撤离时炎症将会继续,这就是很多炎症性疾病如关节炎等不易根治的原因之一。所以,笔者研究黄芩的抗炎作用或许可以从更根源的问题着手,期望发现它对炎症尤其是慢性炎症有一定效果。2·2·2抑制细胞因子的分泌释放炎症过程可诱生多种CK直接或间接参与急、慢性炎症反响,其中最重要的是IL-1和TNF-α和β,它们具有多方面的炎症介质作用。IL-1和TNF-α主要由活化的巨噬细胞产生,TNF-β由活化的T淋巴细胞产生。炎症过程中的多种刺激都可以引起它们的分泌[13]。IL-8是80年代后期发现的一种多源性细胞因子,单核细胞和血管内皮细胞是Il-8的主要来源。IL-8因其具有明显的中性粒细胞(PMN)趋化活性而被发现,并认为是一种重要的促炎因子,但IL-8也有明显的抗炎作用[14]。黄芩苷可降低肺炎衣原体刺激细胞产生的IL-8[15],在降低TNF-α、IL-6[16]方面效果也很显著;而有人研究报道,黄芩素和汉黄芩素能而黄芩苷不能抑制IL-1诱导的IL-6和IL-8以及IL-6和IL-8mRNA的产生[17]。由此说明,对于黄芩抗炎机理的研究在*些方面并没有肯定的结论,有些研究互相矛盾,需要做大量的重复研究后才能充分证实其作用机理。黄芩各活性成分的药理作用也不完全一样,进一步明确各活性成分的作用靶点将促进黄芩的药物研发。2·2·3抑制核因子的活性核因子NF-KB是1986年发现的在免疫球蛋白K链基因上游增强子的转录调节因子,当时认为是B细胞特异性的,故命名为NF-KB。在以后的研究中发现不仅B淋巴细胞的K轻链,而且其他细胞的多种基因的启动区或增强子上均有NF-KB结合位点。它在胞质中与IKB结合,以无活性的形式存在,IKK磷酸化IKB可导致IKB被蛋白酶降解,释放NF-KB,然后NF-KB转移至核内活化一系列基因。它是一个多功能核转录因子,具有广泛的生物学活性,激活后可促进细胞因子、黏附分子、趋化因子等基因转录,同时对参与炎症级联效应的多种酶的基因表达也有重要的调控作用。因此,抑制NF-KB的活性可阻断炎症的关键启动步骤及其次级炎症反响。研究说明,黄芩素可通过抑制NF-κB结合位的活性,抑制由鼠巨噬细胞产生IL-12产物[18],从而到达抗炎的目的。NF-KB是调节炎性因子基因表达的关键转录因子,如TNF-α和IL-6等细胞因子的基因启动子上均存在NF-KB的结合位点。核因子NF-KB对炎症细胞因子起调控作用,而NF-KB的活化又受到MEKK1的调控,MEKK1通过磷酸化从而活化Ikkβ,而NF-KB诱导激酶则刺激IKKα的激酶活性,这一过程所导致的IKB丝氨酸残基的磷酸化可使IKB被泛素-蛋白酶体复合物所降解,释放出活化的NF-KB二聚体转移至核内。所以研究抗炎作用的机制还可选择转录调控因子这条通路,发现其抗炎作用的靶点是从哪个环节上进展阻断。黄芩的研究较虽然涉及到核因子,但对其作用机制并未做系统深入的分析,关于它对NF-KB和其激活酶的活性的影响未见报道。2·2·4对黏附分子的不同影响白细胞与血管内皮间的黏附是介导炎症反响的重要环节。其中,黏附分子起到了重要的作用。黏附分子包括细胞间黏附分子、血管内皮黏附分子等。细胞间黏附分子有几种亚型:其中ICAM-1广泛存在于各种组织,以内皮细胞外表的表达最强,参与白细胞穿越毛细血管到达炎症部位的发生过程,促进白细胞与内皮细胞的严密黏附;ICAM-2在所有的血管内皮细胞构造中均可见到,且明显多于ICAM-1,但是不受炎症性细胞因子的诱导。ICAM-3主要表达于白细胞,内皮细胞一般不表达,主要介导白细胞之间的黏附。其中研究最多的是ICAM-1,ICAM-1在细胞外表以二聚体的形式存在,其配体主要有LFA-1和Mac-1,在其介导的炎症免疫反响中的配体主要是LFA-1。ICAM-1通过与LFA-1等的相互作用促进白细胞与内皮细胞间的黏附作用,从而促进炎症的发生和开展。sICAM-1是ICAM-1蛋白裂解脱落的产物,仍能与LFA-1结合发挥作用。血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)主要表达于血管内皮细胞,介导白细胞在内皮细胞的初始黏附和滚动,参与随后的严密黏附。VCAM-1通过调节白细胞聚集和促炎因子的产生对ICAM-1起补充作用[19]。二者均在刺激因素诱导下表达上调。目前与引起ICAM-1、VCAM-1的表达上调的主要有TNF-α、IL-1、IL-8、PAF、IFN-γ、高血压、糖尿病、动脉硬化、缺氧等。自从20世纪80年代后期发现ICAM-1、VCAM-1以来,用TNF-α诱导ICAM-1表达的报道最多。*青光等[20]研究说明,黄芩苷可明显抑制ICAM-1表达,提示在一定程度上可抑制中性粒细胞向肺组织趋化、浸润,从而减轻胰腺炎肺损伤的程度;而ChenCC等[21]研究了黄酮类化合物白杨素、芹菜苷、木犀草素、黄芩素和黄芩苷对TNF-α刺激的ICAM-1的表达的影响,发现仅山奈芬、白杨素、芹菜苷和木犀草素能抑制ICAM-1的表达,黄芩素和黄芩苷对ICAM-1的表达无明显影响。说明黄芩中的各种成分可能起着不同的影响作用,或是对于不同原因导致的ICAM-1的改变的影响作用不同。总体而言,黄芩对黏附分子的影响研究较为初浅,只涉及到ICAM-1含量的改变,对其转录和基因方面、尤其是对作为发挥黏附作用的ICAM-1/LFA-1之间的作用的影响未进展研究。2·2·5抑制一氧化氮的合成和释放NO是一种具有双重作用的信使分子和细胞毒性分子,NO在体内以L-精氨酸作为底物,在NO合酶催化下反响而成。催化产生NO的NOS广泛表达于哺乳动物的各种组织与细胞,以两种形式存在:原生型NOS(cNOS)和诱生型(iNOS)。前者在生理状态下即有表达,依赖于Ca2+/CaM的存在,反响迅速而短暂,生成NO量少,主要介导正常的生理功能并有细胞保护作用;iNOS一般需要内毒素及各种细胞因子的诱导表达,不依赖于Ca2+/CaM,可生成大量NO,主要介导细胞毒性作用并调节免疫应答。在生理情况下,NO是细胞-细胞间信息传递的重要调节因子,是第二信使和神经递质;在病理情况下,它是一种继发性炎性介质,过量的NO合成在急慢性炎症过程中起着重要作用。研究说明,黄芩苷能抑制炎性介质NO的合成[6];黄芩茎叶总黄酮通过抑制可诱导的NO合酶,减少毛细血管内皮细胞释放NO[22-23]。3分析和展望综上所述,黄芩具有抗炎作用,并对多种炎症模型有效。但不同的研究者所选取黄芩的药物成分不同,有的直接用黄芩的总提物来研究,而绝大多数则是用黄芩的*种活性成分或把不同的活性成分进展比照研究,发现黄芩各活性成分抗炎作用的靶点不完全一样,其作用机理也不完全一致,各活性成分的微妙组合可能使其作用更好的发挥。炎症发生的机理涉及各个方面,而且互相穿插,形成一个错综复杂的网络。对于黄芩抗炎作用的机理研究,几乎普及网络的各个节点,而且大多都有一定的作用。但对于每个节点的作用研究不够深入,需要我们作进一步的探讨。参考文献[1]*菊福,卢长安,廖福龙,等.不同产地黄芩提取物主要药效作用的比拟[J].中国中医药信息杂志,2001,8(3):28.[2]陈曦,李凡.GlucosamineChondroitin与黄芩联合对佐剂性关节炎大鼠血清PGE2影响的实验研究[J].中国实验诊断学,2005,9(1):15-17.[3]*喜平,李宗芳,*效恭.黄芩素的药理学研究概况[J].中国药理学通报,2001,17(6):711-713.[4]LinCC,ShiehDE.Theanti-inflammatoryactivityofScutellariarivularise*tractsandit'sactiveponents,baicalin,baicaleinandwogonon[J].AmJChinMed,1996,24(1):31-36.[5]LimBO.Effectsofwogonin,wogonoside,and3,5,7,2',6'-pen-tahydro*yflavoneonchemicalmediatorproductioninperitoneale*duatecellsandimmunoglobulinEofratmesentericlymphnodelymphocytes[J].JEthnopharmacol,2003,84(1):23-29.[6]赵晓琴,*文军,蒙建军,等.川芎、黄芩对机体中性粒细胞、单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用[J].华夏医学,1998,11(3):262-264.[7]ChouTC,ChangLP,LiCY,etal.Theanti-inflammatoryandanalgesiseffectsofbaicalinincarrageenan-evokedthermalhy-peralgesia[J].AnesthAnalg,2003,97(6):1724-1729.[8]侯艳宁,*秀媛,程桂芳.黄芩苷抗炎的机理[J].药学学报,2000,35(3):161.[9]LiBQ,FuT,GongWH,etal.Theflavonidbaicaline*hibitsanti-inflammatoryactivitybybindingtochemokines[J].Immunop-harmacology,2000,49(3):295-306.[10]邝枣园,*伟,黄衍寿,等.黄芩苷对E-选择素和一氧化氮的影响研究[J].中医药学刊,2005,23(2):276-277.[11]WooKJ,LimJH,SuhSI,etal.DifferentalinhibitoryeffectsofbaicaleinandbaicalinonLPS-inducedcycloo*ygenase-2e*-pressionthroughinhibitionofC/EBPbetaDNA-bindingactiv-ity[J].Immunobiology,2006,211(5):359-368.[12]况夏.黄芩总黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞呼吸爆发及CO*-2的影响[J].华西医学,2006,21(2):323-324.[13]李**.分子病理学[M].:人民卫生,2002:210.[14]卢传义,唐朝枢.白细胞介素-8与炎症[J].生理科学进展,1993,24(4):351-353.[15]邝枣园,黄衍寿,*伟.黄芩苷对肺炎衣原体诱导的可溶性细胞黏附分子及IL-8的调节作用[J].**中医杂志,2004(11):502-503.[16]明亚玲,骆丹,*晶,等.茶多酚单体和黄芩苷对紫外线辐射皮肤成纤维细胞的影响[J].中国美容医学,2005,14(5):541-544.[17]NakamuraN,HayasakaS,Zhang*Y,etal.Effectsofbaicalin,baicalein,andwogoninoninterleukin-6andinterleukin-8e*pression,andnuclearfactor-kappaBbindingactivitiesin-ducedbyinterleukin-1betainhumanretinalpigmentepitheli-alcellline[J].E*pEyeRes,2003,77(2):195-202.[18]KangBY,ChungSW,KimSH,etal.Involvementofnuclearfac-tor-kappaBintheinhibitionofinterleukin-12product