生物技术实践专题2微生物的培养与应用常考知识点及(练习无答案)

112班112班/119班1生物技术与实践 微生物的培育与应用1微生物的培育与应用于微生物的分别和鉴定)和半固体培育基(常用于观看微生物的运动及菌种保藏等)。微生物的培育与应用(合成培育基是用成分的化学成分不明的自然物质配制而成，常用于实际工业生产。)依据培育基的用途可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基〔选择培育基是指在培育〕微生物的试验室培育常用琼脂(是从红藻中提取的一种多糖)作凝固剂。培育基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等(碳源是能为微生物的代谢供给碳元素的物质，如CONaHCO等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异2 3物质，如N、NH、NO-、NH+〔无机氮源〕蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有机2 3 3 4氮源〕等。只有固氮微生物才能利用N。培育基还要满足微生物生长对PH、特别养分物质2pHpH无氧的条件)比较项理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭消毒 较为温顺 局部生活状态的微生物 不能灭菌 猛烈 全部微生物 能消毒与灭菌的区分：消毒指使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部一局部对人体有害的微生物〔不包括芽孢和孢子。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法〔对于一些不耐高温的液体〕还有化学药剂〔如酒精、氯气、石炭酸等〕消毒、紫外线消毒灭烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。比较项理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭消毒 较为温顺 局部生活状态的微生物 不能灭菌 猛烈 全部微生物 能接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，锅。外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。9．制作牛肉膏蛋白胨固体培育基方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。〔①将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培育基的培育皿翻开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培育基〔约10～20mL〕倒入培育皿，左手马上盖上培育皿的皿盖。④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培育皿盖在下、皿底在上〕纯化大肠杆菌意思是分别提纯大肠杆菌。112班/119112班/119班1生物技术与实践 微生物的培育与应用3微生物接种的方法最常用的是平板划线法(使聚拢在一起的微生物分散成单个细胞，从)和稀释涂布平板法(分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。)。13．涂布平板的全部操作都应在火焰四周进展保证无菌操作。(应从操作的各个细节保证焰四周。)14(频繁使用的菌种)，②甘油管藏的方法(长期保存的菌种)。(临时保藏方法，将菌种接种到试管的固体斜面培育基上，在适宜的温度下培育。当菌落长成后，将试管放入43～6个月，都要重将菌种从旧的培育基上异。甘油管藏的方法，在3mL1mL1mL甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。)15．分别土壤中分解尿素的细菌〔含脲酶〕的培育基是选择培育基〔以尿素为唯一氮源。影响微生物生长的因子：养分、温度、pH等。参加高浓度的食盐可选择培育金黄色葡萄球菌等。测定微生物数量的常用方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数。稀释涂布平板法一般选取菌落数在30～300的平板进展计数，本法限于形成了菌落的微生物。微生物的“自然培育基”是土壤。每克样品中的菌落数=〔C/V〕·M(C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，Vm，M物质。X纤维素酶是一种复合酶一般认为它至少包括三种组分即C1酶C 酶和葡萄糖苷酶。X(前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长供给养分。)〔含纤维素酶〔以纤维素为碳源。以纤维素分解菌为中心的透亮圈。这样就可以通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。)〔株数量的多少来确定透亮圈的菌落平板时就参加刚果红。补充学问点:为什么选择培育能够“浓缩”所需的微生物？些不适应这种养分条件的微生物的生殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。【典例1灭菌、接种及培育、菌落观看计数。请答复与此试验相关的问题：培育基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培育供给了氮源和_ 。除此之外，培育基还必需含有的根本成分是 和 。对培育基进展灭菌，应当承受的方法是 。为了尽快观看到细菌培育的试验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培育，培育的温度设定在37℃。要使该试验所得结果牢靠，还应当同时在另一平板上接种 作为比照进展试验。培育20小时后观看到平板上有形态和颜色不同的菌落这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水患病细菌污染的程度越 。假设提高培育基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培育基〔按功能分〕被称为 。【典例2】某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，争论人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。请分析答复以下问题：配制该培育基时确定各成分用量的原则 。培育基配制好后，分装前应 接种前要进展 ，承受的方法是 将配制好的培育基分装到容器中，放入 中灭菌，压力 kPa，温度 ，时间 。灭菌完毕后拔掉电源待锅内压力自然降到0时，将容器取出。假设棉塞上沾有培育基，此试管应 。使用高压蒸汽灭菌锅时留意，先向锅内倒入 ，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭从配制培育基到培育完成所采用的预防杂菌感染的方法是 。“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培育基中的 ，假设试验需要振荡培育由此推想“目的菌”的代谢类型是 假设要配制观看细菌菌落状况的培育基，还需添加的成分是 凝固前要搁置斜面其目的是 。成分蛋白胨含量10.0g乳糖5.0g蔗糖KHPO2 4显色剂5.0g2.0g0.2g琼脂12.0成分蛋白胨含量10.0g乳糖5.0g蔗糖KHPO2 4显色剂5.0g2.0g0.2g琼脂12.0g 。为了使该试验所得结果牢靠，应当同时在另一平板上接种 作为比照进展试验。在整个微生物的培育中，肯定要留意在 条件下进展。转为固体培育时，常承受 的方法接种，获得单菌落后连续筛选。假设要争论“目的菌”的生长规律，可将单个菌落进展液体培育，承受 的方法进展计数，以时间为横坐标，以 为纵坐标，绘制生长曲线。试验完毕时，使用过的培育基应当进展 处理后才能倒掉，以防止培育物的集中。假设要检测水中是否含有大肠杆菌，培育基中还应参加染。下表是某公司研发的一种培育大肠杆菌菌群的培育基配方将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mL，依据用途划分该培育基属于 培育基(选择、鉴别)。该培育基中的碳源是 。在大肠杆菌培育过程中，除考虑养分条件外，还要考虑 、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、构造简洁、变异类型简洁选择、 、 等优点因此常作为遗传学争论的试验材料在在微生物培育操作过程中，为防止杂菌污染，需对培育基和培育皿进展 (消毒、灭菌)；操作者的双手需要进展清洗和 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭缘由是紫外线能使蛋白质变性还能 假设用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估量值更接近实际值除应严格操作、屡次重复外，还应保证待测样品稀释的 。通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的外形大小等菌落特征对细菌进展初步的 。培育大肠杆菌时在接种前需要检测培育基是否被污染对于固体培育基应承受的检测方法是 。测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培育基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是 。A．一个平板，统计的菌落数是23B．两个平板，统计的菌落数分别是22和26，取平均值24C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、242525一同学在稀释倍数为106的培育基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL) 用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数 ，由于 。(9)利用培育基不仅可以分别培育微生物，也可以进展植物组织培育。与微生物培育明显不同的是，用于组织培育的培育基中还需要参加 。〔2023年课标卷〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕高效降解原油的菌株。答复以下问题：在筛选过程中应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培育基土，从功能上讲，该培育基属于 培育基。纯化菌种时，为了得到单菌落，常承受的接种方法有两种，即和 。为了筛选出高效菌株可比较单菌落四周分解圈的大小分解圈说明该菌株的降解力量 。通常在微生物培育过程中试验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和 无菌技术要求试验操作应在酒精灯 四周进展以避开四周环境中微生物的污染。〔2023〕1〔15分〕答复以下关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的有用性淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图。①过程称为 ，②过程是为了 。Ⅰ号培育基称为 (按功能分)；该培育基中除了参加淀粉外还需参加另一种重要的养分成分 。A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵 D．碳酸氢钠一般对配制的培育基承受高压灭菌，其中“高压”是为了 。在高温淀粉酶运用到工业生产前需对该酶的最正确温度范围进展测定以下图中的曲线①中的曲线②，据图答复：表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时中的曲线②，据图答复：依据图中的数据，推断该酶使用的最正确温度范围是 。A．40℃一50℃ B．50℃一60℃ C．60℃一70℃ D．70℃-80℃据图推断以下表达错误的选项是 。A．该酶只能在最正确温度范围内测出活性B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C．曲线①说明80℃是该酶活性最高的温度D．曲线②说明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降补充学问点:生物的养分：养分是指生物摄取、利用养分物质的过程。养分物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。人及动物的养分物质有水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的养分物质有矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的养分物质有水、无机盐、碳源、氮源及特别养分物质五类。为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌？高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于一般环境。将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚拢10cm112班/119112班/119班1生物技术与实践 微生物的培育与应用6成分Na2HPO4K2HPO4MgSO4 7H2O成分Na2HPO4K2HPO4MgSO4 7H2O·FeSO4NH4NO3含量3g1g0.5g0.01g0.3g成分尿素C6H12O6琼脂H2O含量1.0g30g15g1000ml该培育基按物理性质分属于 培育基无论配制何种培育基在原料称量、溶解之后要 ，然后分装、包扎并灭菌，常用的灭菌方法是 。依据培育基的成分推断，该培育基能否用于分别土壤中分解尿素的细菌？ ，缘由是 。为检测尿素分解菌是否存在，还应参加，假设存在将消灭 反响。微生物常用的接种方法有 。〔山东高考生物模拟试卷〕生物——1〔15分〕生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。争论人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培育基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。培育基中加人的化合物A是 ,目的是为微生物的生长供给 ，这种培育基属于 培育基。为了筛选出能产生纤维索酶的微生物，可向培育基中参加 。在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前可用液体培育基培育增加微生物的浓度。假设要获得纯洁的菌株常承受平板划线的方法进展接种此过程所用的接种工具是 ，操作时承受 灭菌的方法，还可用 法操作来获得纯洁的菌株。试验完毕后需要对使用过的培育基应当进展灭菌处理过才能倒掉这样做的目的是 。〔2023届云师大联考3〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕争论觉察乳酸菌素和香茅油均有抑菌作用，请答复以下问题：试验室为获得纯洁的乳酸菌菌种，常用的方法有稀释涂布平板法和 。某同学在承受稀释涂布平板法分别乳酸菌时其试验操作标准结果觉察培育基上菌落连成一片，请提出合理的改进措施 。现要通过培育乳酸菌获得乳酸菌素，则发酵前要对发酵装置和培育基进展 处理，在发酵过程中要保证 的环境。香茅油难溶于水，化学性质稳定，现要从驱蚊草中提取香茅油，可用 法，利用该方法提取香茅油的过程需要参加NaCl的作用是 ，参加无水Na2SO4的作用是 。在培育大肠杆菌的平板上参加香茅油或乳酸菌素，会消灭抑制细菌物质为中心的透亮圈，可通过 来比较香茅油和乳酸菌素的抑制效果。〔2023〕生物——1〔15分〕在大肠杆菌培育过程中，除考虑养分条件外，还要考、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、构造简洁、变异类型简洁选择、等优点，因此常作为遗传学争论的试验材料。在微生物培育操作过程中，为防止杂菌污染，需对培育基和培育皿进展 〔消毒灭菌操作者的双手需要进展清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其缘由是紫外线能使蛋白质变性，还能 。假设用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估量值更接近实际值，除应严格操作、屡次重复外，还应保证待测样品稀释的 。通常来说对获得的纯菌种还可以依据菌落的外形大小等菌落特征对细菌进展初步的 。检测方法是 。假设用大肠杆菌进展试验，使用过的培育基及其培育物必需经过 处理后才能丢弃，以防止培育物的集中。〔山东滨州一模〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕下表是用于从土壤中分别纯化土壤细菌的牛肉膏、蛋白胨培育基的配方。试剂用量试剂用量牛肉膏5g琼脂20g蛋白胨10g水1000mLNaCl5g————培育基的类型很多，但培育基中一般都含有水、碳源、 和无机盐。上述培育基配方中能充当碳源的成分是 。分别纯化微生物最常使用的接种方法是 和 两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是 。某同学觉察培育基上细菌数目过多连成一片缘由 ；解决措施 。假设将分别得到的土壤细菌转移放入大试管中进一步培育则大肠杆菌的增长规律呈现 型曲线增长。该培育基能否用于筛选土壤中的纤维素分解菌？ 在筛选纤维素分解菌时，常参加的一种染料是 ，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反响，所以可以通过是否产生来筛选纤维素分解酶。112班112班/119班1生物技术与实践 微生物的培育与应用10乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：〔1〕玉米秸杆经预处理后应中选用 酶进展水解使之转化为发酵所需的葡萄糖。从以下哪些微生物中可以提取上述酶？ 〔多项选择〔3分〕A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌C．制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌假设从土壤中分别产生这种酶的微生物所需要的培育基为 按功能分培育基中的碳源为 。从生物体提取出的酶首先要检测酶的活〔活性以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可承受 技术。发酵阶段需要的菌种是 在产生酒精时要掌握的必要条件是 。〔2023届玉溪一中期中〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕筛选出高效降解原油的菌株。答复以下问题：在筛选过程中应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培育基上，从功能上讲，该培育基属于 培育基纯化菌种时，为了得到单菌落，常承受的接种方法有两种，即和 。为了筛选出高效菌株可比较单菌落四周分解圈的大小分解圈大说明该菌株的降解力量 。通常状况下，在微生物培育过程中试验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 四周进展，以避开四周环境中微生物的污染。〔2023〕生物——1〔15分〕科学家觉察家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白白质的抗菌效果。抗菌试验所用培育基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长供给 。灭菌与调整pH的先后挨次是 。抗菌蛋白需在灭菌 〔填“前”或“后〕参加。对配制的培育基灭菌时所用的设备是 。试验前需对超净工作台进展 处理。该试验接种金黄色葡萄球菌的方法是 。试验中的自变量是 ，因变量是 。有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌力量，因此，该试验操作不需要在无菌条件下进展。请你谈谈自己的观点，并简要说明理由 。〔20232〕生物——1〔15分〕答复以下相关问题：在进展稀释倒平板时，已熔化并用 〔填试验仪器〕灭菌的琼脂培育基，需要冷却到左右才能与样品稀释液混合并倒平板。假设要从某土壤中分别数量极少的、能降解对羟基苯甲酸〔一种含碳化合物〕的微生物，在样品稀释之前，最好先用液体培育基进展 ，该培育基中除了含有对羟基苯甲酸以外，还应参加 等主要养分物质。假设稀释得当，两种方法均可得到 菌落，上述两种方法都只能初步分别纯化菌种。假设要保证得到的是纤维素分解菌，还需要通过 来确定。有同学在对某种霉菌接种培育的24h之内每隔8h统计一次菌落数目然后进展了样品菌落数量的计算：他的计算结果〔填“大于“小于”或“等于〕活菌的真实值，这是由于 。〔2023届宁夏一中模拟2〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕人和哺乳动物的尿中含有尿素可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进展分别试验，请答复以下问题：分别培育细菌时必需进展无菌操作，包括培育基和各种器皿都必需是无菌的，常用的灭菌方法有 、 和 。将样液进展一系列的梯度稀释，然后接种培育。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 旁进展操作。接种后的培育皿 于37℃的 中培育。用含有酚红指示剂的培育基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培育基属于 培育基假设培育基中存在有分解尿素的细菌其菌落四周会消灭红色环带这是由于尿素被分解产生的 使pH上升，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，说明该菌株利用尿素的力量 。与全养分培育基中的菌落相比，以尿素为氮源的培育基中菌落数()。A．多B．少C．相等D．几乎为零〔2023·黑龙江最模拟〕某班同学用颖苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下：颖苹果→清洗干净→去掉果核→榨汁机榨汁→果汁—固定化酵母菌细胞→扩大培育→从成品果酒中分别酵母菌—→发酵→果酒(1)试验过程中，该小组同学觉察榨取的果汁格外浑浊，解决的方法是 。(2)分别酵母菌应使用 培育基。在酸性条件下，可用 来检测发酵产物中是否有酒精产生。假设想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可承受 法。发酵完成后，该班同学制作的果酒品质格外好，为便利后续年级使用，可将菌液 保存。另一个班的同学用葡萄制做的果酒酒味醇正，放置一段时间后，觉察果酒带有明显的酸味，请分析消灭酸味的缘由 。〔2023·河南焦作一模〕生物——选修1 生物技术实践〔15分〕水的细菌、病毒的含量是有效监控疾病发生的必要措施。请答复以下有关的问题：检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进展一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培育基的外表进展培育，记录菌落数量，这种方法称为 。以下图所示的四种菌落分布图中，不行能由该方法得到的是 。用该方法统计样本菌落数时是 〔是或否缘由 。(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培育细菌用的培育基与培育皿；②玻棒、试管烧瓶和吸管③试验操作者的双手其中需要消毒的 需要灭菌的 。〔2023·名校最模拟〕生物——选修1 生物技术实践】富集培育是微生物学中的最强有力的技术手段之一点的不同，制定环境条件，使仅适应当条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加。如图描述了承受富集方法从土壤中分别能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的试验过程。请分析答复：(1)①→③重复培育的目的是 。(2)⑤的菌落中大局部是能降解 的微生物。设置⑥的目的是 。(3)⑤→⑥承受单细胞挑取法，将所选菌种接种到⑥的培育基中，在操作过程中为防止污染应留意的事项是接种环要 灭菌待其 后再挑取菌落接种到试管中，并