蔬菜质量安全快速检测技术与应用

本文由gxtdingx贡ppt文可能在WAP端览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。蔬菜质量安全快速检测技术与应用无公害蔬菜基地的认证过程蔬菜质量安全快速检测技术的检测指标农药残留量有机类农药、氨甲酸酯类农)有机磷类农药、氨基甲酸酯类农)?硝酸盐亚硝盐吊白：前主要在我国北方已经发白块：现一些不法商贩使用漂白粉漂白一些蔬菜，但情况尚不严重，些菜，但情况尚不严重，其主要污染为甲醛。染物甲醛。矚我国现行的主流检测技术体系检测技术体系的要求：①足关标准对检测方法及设备的要求；②操简便，稳定度高；③测果能够与其它分析机构比对。?目全国最大的检测体系：由业部蔬菜品质监督检验测试中心（北京）和农业部药检所创建，并常年进行检测，具有技术成熟以及结果可靠特点。?设：电天平、电热恒温水浴锅、调速多用振荡器、TU1800/1810紫外见分光光度计?要：时对蔬菜中的硝酸盐、亚硝酸盐和农药残留量进行检，需要时检验吊白块农药残留量快速检测方法传统的农药残留量分析技术的一般过程分析步骤1、采集样品2、取品、捣碎样品、样品的提取、样品的净化6、样品的浓缩7、样品的定性、定检所需设备分析天平高速组织捣碎机分漏斗等、SPME氮吹仪、旋转蒸发器等GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS等锕极传统的农药残留量分析技术的优缺点优点能对每一种农药进行准的定性和定量缺点检分析周期长检费用高需消耗大量的有机溶剂，容易造成环境污染需要使用GC、HPLC等昂贵的大型仪设备检验分析人员的化学分析水平有较高的要求检验分析过程繁琐，影响因子复杂，不易掌彈传统的农药残留量分析技术存在的问题?能对农产品的生产、运输、批发、零售环节农药残留量分析出快速响应，无法满足农产品生产、流通环节的需要?检测费用太高，如果在农产品的生产、运输、批发、零售各个节普遍使用，社会可能无法承担?检验缺乏针对性，在农产品的生产、运输、批发、零售各个环节遍使用传统的农药残留量分析技术，可能会带来一定程度的浪费??检验需要专业的检测机构来完成，现有的社会检测机构及检验能力无法承担社会各个环节的所有检测任务??检需配大量的仪器设备，造成了传统的农药残留量分析术无法在商场、农产品生产基地等场所进行推广使国内外现行的农药残留量快速检测方法生化检测法（胆碱酯/酶抑制）生化检测法（胆碱酯酶抑制法）免分析法是将抗体抗原反应与现代测试手段相结合的微量分析法。具有高灵敏度和高效能等优点，仅需要很少的仪器设备和专业培，是农药残留量快速检测及测定致癌物的好方法。但该方法开发费用高，开发时间长约1年，而且只适用于分析一种农或一类农药。?活体生测法安达植保植检站利用敏感家蝇对蔬菜低残毒生产区的蔬菜进行大面积多点次检测，查出严重超标的蔬菜比率为0.15%。该测定时间需3小，但必须具有专用养虫室并常

年饲养昆虫我国现行的农药残留量分析的总体解决方案检测方法速测法酶抑制法传法应用范围快速选快速筛选并供总量抑制率指标农残留量的准确定性、定量方法精度低中高检测速度快中很农药残留量快速检测技术的优缺点缺点无对每一种农药进行准的定性无法定量或定量准确度不高能够检验的农药种类范围较窄缺点检分析周期短检费用低无要消耗大量的有机溶剂，不会造成环境污染不需要使用GC、等贵的大仪器设备检验分析人员的化学分析水平要求较低检分析过程简便，容易掌握茕桢我国现行的农药残留量快速检测技术方法速卡法（纸片法）酶制法标准编号GB/T5009.199—2002NY/T—20015009.199—2002GB/T18625—2002GB/T—┆GB/T18630—2002

适用范围蔬菜蔬蔬菜茶┆蔬（最新有关标准，卫生部制，是目前使用最广泛的标准。农药的分类农药残留量快速检测技术的检测对象有机磷类农药?氨甲酸酯类农药?以两类农药的有毒代谢产物蔬菜农药残留量危害程度评估及取样方法评估原则：危害（Hazard）=性×接触程度Exposure）?评估法：危性越大，采样频次越高，样本数量越大，监管等级越高?菜中农药残留量样品采集原则：①蔬菜品种数量越大，采样频次越高，样本数量越大。②菜抽样数量在生产基地和流通环节（如：市场）均使用货“批”数来衡量。③地检验原则：以同一品种、同一田块、同期采收的蔬菜，以1hm2一抽样批次，不足1hm2也视为一个货批。④场检验原则：以同一产区、同一品种、同一销售单位为一个批产地蔬菜样品采集方法原则：对一货批按5点抽样取样，将样品缩分后抽取，取1kg样作为备样，备样应低温保存。产地蔬菜样品采集方法原则：从一货批中随机抽取2kg样，取样品作为备样，备样应低温保存。?注意：随机≠随≠随意常见蔬菜农药残留量的采集对象及检测部位采集对象：①蔬基地：上市的蔬菜市场：正在售卖的蔬菜检部位样品名称番、茄子黄瓜萝、胡萝卜大白菜、小白菜检测部位去蒂供测去柄供测叶根（用水轻轻洗去根泥、稍晾干）分别供测去根去测腐叶、供测預頌圣鉉儐蔬菜农药残留量快速检测结果判定基本原则农药残留量按简易测定方法进行测定时，从一货批中随机抽取3个品进行现场测定。对于一检验出现阳性时许复测。若复测仍呈阳性者，应进行色谱测定，以色谱测定法测定的结果为定依据

速测卡法（纸片法，5009.1992002）原理速测卡法（纸片法，5009.1992002）1、剂?速卡：固化有胆碱酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片。?洗液（pH7.5缓冲溶液）：取15.0g磷氢二钠Na2HPO412H2O]1.59g无水磷酸二氢[KH2PO4]，500mL蒸水溶解。2、仪器?常天平?37℃±℃恒温装置（选配）

速测卡法（纸片法，5009.1992002）整体测定法1、选取有代表性的菜样品，檫去表面泥土，剪成1cm左见方碎，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，振摇50，静置2min以。2、取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药表必须保持湿润。、将速测卡对折，用手捏3min或恒温装置恒温，红色药片与色药片迭合发生反应。4、每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。擁締凤袜备訊顎轮烂蔷。速测卡法（纸片法，5009.1992002）表面测定法（粗筛法）1、檫去菜表面泥土，滴～滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片菜在滴液处轻轻摩擦。、取片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。3、放置10min以进行预反应，有条件时在37恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。4、将速测卡折，用手捏3min或恒温装置恒温3min，红色药片与白色药片迭合发生反应。5、每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。

速测卡法（纸片法，5009.1992002）结果判定：检测结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制（阳性）、未抑制（阴性）表示，具体见下表：判定结论强阳结果弱性结果阴结果判定依据速测白色药片不变色，说明农药残留量较高速卡白色药片显浅蓝色，说明农药残留量相对较低速卡色药片显天蓝色或与空白对照卡相速测卡法测定结果阳性结果阴性果速测卡法（纸片法，5009.1992002）部分常见农药的检出限及最大残留限量（单位mg/kg）农药名称甲磷对磷水胺硫磷马硫磷久效磷乙甲胺磷检限1.71.73.12.02.53.5残限量不检出得检出不得出不得检出不得检出0.2农名称敌畏敌虫乐西维好年冬喃丹出限0.30.32.51.00.5残限量0.11.02.0不得出不得检速测卡法（纸片法，5009.1992002）速测卡法的使用注意事项葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。?当温度条件低于37℃，反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时应相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3min时可变蓝，即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。空白对照卡不变

色的原因：一是药片表面缓溶液加得过少、预反应后的药片表面不够湿润，二是温度太低。?速测对农药非常敏感测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂，以及作者和器具沾有微量农药，都会造成对照和测定药片不变蓝。?红色药片与白色药片叠合反应时间以3min为准，3min后的色会逐渐加深24h后颜会逐渐褪去。酶抑制法（NY/T448-2001）原理酶抑制法（NY/T448-2001）1、剂?pH8.0缓溶液：11.9mg无磷酸氢二钾与3.2mg磷二氢钾用1000mL蒸水溶解。?显剂取160mg二代二硝基苯甲酸（DTNB）15.6mg碳氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，在4℃冰箱中保存。底物：取25.0mg硫乙酰胆碱加8.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4℃箱中保存，保存期不超过一周。?乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，但吸光度值应控制在0.3上。2、器?常量天平?37℃±℃温水浴或恒温箱?光光度计或快速测定仪酶抑制法（NY/T448-2001）?分步骤①样品理：选取有代表性的蔬菜样品，檫去表面泥土，剪成1cm左见方碎片，取1g放烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液浸没菜叶，每3min摇一下烧杯，于10min后取2.5mL提取于试管，待测。②定：对溶液测试：于试管中加入2.5mL缓溶液，再加入0.1mL液、1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，于410nm波长下比色，记录反应3min的吸光度变化值或仪器记录值A0。样测试：于试管中加入2.5mL品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸度变化值或仪器录值At。③果的表述计算：注：使用速测仪可以直接读出抑制率值，而无须手工计算。注???酶抑制法（NY/T448-2001）结果判定判定依据抑制≤抑制率50意：意抑制率与农药残留量正相关，测定值越高，说明农药残留量越高。说合格超标，说明蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯农药

酶抑制法（NY/T448-2001）CL-1型药残留速测仪的操作骤①将断光路黑块放入速测仪的比色池内，接通仪器电源，此时仪器动进入热阶段，显示屏显示数值为1200；②仪显数值由1200减少0，并发出“嘀”鸣声时，表示仪器预热完成（整个过程约需时15min）；③按“”钮，进行调0操作，此时仪器显示数值为0或左右的数值；④取出阻断光路黑块，按下100”钮，进行调满度操作，此时仪器显示数值为或其左右的数值；⑤入对照溶液，按下“对照”按钮，仪器将自动进行对照样品的测，3min后，仪器发出“嘀”蜂鸣声时，表示对照溶液测试完成；⑥取出对照溶液，放入待测样品，按下“样品”按钮，仪器将自动进行待测样品的测试，3min后仪发出“嘀”蜂鸣声时，表示样品溶测试完成，此时按下再次“样品”按钮，仪器即可显示样品抑制；⑦其余样品的测定重复步骤⑥的操作即可锹?????酶抑制法（NY/T448-2001）部分农药浓度与抑制率对照（实验条件37，乙酰胆碱酯酶）

甲胺磷浓（ug/mL）抑率%）浓（ug/mL）抑率（）浓（ug/mL）抑制率（%）浓（ug/mL）抑率（%）0.435.00.113.60.00125.20.852.00.629.40.1522.90.00250.31.60.836.737.20.00358.83.7590.01.252.70.2550.60.00466.81.60.463.90.00673.23.7576.373.90.00878.9

氧乐果敌百虫呋喃丹酶抑制法（NY/T448-2001）酶抑制法的使用注意事项葱、蒜、胡萝卜、生姜、韭菜等蔬菜中含有破坏酶活性或使蓝色产物色的物质，处理这类样品时，不要剪得太碎，浸提时间不要太长必要时可采取整株（体）蔬菜浸提法。?如室低于20℃建使用30水浴，即提取液要在水浴中预热，并加入酶液后的试管也需要放置于水浴中，同时室温也应控制在20以上。?速试剂对农药非常敏感，测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫，以及操作者和器具沾有微量农药，都会对检测结果带来影响。?速仪长期处于开机等待状态时，应将阻断光路黑块放入速测仪的比色内，避免仪器感光元件因过度疲劳而损坏。?标NY/T448—2001使的丁酰胆碱酯酶对甲基对硫磷、乐果、毒死蜱、二嗪磷等农药不太灵敏，检出浓度均在10mg/kg以。輒峄陽檉簖疖網儂號泶。GB/T186××2002系标准方法的应用方法特点该方是与国际接轨的一个农药残留量快速检测方法，它等同于美国公职分析化学师协会AOAC12th29.049-29.055《食品有机磷农药残留测定—胆碱酯酶抑制法》方法，在国外已得到普遍应用，检测结果更具可比性。方检测对象广泛（有机磷农药和氨基甲酸酯类农药），而且用于一些基质复杂的样品，例如：蔬菜、水果、茶叶和肉。具较高的灵敏度。用的温度范围广，在～35℃下可直接测定，无需其它温控施。比波长为600nm品测定时，无需设置对照。测结果表示简单，无需计算抑制率，由吸光度值直接作出判。尧侧閆繭絳闕绚勵蜆贅。?????GB/T186××2002系标准方法的应用GB/T186××2002系标准方法与GB/T5009.199—等标准方法的比较比较工程适用品检测对象可接测定的温度范围比色波长是需要设置对照使用的主要设备操作程结果的示GB/T186—2002蔬、水、茶叶和肉等多种类型有机农药和氨基甲酸酯类农药15～35600nm否分光度计较为杂吸光度值GB/T5009.199—蔬菜有机磷农药和氨基甲酸酯类农药～35℃410nm是分光度计或速测仪简抑制GB/T186××2002系标准方法的应用原理GB/T186××2002系标准方法的应用1、试剂?缓液：pH7.71磷酸盐缓冲液（适用于菜等的检测）：??A液—磷氢二钠溶液：取磷酸氢二钠Na2HPO412H2O）2.3876g，加水定容至100mL。B液1/15mol/L磷酸氢钾溶液：取磷酸二氢钾0.9078g，加水定容至100mL。取A液90mL、B液混合，即得pH7.71酸盐缓冲液。凍鈹鋨劳臘锴痫婦胫籴。

的羟甲基氨基甲烷Tris）—盐酸缓冲液（适用于茶叶、肉等的检测）：取50mL0.1mol/LTris、29.2mL0.1mol/L盐加水定容至100mL即。?底溶液（2%碘化硫代乙酰胆碱水溶液）：?1g碘化硫代乙酰胆碱，加缓冲液溶解并定容至50mL即可。?显剂：0.04%2,6-二靛酚水溶液。?氧剂：0.5%次氯酸钙水溶液。?还剂：10%亚硝酸钠水溶液。?胆酯酶液0.2g胆碱酶酶粉溶于10mL缓液中。?脱色剂：活性炭。?丙：分析。碳酸：分析纯。2仪器?常天平?分光度计

GB/T186××2002系标准方法的应用几种代表性农产品的测定骤GB/T186××2002系标准方法的应用结果判定吸光度值蔬菜<0.70.7～>0.9茶叶、肉<1.01.01.3>1.3未检可能检出，但残留量较低检出说注意：吸光度值与农药残留量正相关，测定值越高，说明农药残留量越高。GB/T186××2002系标准方法的应用GB/T186××2002系标准方法对分农药的最低检出浓度（单位mg/kg）农药番敌虫乐甲对磷呋喃丹甲胺磷0.30.50.53.010蔬菜黄0.80.50.33.015生0.40.12.0152.03.03.04.0202.03.03.04.020茶叶肉

GB/T186××2002系标准方法的应用GB/T186××2002系标准方法的使用注意事项如室温低于15℃，建议使用30水浴，即提取液要在水浴中预热，并且入酶液后的试管也需要放置于水浴中，同时室温也应控制在0℃上。?速试剂对农药非常敏感，测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂，以及操作者和器具沾有微量农药，都会对检测结果带来影响。?分光度计长期处于开机等待状态时，应将比色室盖打开，避免仪器光元件因过度疲劳而损坏GB/T186××2002系标准方法的应用农药残留量快速检测中比色皿使用的注意事项?使用比色皿均须用待测液润洗三遍后方可装样，如外部被湿用擦镜纸擦干。?②比色的清洗，可将比色皿浸泡在阴离子表面活性剂的碳酸溶中（)必要时应在40-50℃热约10min,取出．然后在1+5过化氢的硝酸溶液中浸泡30min，用水冲洗后蒸馏水洗净，倒立在清洁的纱布上控干。放入干燥器保存若急用时可在水洗后用乙醇、乙醚洗涤吹干。经常使用时洗后