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文档简介
标准菌株使标准操作规1检目对实验室的准菌株进合理的保,并规范合理的使用流程,保证菌的性能稳可靠。2范微生物实验保存的标菌株。3职微生物组工人员正确行本操作程。4术和义4.1准菌株其特征进行分类和描,有明确来源。ATCC(AmericanTypeCultureCollection)美国准菌株收中心。4.2准储备株标准菌株经一代转接获得的同菌株。4.3工作菌标准储备菌传代后得的同种菌。4.4标准培物标准菌株、准储备菌、工作菌的统称。4.5控菌株ATCC最佳但当无法得时可以用ATCC演化的菌株或我国家菌种储存的标准菌株。特殊情况,例如定性试验可已知的菌作为质控株。室间质评的菌株即可。5保程5.1准菌株
5.1.1商业购的准菌株干,-80℃低温存,可以2年以。安瓿真包装的,-80℃长期稳保存。将标准株进行编和登记。5.1.2复用1ml无菌的小牛清或营养肉汤溶解。根菌种的生特点,接到新鲜培养基上选择适宜的培养条培养18-24h。酵菌要求3天形成子的微生物保存孢子5.2准储备株5.2.1由复苏的ATCC标准菌株制备复苏后的准菌株要查其纯度必要时进行生化试验检查。刮取培物上的菌体用足量的悬浮于防培养基中。防冻液可以是无菌脱纤羊血、10%甘油汤。储存够量的标准储备菌株可用1-2年。一年52周需52支以。5.2.2甘肉汤保存法成分有蛋白、牛肉浸粉、氯化、甘油、纯化木。相当于20%的油。挑取5环菌落入到1ml甘肉汤中混匀。苛养可以适当加菌量。-80℃保存除链球菌和嗜血杆菌以细菌均可用。保存限1-5年。5.2.3全保存法成分为脱纤羊血。挑5环菌落加入到甘油肉汤中混。苛养菌以适当增加菌量。-80℃保存主要用于保存链球、嗜血杆及厌氧菌保存期限1-5年。5.2.4标储备菌株进行编号和登记。5.3作标准株由标准储备株传代得的菌株。准储备菌株对多向下传三代。过多传种会增变异的机准储备菌株根据菌特点选择宜的培养和培养条件进行培养18-24h即工作标准菌。储存在2-8℃,可放四。个别营养要高的为2周,如肺炎链菌和嗜血杆菌。使用时应编号并登。5.4号方法每个菌的保管都要有一的编号签字笔标注,便于查找和管理。
来源购买的标准株储备标准菌
数字1501ATCC259221501ATCC25922-3
意义15年第1株由1501ATCC25922传代而来的号准储备株5.5录管理5.5.1菌应有严格的登记。每个编号都要有细的记录括来源、代、保存方法、使用记录、使用原、高压灭菌记录。附表《准菌株记表》《标准储备菌株记录表》5.5.2菌保管应有专人负责,保存于专用冰中,双人锁,确保种安全。保管人员变动时,必须严交接手续。5.5.3各菌种应按规定时间接种,注意菌种无污染及异,如发变异时,应及时更换5.5.4一使用周期结束后,标准菌株、储备株、工作株都要进高压灭菌处理,并做好记录。6使流标准菌株
购买的标准株,编号℃保复苏接种合的培养基孵育出菌
用完第二天压灭菌性能验证标准储备菌
挑取典型的落到合适稳定剂中编号,-80保存,准支日质控每周取出一标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条孵育出菌落
传代培养物储备菌株管用完第二天
周质控每周取出一标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条孵育出菌落
月质控每月取出一标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条孵育出菌落高压灭菌传代培养物以作为第天的工作菌使用。℃保存。以后6天用。
直接作为工菌株使用第二天高灭菌
以后的天每都用传代培养物传个新的菌株,作为工菌株使用工作菌株使后第二天高压灭菌7天后代培养物废,进行高压灭重新取一直准储备菌株传种,进下一轮周期,程序如面几个步骤
也可以用最一天的的工作菌株作传代培养物继续使用周。0代
购买的标准(追溯来源卫生部室间质评株可作为控菌株使用,按照标菌株管理
接种传代培一次,并行纯度和生化鉴1代作“储标菌进多个分装保存照特条件储存和推荐的存时间2代
每天传代平作为第二的工作标菌株,进行室内质控,完立刻高处理进行纯度检和生化鉴定作为传代物或者第一支“工作株”特定的储存条件推荐储存时
室内质控
可以再重复周,规则上。但一般来说作菌株不超过3代7质控7.1观察菌落的型形态是否符合菌种。没有杂菌长。7.2用氧酶、触酶、上机等生化试验,鉴定种有没有化。7.3如果污染或怀疑有问题时,应准备新的次传代物者获取新标准菌株。8参文序号
唯一性编号·19863·GBT27405
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