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标题SMP10-008-2012年01月01起草审核批准日期日期日期 的建立检定菌管理规程，保证检定菌检定菌、培养基接收、保存、按规定程序进行适用范围 容到省药品检验所或直接从中国药品生物制品检定所“检定菌，内容为名称、编号、代次、传代日期、传代操作人。大肠埃希菌[CMCC（B）44 乙型副伤寒沙门菌[CMCC（B）26 金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63 铜绿假单胞菌[CMCC（B）10 生孢梭菌[CMCC（B）64 白色念珠菌[CMCC（F）98 黑曲霉[CMCC（F）98 短小芽孢杆菌[CMCC（F）63 菌是从辽宁省药品检验所回的复苏后检定菌，则不进行此步骤操作。把冻干检定菌管，灭菌1ml毛细滴管、双蝶、镊子、普通肉汤培养基，普通琼脂斜将冻干检定菌管外壁用碘酒擦洗稍干用75%棉擦净放在灭菌双蝶内待干。点燃灯，将检定菌管的一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌毛细滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的检定菌管一端，使骤冷而炸裂。或用砂轮在安瓿上部1/3处划痕，用干燥的无菌纱布包裹安瓿，将安瓿掰开。0.5～0.8ml（养基；金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌用营养肉汤培养基；白色念珠菌、黑曲霉菌用液体改良马丁培养基）滴加到安瓿中，轻轻旋转安瓿并吹打，使冻干菌种和液体培养基充分混合并完全溶解，再将安瓿内的菌悬液全部吸出，转移至相应的培养（30～35℃18～24h23～28℃3～5（714种生长，在应用前还应确认菌种的纯度和特性。养。培养后观察是否具有典型的菌落形态，挑选单个纯菌落进行染色和镜检，观察其染操作），调整菌液浓度，向已好的菌悬液中加入等体积、含20%无菌甘油的TSB，轻轻振摇小管，使内容物充分混合，分装于无菌小管，好的甘油保藏管最好在－80℃（至少-30℃以下）4～6℃培养基穿刺培养，需将菌种保藏管的塞子改换为橡胶塞，则可以保存时间较长。铜绿假单胞用此种保藏法需每天一次检查记录保存检定菌的冰箱温度检定菌管的硅胶塞松动，基应新鲜，如斜面已无冷凝水者，不宜再使用。上，注明菌名及接种日期。自冰箱30点燃灯，在左手握住检定菌斜面，将管口靠近火焰旁，右手拿接种环后端将接种环烧红30秒钟，随后将全部接种环金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。右手用无名指、小指及掌部硅胶塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻轻拨开硅胶塞，将接种环先在管口冷却后，管内至琼脂斜面的底部，由底向上，将接种环轻挑菌落，左手将接种环管内至琼脂斜面的底部，由底向上，贴斜面的表面曲折移动，使菌落划在斜面管置30—35℃培养22—24小时，白色念珠菌与

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