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ICS65.020.20天津市地DB12方标准DBT884—2019DeterminationofpolysaccharideinLilyBulbus-UV/VISspectrophotometry天津市市场监督管理委员会发布前言据GB/T1.1-2009给出的规则起草。起草单位:天津市农业质量标准与检测技术研究所。百合鳞茎中多糖的含量测定紫外/可见分光光度法本标准规定了紫外/可见分光光度法测定百合鳞茎中多糖含量的原理、试剂材料、仪器设备、分析述和精密度。量的测定。范性引用文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GBT试验方法。理585nm波长处测定吸光度,用葡萄糖做标准品,外标法定量。4试剂和材料4.1试剂4.1.1乙醇(C2H5OH)。4.1.2蒽酮(C14H10O)。4.1.3浓硫酸(H2SO4):浓度95%~98%(g/g)。4.1.4水(H2O):GB/T6682规定的一级水。4.2试剂配制gmL。现用现配。4.3标准品葡萄糖标准品(C6H12O):纯度≥98%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.4标准溶液配制4.4.1葡萄糖标准储备液(1mg/mL):取干燥至恒重的葡萄糖对照品50mg,精密称定,用水溶解并述系列工作溶液。仪器和设备5.1粉碎机。5.4水浴锅。5.5具塞塑料离心管:聚丙烯,10mL。.6容量瓶:10mL、50mL。5.9涡旋混合仪。0离心机:转速≥6000r/min。步骤样品制备.1.1干品为试样,密封并标明标记,于0~4℃下冷藏保存。2鲜品g后,按照干品处理方法6.1.1处理。样品提取取样品粉末约1g,精密称定,置250mL圆底烧瓶中,精密加入100mL水,称定重量,水浴加热回流2h,放冷,再称定重量,加水补足减失的重量,离心(6000r/min,10min),精密吸取上清液1.5mL,加入乙醇7.5mL,摇匀,置4℃冰箱中放置3h,离心(6000r/min,10min),倾去上清液,沉测定白,在585nm波长处测定吸光度。试样中百合多糖的含量按式(1)计算:X=100...............................(1)X——试样中百合多糖的含量,单位为克每一百克(g/100g);c——由标准曲线得到的待测样液显色后的浓度,单位为微克每毫升(pg/mL);5——显色后的总体积,单位为毫升(mL);V3——乙醇沉淀后所得百合多糖的溶解体积,单位为毫升(mL);V用水的体积,单位为毫升(mL));V2——用于沉淀多糖的提取液体积,单位为毫升(mL);m——样品重量(减去水分之后的干燥品重量),单位为克(g);精密度在重复性
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