食品生物技术大实验

实验一牛乳卫生质量的检测实验目的：1．学习美蓝还原酶实验对牛乳量评估的原理和方法2．学习巴氏消毒法的原理及方3．学习利用牛乳中细菌菌落总判断牛乳是否被污染的指标实验内容：1.美蓝还原酶实验评估牛乳质量2.检测巴氏消毒法消毒牛乳的效3.稀平板计数法测定牛乳含细菌总数实验仪器设备和材料：材料：鲜牛奶；纯牛奶；牛肉膏蛋白胨培养基试剂：美蓝溶液（1:250000菌；蒸馏水等；仪器和用具：试管，试管架，三角瓶移枪及枪头1mL移液枪及枪头，培养平板，高温蒸汽灭菌锅，恒温水浴锅，微波炉，显微镜，载玻片，标记笔等。实验要求：1.掌握根据美蓝还原酶实验的结评估牛乳质量；2.熟悉巴氏消毒法的原理及方法3．掌握利用牛乳中细菌菌落总判断牛乳是否被污染的指标实验方法与步骤：1牛膏蛋白胨培养基和无菌水制备与灭菌制备牛肉膏蛋白胨培养基400mL，分装在两个三角瓶中；取试管，每支试管加9mL蒸馏水。将牛肉膏蛋白胨培养基与装有蒸馏水的试管及21个板一起灭菌121℃持20min。牛肉膏蛋白胨培养基的配方（每1000mL为：牛肉膏3g，蛋白胨10gNaCl5g，琼脂4.4g，水1000mL，pH=7.0~7.2。2美还原酶实验法测定牛乳质（）三支无菌试管，标记为号2号和3号1号试管加入亚特鲜牛奶2号、3号管分别加入10mL亚特牛奶1号2号管分别加入美溶液，分别加棉塞塞紧。（）轻摇动试管，置于37℃浴锅中温浴，记录开始时间；（）管在水浴锅中稳定5min后出，轻轻摇动后再放回水浴锅；（隔30min取试管观察美与牛乳混合液颜色变化3-6h录管中牛乳

变白时的时间。3巴消毒法消毒牛乳（）亚奥特鲜牛奶摇匀，使其中的微生物充分混匀；（）一支无菌试管，标记A加亚奥特鲜牛奶；（）A试置于80℃水浴锅中，使水面超过试管内牛乳液面，保持15min，断摇动试管使加热均匀；（）热至15min时立即取出管，用流水冲洗试管外壁，使牛乳迅速冷却；4标平板计数法检测牛乳中细数（）亚奥特鲜牛奶摇匀，使其中的微生物充分混匀；（）一支无菌试管，标记B加亚奥特鲜牛奶；（）匀A、B试管牛乳，从A试中吸取牛乳用无菌水稀释，稀释度依次为10-2，10-3，10-4；B试中吸取1mL乳用无菌水稀释，稀释度依次为10-3，10-4，10-5。（）21个无菌平板并标明稀度、溶液名称（消毒前牛乳、消毒后牛乳和无菌水中分别取不同梯度的牛乳各1mL依注入相应标记的平板个梯度做三个平行无水1mL注入平板，做三个平行；（）出灭菌后的牛肉膏蛋白胨培养基，用微波炉熔化为液体，冷却到4℃左右后摇匀，向个平中各加15mL，静置（）平板中培养基凝固后倒置，置于37培养箱中培养24h；（）择菌落数为30-300左的平板计数，计算每毫升牛乳中细菌数。思考题：1两样品牛乳对美蓝脱色时间差异，请解释其原因。2还哪些类食品需要用巴氏消法进行消毒。

实验二甜酒酿的制作及酒药中根霉的分离实验目的：1．通过甜酒酿的制作了解酿酒基本原理。2．掌握甜酒酿的制作技术。3．学习从酒酿中分离纯化根霉方法。实验内容：1.甜酒酿的制作2.根霉的分离实验仪器设备和材料：材料：糯M、甜酒曲（安琪铃薯、葡萄糖、琼脂、无菌水等器材：高压灭菌锅、酒精灯、研钵、无菌移液管、无菌培养皿、接种环、烧杯、滴管等玻璃仪器实验要求：1.学习甜酒酿的制备过程；2.掌握甜酒酿制作过程的原理，握根霉的分离技术。实验方法与步骤：1甜酿的制作（）择原料酿制甜酒酿的原料常用糯M，择时要用品质好M质新鲜的糯M。（）洗和浸泡将M淘干净后浸泡过夜，使M充分吸水，以利蒸煮时M分散和熟透均匀。（）煮M饭将浸泡吸足水分的糯M捞，放在蒸锅内搁架的纱布上隔水蒸煮，至M饭完熟透时为止。（）饭温将蒸熟的饭从内取出，在室温下摊开冷却至30左右接种。（）入种曲按干糯重换算接种量。市售“甜酒药”每包能酿制3kgM；而沪产“浓缩甜酒药”每包可接1.5～2kg糯M。为使接种时种曲与饭匀，可先将酒药块在研钵中捣碎，或再拌入一定数量的炒熟面粉后再与大量M饭匀。（）坛发酵接种拌匀后的M饭装坛发酵意在坛子的中轴留一个散热孔道用容器都应预先洗

净，并用开水浇淋浸泡过，以杀死大部分杂菌。（）温发酵温度可控制在30℃左右，发酵期可见表面产生大量纵横交错的菌丝体，同时糯M饭的粘度逐渐下降糖化液渐渐溢和增多若发酵中出现干燥可在培养～24h补加一些凉开水。（）熟发酵酿制48h后甜酒酿已初步成熟，但往往略带酸味。如在8℃～10℃条件下将它放置2～或更长一段时间进行后发酵，则可去除酸味。（）量评估酿成的甜酒应是酒香浓郁、醪液充沛、清澈半透明和甜醇爽口的。2根的分离（）材的包扎准备，再高压灭菌（）制PDA先洗净去皮再称取200g马铃切成小块加煮（煮沸20~30分钟能被玻璃棒戳破即可层布过滤热加琼继续加热搅拌混匀琼脂溶解完后，加入葡糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎℃灭菌20分左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。（）板划线进行根霉的分离先将酒药曲在研钵中磨细，再将研细的酒药种曲在含玻璃珠的三角瓶中打散成孢子悬浮液，然后以10倍系稀释法稀释，取适当