利福平检验操作规程

第1第1页共11页文件名称文件编码文件名称文件编码ZL-SOP-065-00利福平检验操作规程(BP)颁发部门质量治理科 分发数量份生效日期分发部门：质量治理科、中心化验室制定人日期审核人日期审核人日期批准人日期1.目的：标准利福平检验操作，保证利福平的质量。2.范围：适用于公司的利福平的检验。3.责任：质量治理科、中心化验室主任、检验员对本规程的实施负责。4.检验依据：5.取样依据：有关物质应符合规定按《成品取样标准操作规程》取样。有关物质应符合规定工程性状质量标准乙醚和水中微溶，在甲醇中溶解。A在237nm、254nm、334nm和475nm334nm与475nm1.75B供试品的红外吸取图谱应与比照图谱全都C溶液颜色由橘黄色变为红紫色，且无沉淀生成。酸度pH4.5～6.5****制药利福平检验操作规程(BP)文件名称文件编码ZL-SOP-065-00****制药利福平检验操作规程(BP)文件名称文件编码ZL-SOP-065-00第10第10页共11页枯燥失重枯燥失重有机溶剂残留微生物限度应不得过百万分之二十按枯燥品计算含利福平(CHNO)应为97.0%～102.0%4358412应符合规定需氧菌总数不得过1000cfu/g霉菌和酵母菌总数不得过100cfu/g大肠埃希菌不得检出性状颜色测定方法：取本品适量，置白色背景下，平铺，检视。标准规定：为红褐色或棕红色的结晶性粉末。鉴别紫外光谱法仪器：紫外可见分光光度计。试剂：甲醇、磷酸二氢钾、氢氧化钠、均为分析纯。磷酸盐缓冲液PH7.：取磷酸二氢钾1.36，加0.1mol/L79ml，200ml，既得。1ml50ml〔PH7.4〕稀释至刻度，摇匀，既得。操作方法：1ml50ml冲液〔PH7.4〕1ml20ug为供试品溶液。测定方法：照紫外-可见分光光度法测定。参比池和样品池均参与空白溶液〔用已配对的石英吸取池〕500nm～220nm以空气为参比，在500nm～220nm度应符合下表规定。波长范围〔nm〕220～240241～250251～300300波长范围〔nm〕220～240241～250251～300300吸光度≤0.40≤0.20≤0.10≤0.05标准规定：237nm、254nm、334nm475nm334nm475nm1.75红外光谱法试剂:溴化钾，为分析纯。仪器：红外分光光度计。测定方法：1.5～2.5mg，置玛瑙研钵中，参与枯燥的200～300mg制成供试片〔目视检测，片子应呈透亮状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品6.2.2.4标准规定：本品的红外光吸取图谱应与比照的图谱全都。3项试剂与溶液 过硫酸铵的磷酸盐缓冲液〔PH7.4〕测定方法：25mg，25ml55ml100g/L〔PH7.4〕1ml，振摇几分钟，观看；标准规定：溶液颜色由橘黄色变为红紫色，且无沉淀生成。检查酸度仪器：酸度计。操作方法：100mg25ml10ml1ml10mg测定方法：取PH4.00、PH6.86测定供试品溶液的PH标准规定：PH4.5～6.5.有关物质：照高效液相色谱法测定。仪器：高效液相色谱仪210.1g/L136.1g/L174.2g/L1.9g/L氯酸钠、5.9g/L20.9g/L5.9g/L20.9g/L650ml350ml0.45ul30min混合溶剂的制备：10ml210.1g/L23ml136.1g/L二氢钾、77ml174.2g/L640ml250ml腈混合均匀后待用。色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：C8 流速：1.5ml/min检测波长：254nm进样量：20μl操作方法：0.1g,加乙腈溶解并稀释50.0ml，5.0ml50.0ml;利福平比照品溶液：20.0mg100ml1.0ml1.0ml100ml。操作：注入空白溶液一针，再注入供试品溶液，记录色谱图至主2个主要峰的高度不低于记录仪最大范围的一半，要求利福平主峰和醌式4.0。标准规定：醌式利福平峰面积不得大于对应比照品溶液中醌式利福平峰面积的1.5倍1.5%不得大于比照品溶液中利福平峰面积的1.0；其单峰面积总和不得大于比照品溶液中利福平峰面积的3.5倍〔3.5。枯燥失重仪器：真空枯燥箱。测定方法：1.0g，置〔80℃、压力不枯燥至恒重的扁形称量瓶中，周密称定，在30～60。

W1＋W2－W3W2

×100%式中 W1

为称量瓶恒重的重量，g；W为供试品的重量，g；2W为〔称量瓶＋供试品〕恒重的重量，g；3标准规定：1.0%。炽灼残渣仪器：高温箱形电阻炉。测定方法：2.0g2ml600℃炽灼至完全3～515.8%W/V600℃炽灼至恒重〔枯燥器中的枯燥剂为硅胶，放冷至室温60。计算公式：炽灼残渣〔%〕=W3—W1×100%W2式中 W1

为空坩埚的重量，g；W为供试品的重量，g；2W为〔坩埚＋残渣〕恒重的重量，g；3标准规定：0.1%。重金属PH3.标准铅溶液、硫代乙酰胺试液、硫酸镁、冰醋酸〔PH3.取醋酸铵2525ml7mol/L38ml2mol/L5mol/LPH3.5〔电位法指示，用水稀释至100m，既得。硫代乙酰胺试液：4g，100ml，至冰〔1mol/L15ml、水5.0ml20ml〕5.0ml1.0ml，置水浴上加热201050.1599g，置1000ml5ml50ml作为贮备液。周密量取贮备液10ml100ml〔每1ml相当于10ug的Pb，本液仅供当日使用〔配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。操作方法：1.0g25%W/V1mol/L4ml800℃。放冷，加1mol/L1ml22mol/L5ml0.1ml13.5mol/L0.5ml20mlPH3.52ml1.2ml2〔10ppm〕代替供试品同样方法所得标准溶液比色，产生的棕色较浅，即重金属小于百万分之二十。标准规定：含重金属不得过百万分之二十。含量测定甲醇、磷酸盐缓冲液〔PH7.4〕0.100g100ml2.0ml，用磷酸盐缓冲液〔PH7.4〕100ml，照光475nm187有机溶剂残留仪器：气相色谱仪、顶空进样器。N、N-二甲基甲酰胺、冰乙酸、二甲基亚砜为分析纯。0.2g，加二甲基亚砜溶解2ml0.05g0.05g、乙酸丁、正丁醇约0.05g，加二甲基亚砜溶解并稀释至100ml，摇匀，制成每1ml0.5mg0.5mg、乙酸丁酯0.5mg0.5mg、N.N—二甲基甲酰胺0.088mg、冰乙酸0.5mg。周密量取2ml20ml色谱条件与系统适用性试验色谱条件色谱柱：DB—FFAP〔30m×0.32mm×0.5um〕载气：高纯N2H2O21:10柱温:初温40℃,保持5min,以15℃／min的速率升温,升至2205minSPL280℃DFID300℃顶空平衡条件平衡温度：60℃操作方法：取比照溶液顶空进样注入气相色谱仪，按丙酮峰、乙N，N-二甲基甲酰胺峰、冰乙酸、二甲基亚砜峰的挨次出峰，各峰间的分别度均应符合规定，理论板数不低5000。2.0ml气相色谱仪，记录色谱图。标准规定：按外标法以峰面积计算出样品中各检测溶剂的含量，0.50.5%0.5%、0.50.5%、N，N-二甲基甲酰胺应不0.088%。微生物限度检查仪器与用具：量筒、刻度吸管、电炉、烧杯、容量瓶、微孔滤膜、恒温培育箱试液与试药PH7.03.56g、磷酸氢二钠7.23g4.30g1.0g100ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。0.9%9.0g1000ml，过滤，分装，灭菌。胰酪大豆胨琼脂培育基：取胰酪大豆琼脂培育基44g，加纯化水1000ml，加热溶解，分装，12115min1000ml，加热溶解，分装，12115min需氧菌总数与霉菌和酵母菌总数测定方法：取供试品利福平〔1〕10g〔2〕10gpH7.0100ml1：101ml，90mm15-20ml的胰酪大豆胨琼脂培育基〔需氧菌类别计数选用该培育基〕或沙氏葡萄糖琼脂培育基〔霉菌、酵母菌类别计数选用该培育基2100cfu/g。大肠埃希菌检查测定方法：10gPH7.0100ml1ml9ml30～35℃培育241ml接种至100ml42～44℃48基平皿上，30～35℃483平板。观看是否有菌落生长观看有无鲜桃红色或微红色、中心深桃红色、圆形、扁平、边缘整齐、外表光滑、潮湿的菌落形成。3～435℃18～24h，进展纯培育。G－无芽孢短杆菌的，应连续做生化试验。生化试验发酵试验35℃24～48h。凡大肠埃希菌，可发酵乳糖产酸产气。靛基质试验将上述纯培育物接种在蛋白胨水培育基中，在 35℃下培育(48±h0.3～0.5mL液面呈玫瑰红色为阳性反响，呈试剂本色为阴性反响。甲基红试验将纯培育物接种在磷酸盐葡萄糖胨水培育基内，在35℃下培育(48±2)h1mll或橘红色为阳性反响。呈黄色为阴性反响。乙酰甲基甲醇生成试验(VP将纯培育物接种