白酒中邻苯二甲酸酯类的测定

白酒中邻苯二甲酸酯类的测定第1页，共28页，2023年，2月20日，星期一主要内容邻苯二甲酸酯类化合物的特性检测方法概述

气质联用方法检测过程中的关键控制点

检验结果的分析和确认第2页，共28页，2023年，2月20日，星期一一、邻苯二甲酸酯类特性分析

邻苯二甲酸酯类化合物（PAEs），是指从邻苯二甲酸二甲基酯到十三烷基酯，共20多种化合物。是目前最常用的增塑剂，主要

用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯

由硬塑胶变为有弹性的塑胶。其具有种类多、难以降解、生物富

集性强的特点,具有雌激素样作用，是全球环境污染最为严重物质之一。第3页，共28页，2023年，2月20日，星期一PAEs性质邻苯二甲酸酯的一般化学结构是由一个刚性平面芳烃和两个可塑的非线性脂肪侧链组成,常温下呈无色油状粘稠液体。一般难溶于水,易溶于有机溶剂,属中等极性物质。该类化合物的液态温度范围相当宽,具有非常大的流动性和较小的挥发性和水溶性,这些理化性质决定了PAEs的行为特点。第4页，共28页，2023年，2月20日，星期一几种重点关注的PAEs性质DMP:沸点282℃。与乙醇、乙醚混溶，溶于苯、丙酮等多种有机溶剂20℃水中溶解度小于0.1g/L。logP=1.56。DEP：沸点350℃。与乙醇、乙醚混溶，溶于丙酮、苯等有机溶剂，20℃水中溶解度1g/L。logP=3.3。DBP：沸点340℃。水溶性及挥发性都很低，但易溶于乙醇、乙醚、丙酮和苯等有机溶剂也能与大多数烃类互溶。logP=4.72。DIBP：沸点327℃。在水中溶解度0.05g/L（25℃）。logP=4.11。

DEHP：沸点386℃。不溶于水，溶于大多数有机溶剂和烃类。

logP=7.19。

第5页，共28页，2023年，2月20日，星期一PAEs特性总结与分析思路PAEs具有较高的沸点，对光热稳定。大部分PAEs具有亲脂性，易溶于非极性溶剂。其中DMP、DEP等有一定的亲水性。适合用液液萃取、固相萃取等方式进行净化、富集，但须照顾到具有一定亲水性的组分DMP、DEP、DMEP、DEEP。第6页，共28页，2023年，2月20日，星期一二、白酒中PAEs的检测方法概述1、方法和标准试剂盒法气相色谱法(GC)、气质联用法（GC-MS）。液相色谱法(LC），液质联用法（LC-MS/MS）。GB/T21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定

》第7页，共28页，2023年，2月20日，星期一2、试剂盒法

基于ELISA原理针对邻苯二甲酸酯一类全部物质的试剂盒专门针对DBP的试剂盒检测限多在0.05ppm~1ppm之间多达数十种第8页，共28页，2023年，2月20日，星期一应用分析最为关注的就是DBP。由于DBP限量低，其余两种成分限量要求高，还可能有其他没有限量要求的组分存在。因此，试剂盒筛查发现有检出的，并不能确认合格与否。专门针对DBP检测的试剂盒，存在同类物质的交叉反应，特别是作为异构体的DIBP，交叉反应率较高，多数试剂盒都在30%上，存在较高的误判可能。第9页，共28页，2023年，2月20日，星期一3、气相色谱检测方法

气相色谱法：气相色谱法使用FID检测器，可以对邻苯二甲酸类物质进行检测。但是受灵敏度的限制，对于酒类中的微量DBP不能满足检测要求。若采用浓缩富集、以及使用大体积进样的方式虽可提高灵敏度，但考虑到塑化剂类物质在各种试剂乃至器具中都存在本底值，浓缩富集可能加剧这种影响，实际操作中应当慎用。第10页，共28页，2023年，2月20日，星期一三、白酒中PAEs气质联用检测方法1、方法原理白酒中的PAEs以正己烷提取，使用HP-5MS石英毛细管柱，经气相色谱分离后，使用带EI源的单四极杆质谱仪，选择离子模式（SIM）监测，以各组分保留时间和特征离子的丰度比定性，外标法定量。第11页，共28页，2023年，2月20日，星期一2、试剂、材料、仪器正己烷（色谱纯或重蒸分析纯）、氯化钠；具塞玻璃离心管、玻璃胶头滴管、涡旋混合器、水浴锅；16种邻苯二甲酸酯类化合物标样，正己烷稀释至浓度为0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0μg/mL的标准系列溶液待用；气相色谱-质谱联用仪，具有电子轰击电离源。第12页，共28页，2023年，2月20日，星期一3、白酒样品的处理3.1标准方法称取白酒样品5.00g（精确至1mg）于10mL具塞玻璃离心管中，加入2.00mL正己烷，振荡1min，再加适量氯化钠，静置或离心分层；取上层正己烷进GC-MS分析。问题：部分组分，如DMP、DEP、DMEP、DEEP等，回收率差，仅为30%~60%。第13页，共28页，2023年，2月20日，星期一3.2改进的方法方法一称取白酒样品2.00g（精确至1mg）于10mL具塞玻璃离心管中，置于95℃水浴中30分钟，驱除乙醇；离心管取出冷至室温，补加水至2mL，加入5.00mL正己烷，涡旋提取2min，再加1g氯化钠，振摇0.5min，静置或离心分层；取上层正己烷进GC-MS分析。第14页，共28页，2023年，2月20日，星期一方法二称取白酒样品2.00g（精确至0.1mg）于10mL具塞玻璃离心管中；加入4.00mL正己烷，涡旋提取2min，再加1g氯化钠，振摇0.5min，静置或离心分层；用玻璃滴管将上层正己烷相转移至另一10mL刻度管中，再依次用3mL、2mL正己烷萃取2次，合并三次萃取液，正己烷定容至10mL，摇匀后进GC-MS分析。第15页，共28页，2023年，2月20日，星期一第16页，共28页，2023年，2月20日，星期一4、仪器操作参数进样口：温度250℃，进样量1μL，不分流进样；柱温程序：初始温度60℃，保持1min，以20℃/min升温至220℃，保持1min，再以5℃/min升温至280℃，保持4min；传输线温度：280℃；载气：氦气(纯度≥99.999），流速1mL/min；色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱[30m×0.25mm×0.25μm]离子源为EI模式，质谱调谐参数根据仪器的特点进行调整，确保充分满足方法的检出限要求。各组分监测离子附后。第17页，共28页，2023年，2月20日，星期一第18页，共28页，2023年，2月20日，星期一标准品色谱图

第19页，共28页，2023年，2月20日，星期一5、阳性样品定性验证试样待测液与标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处偏差不超过±0.5%，并且对应质谱碎片离子的质荷比与标准品一致，其丰度对与标准品相比应符合：相对丰度＞50%时，允许±10%偏差；相对丰度20%~50%时，允许±15%偏差；相对丰度10%~20%时，允许±20%偏差；相对丰度≤10%，允许±50%偏差，此时可定性确证目标分析物。第20页，共28页，2023年，2月20日，星期一6、检出限、线性范围检出限按照GB/T21911-2008，白酒属于不含油脂的样品，检出限为0.05mg/kg。可通过空白值分析、标准添加确定是否满足。改进的处理方法均可满足0.05mg/kg的检出限。线性范围

0.02μg/mL~1μg/mL。第21页，共28页，2023年，2月20日，星期一四、关键控制点1、玻璃器皿的洗涤

所用玻璃器皿洗净后，用重蒸水洗三次，丙酮中浸泡1h，在200℃下烘烤2h，冷却至室温备用。全部器皿单独存放，避免误用。另外，接触过标准品的玻璃器皿应单独洗涤，防止交叉污染。第22页，共28页，2023年，2月20日，星期一2、其他可能导致污染的因素标样的储存、配置标准系列的过程蒸馏水洗瓶滴管的胶头试剂瓶的内盖气相色谱自动进样器针、洗针液和废液瓶气相色谱系统，进样隔垫……第23页，共28页，2023年，2月20日，星期一3、试剂、器具的选择与评价正己烷、水：PAEs背景低，含量稳定；杜绝使用塑料材质的器具；所有的器具和试剂应经过严格的评价；来自不同瓶的试剂均需做空白试验第24页，共28页，2023年，2月20日，星期一试剂评价结果环己烷石油醚重蒸石油醚乙酸乙酯色谱级正己烷农残级正己烷在溶剂中存在的邻苯酯类主要有三种，邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）。实验时应严格控制，注意选取空白值低的溶剂。第25页，共28页，2023年，2月20日，星期一4、质控措施空白试验：每批测定时，须带至少一个空白试样，除不加样品外，其他操作同样品处理步骤一致，考察背景空白影响。质控样：使用质控样。没有质控样可采用加标回收，在阴性样品中加入乙醇配制的标样溶液，按相同方法处理后，计算回收率。加标水平应包含检出限、两倍检出限和十倍检出限。对于结果存有疑问需确证的样品，还应做样品加标。在仪器运行高含量的标样或样品后，应进行空白溶剂分析，验证仪器的交叉污染水平。在样品分析过程中，按照一定频次加入质控样，验证测试系统的稳定性。第26页，共28页，2023年，2月20日，星期一五、检验结果的分析1、结果定性在相同条件下，试样和标样选择离子色谱峰的相同保留时间偏差不超过±0.5%，对应质谱碎片离子的质荷比一致，其丰度比与标准品的偏差符合要求，可定性确证目标物。

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