实验三离体蛙心灌流课件

实验三

电刺激和化学因素对心脏活动的影响2.观察在心脏活动周期内给予刺激所引起的期前收缩和代偿间歇。3.观察Na、K、Ca

、Adr（肾上腺素）、Ach（乙酰+2++胆碱）对心脏活动的影响，理解内环境理化因素相对恒定对维持心脏正常活动的重要性。自律性、兴奋性、传导性、收缩性。2、两栖类动物的心起搏点：静脉窦。3、心肌兴奋性的周期性变化：有效不应期；相对不应期；超常期。期前收缩：给予心室肌一次有效刺激，产生一次正常节律以外的收缩反应，该有效不应期

=

收缩期

+

舒张早期收缩先于下一次正常窦房结兴奋引起的收缩。1、心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境（离子浓度、pH等），内环境的变化直接影响到心脏的正常节律性活动。2、因此可用人工灌流的方法，观察灌流液成分的无Ca2+任氏液；2

。心脏活动调节1、神经调节：在体心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。①

交感神经末梢释放NE（去甲肾上腺素），使心肌收缩力加强，传导速度加快，心率加快，即产生正性变时、变力、变传导作用；②

迷走神经末梢释放Ach（乙酰胆碱），使心肌收缩力减弱，心肌传导速度减慢，心率减慢，即产生负性变时、变力、变传导作用

。实验器材：张力换能器1324（背面）（两栖类动物心脏解剖结构示意图）24132、在主动脉根部剪一斜切口；5、将插管转向插入心室（插入后有血液进入插管），将丝线结扎固定在蛙心套管上。3、始终保持灌流液面高度恒定（1-2cm）。43将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉，再将蛙心夹上的系线与张力传感器相连。不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液

曲线疏密：代表心跳频率。曲线的规律性：代表心室的节律性。曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。曲线的基线：代表心室舒张的程度。3.改变灌流液成分对心脏活动的影响}(

1%KCl；（心率、收缩力度、基线水平）2%CaCl

）2；（1）吸出插管内全部任氏液，换入无钙任氏液，观察心缩曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，用新鲜任氏液换洗3次，直至心缩曲线恢复正常。（2）加1-2滴1%KCl于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。（3）加入1-2滴1%CaCl

于新换入的任氏液中，观察2心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。（4）加入1-2滴0.01%Adr于任氏液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。（5）加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。（6）钙僵：加入4-5滴２%

CaCl

于新换入的任氏液中，观察心缩21.制备标本时，应按指导试探着插管，避免损伤心脏(包括静脉窦)。4.药物作用不明显时，可适量增加。每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。6.固定换能器时应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的液体进入换能器内造成短路。*分析各观察结果的原因。*心肌有效不应期长的生理意义。*心率过慢，期前收缩后是否有代偿间歇？*实验中套管内液面为什么要保持相同高度？心肌收缩活动有Ca2+触发，心肌肌浆网不发达，因此其收缩强弱依赖于细胞外Ca2+浓度灌流液中缺乏Ca2+，心肌细胞内Ca2+大大减少，心肌兴奋--收缩藕联过程减弱，心肌收缩活动减弱*高K+任氏液，心跳明显减弱甚至停跳于舒张状态K+与Ca2+有竞争性拮抗作用。细胞外K+浓度增加可抑制细胞膜对Ca2+的转运，从而使进入胞内的Ca2+减少，心肌兴奋--收缩藕联过程减弱，心缩力降低甚至停于舒张状态。*高Ca2+，心缩加强，舒张不完全，甚至停于收缩状态心肌舒缩活动取决于胞内Ca2+浓度，当Ca2+升高到0.01mM，肌钙蛋白可