槐米中芦丁的提取和精制(2023年)实验报告

试验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定〔一〕试验目的要求制备芦丁，供药用。通过芦丁的制备，把握黄酮类化合物的提取分别的原理和操作。生疏重结晶技巧。了解和把握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。〔二〕试验的根本原理芦丁的提取原理利用芦丁构造中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进展提取，提取液加酸后可沉淀析出〔碱溶酸沉法。也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性质进行提取。芦丁的分别原理利用芦丁构造在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质分别。芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后能析出而到达分别的目的〔如不纯可再重复操作进展分别。也可承受醇溶水沉法进展精制。芦丁的鉴定原理〔1〕利用吸附薄层色谱的分别原理，芦丁与芦丁比照品在同一条件下进展开放，显色，以到达鉴定芦丁的目的。通过专属的化学显色反响〔如三氯化铝显色反响，确定芦丁的成分类型〔黄酮类。(三)试验内容用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。用酸沉法和冷却过饱和法分别芦丁。溶剂重结晶精制芦丁。薄层色谱法和显色反响鉴定芦丁(四)试验药材仪器与试剂20g。仪器：磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯，1000ml烧杯，50ml烧杯，250ml园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置，布氏漏斗，抽滤瓶、层析缸等。试剂：硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。〔五〕试验步骤提取〔水提取法〕称取槐米粗粉20g500ml烧瓶中，加水200ml，用磁力加热搅拌器加热煮沸30min，趁热过滤。残渣同法操作一次，合并两次滤液，放置冰箱中析晶，待全部析出后，减压抽滤，用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶，抽干，得粗制芦丁，枯燥，称重，计算得率。精制〔醇-水重结晶法〕1g250ml80%30ml15分钟，趁热抽滤。滤液置250ml烧杯中，向滤液中加蒸馏水〔3~4倍量〕至溶液呈明显混浊，室温放置，抽滤得精巧芦丁。用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶，晾干，称重。(六)过程与现象记录Day1〔2023-05-07〕提取20.02g，组装仪器。500mL200m1--10℃沸腾，产生大量气泡，药渣翻滚，漩涡被气泡遮盖1-。加热过程中时常停顿沸腾，续略升2~℃。随着时间的延长，液体颜色加深。煮沸规程中应掌握液量，过少难以提出药品，过多简洁喷出瓶口。③最初用抽滤法分别残渣1--，并且易堵塞和物较少。滤液为深黄色色，粘稠，气味深厚甘甜。

效果略好，但是溶液还是冷却，溶解的提取500mL烧瓶中加水200mL磁力搅拌加热30min，液体颜色略比第一次深。⑤将两次得到的浸液〔300mL〕收集放入冰箱备用。Day2〔2023-05-08〕精制11-〕1-〕1-〕，枯燥得粗制芦丁1-1〕。加-1〕，得到黄色油状液体1-1〕。另旋转蒸发粗提物的滤液1-1〕，没有产物。Day3〔2023-05-14〕鉴定点滴显色反响 从放置一周的粗提物中取芦丁的甲醇溶液〔供试液〕分别点在滤纸上，挥去溶剂，紫外照耀，光吸取明显1-1〕，然后分别添加供试液芦丁的甲醇溶液和显色2三氯化铝乙醇溶液，显黄色1-1〕，在紫外灯下365nm观看有明显亮斑1-1〕。薄层色谱鉴定吸附剂：硅胶GF254薄层板5.0cmX10.0c。1-11-21-3样品：自制芦丁〔1mg/ml〕1-11-21-3开放剂：三氯甲烷-甲醇-甲酸〔7∶3∶0.5〕显 色：a.先在可见光下观看，然后在紫外光下观看，有明显紫外吸收65nm紫外灯下观察〕b1-1，365nm黄色，左侧有明显紫外吸取1-1。4.留意事项硼砂因能与芦丁中的邻二酚羟基结合，起保护邻二酚羟基，不被氧化破坏的作用。试验证明，提取时参加硼砂，产品的质量会好些。石灰乳既能到达碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐米中大量的粘液质和酸性树脂〔形成钙盐沉淀，但PH不能过高和长时间煮沸，由于会导致芦丁的水解而开环和形成钙鳌合物，影响产品的质量和产率。PH〔酸性太强〕会使芦丁形成洋盐而收率降低。〔七〕结果计算及分析产率29.69g30.20g样品净重0.51g比移值Rf=3/5.75=0.522分析：1、水提法不能充分溶解芦丁；2、精制时粗提物聚拢成固体颗粒，没有充分溶解；3、抽滤、转移等过程的损失。〔八〕心得体会第一次做这样长时间的试验，渐渐宠爱上了试验室这样安静的气氛，在这里做试验，只需要关注操作和试验过程，思考、分析反响机理和得到某个结果的缘由，不需要考虑试验之外的那些世俗和喧嚣。1-5 1-61-8