化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座

化药质量分析研究室——徐伟斌内部培训资料化学药品残留溶剂研究探讨化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第1页点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本1残留溶剂概述2残留溶剂确实立4残留溶剂各标准比较5溶剂残留分析方法选择与建立3残留溶剂分类及研究标准6溶剂残留分析方法方法学验证7研究结果分析及质量标准制订目录化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第2页残留溶剂概述化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第3页ICH关于残留溶剂定义药品中残留溶剂系指在原料药或辅料生产工艺中，以及在制剂制备过程中使用过或产生有机挥发物。它们在实际生产工艺中未能被完全去除。因为残留溶剂没有疗效，故全部残留溶剂应尽可能除去，以符合产品规范、GMP或其它基本质量要求。简述化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第4页残留溶剂确实立化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第5页残留溶剂研究对象从理论上讲，药品制备过程中所使用有机溶剂都有残留可能，均应进行残留量研究。不过，药品研发者能够经过对有机溶剂性质、药品制备工艺等进行分析，提出科学合理依据，有选择性对一些溶剂进行残留量研究，故在进行残留溶剂研究之前，需要首先对药品中可能存在残留溶剂进行分析，以确定何种溶剂需要进行残留量检测和控制。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第6页确定残留溶剂时需要考虑问题原料药中有机残留溶剂与其制备工艺亲密相关，同时也需要结合其制剂临床应用特点来考虑怎样对可能残留溶剂进行研究。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第7页原料药制备工艺ABCA合成路线B后续溶剂影响C中间体影响化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第8页制剂及其临床应用特点1剂型、给药路径工艺

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剂量、用药周期52处方

适应症4化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第9页残留溶剂分类及研究标准化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第10页药品中残留溶剂-----在原料药、辅料以及制剂生产中使用，但在工艺过程中未能完全去除有机挥发性化合物。药品中残留溶剂种类：69种分类：按照对人体和环境危害程度分为4类ICH制订溶剂残留指导标准化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第11页第一类溶剂应防止使用溶剂，为人体致癌物、疑似人体致癌物或能对环境造成公害试剂第二类溶剂应限制使用溶剂，为能造成动物非遗传毒性致癌或可能造成其它不可逆毒性反应试剂第三类溶剂低毒性溶剂，为在药品中以普通量存在时对人体无害溶剂。残留量普通不高于0.5%第四类溶剂没有足够毒性资料溶剂，生产厂在使用时应提供这些溶剂在制剂中残留水平合理性论证汇报化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第12页第一类溶剂溶剂名称浓度程度（ppm）苯2四氯化碳41，2－二氯乙烷51，1-二氯乙烯81，1，1－三氯乙烷1500第二类溶剂溶剂名称浓度程度（ppm）乙腈410氯苯360氯仿60环己烷38801，2－二氯乙烯1870二氯甲烷6001，2－二甲氧基乙烷100N,N-二甲基乙酰胺1090N,N-二甲基甲酰胺8801，4－二氧六环3802－乙氧基乙醇160乙二醇62甲酰胺220正己烷290甲醇30002－甲氧基乙醇50甲基丁基酮50甲基环己烷1180N-甲基吡咯烷酮530硝基甲烷50吡啶200四氢噻砜160四氢化萘100甲苯8901，1，2－三氯乙烯80二甲苯﹡2170四氢呋喃720第三类溶剂

5000ppm溶剂名称溶剂名称乙酸正庚烷丙酮乙酸异丁酯甲氧基苯乙酸异丙酯正丁醇乙酸甲酯仲丁醇3－甲基－1－丁醇乙酸丁酯丁酮叔丁基甲基醚甲基异丁基酮异丙基苯异丁醇二甲亚砜正戊烷乙醇正戊醇乙酸乙酯正丙醇乙醚异丙醇甲酸乙酯乙酸丙酯甲酸

第四类溶剂溶剂名称溶剂名称1，1－二乙氧基丙烷甲基异丙基酮1，1－二甲氧基甲烷甲基四氢呋喃2，2－二甲氧基丙烷石油醚异辛烷三氯乙酸异丙醚三氟乙酸化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第13页残留溶剂各标准比较化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第14页USP、BP、EP、JP、ChP.现行标准比较Usp32中<467>收载残留溶剂，讲述残留溶剂分类、程度描述、分析过程、程度以及分析控制方法，分析方法上，将残留溶剂一类和二类分成一组，三类单独一组。其中一类和二类又分成水溶性、水不溶性和高沸点三种，采取三种不一样分析方法；三类溶剂则采取干燥失重法。其它基本上同ICH基本要求。BP中残留溶剂基本上同EP，分析方法采取两种不一样分析体系，即分析一类溶剂采取方法A，二类采取方法B（方法A、B均为顶空进样，程序升温，毛细管柱，FID)，供试品也分成三种类型：水溶性、水不溶性和高沸点三种，其它基本上同ICH基本要求。JP与ICH一致。ChP.（）与ChP.（）相比较，并无新修订。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第15页溶剂残留分析方法选择与建立化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第16页残留溶剂测定方法ICH及各国药典推荐使用方法残留溶剂分析方法

非专属性各种溶剂混合只能得到全部残留溶剂总量水分也会干扰测定干燥失重法、热重测定法检测灵敏度低核磁共振光谱法检测灵敏度低,干扰原因多紫外、红外光谱法专属性良好分离能力高灵敏度气相色谱法化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第17页进样方式固相微萃取检测器色谱柱直接进样顶空进样填充柱毛细管柱FIDECD静态顶空动态顶空气相色谱法TCD、FPD、NPD等溶媒化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第18页直接进样气相色谱法优点：方法比较简单、可靠，仅需要是自动进样器，不需要其它装置缺点：样品本身及样品中含有不挥发性组分也会被注入到气相色谱中，污染进样口、色谱柱，缩短色谱柱使用寿命；样品基质同时被注入到气相色谱中，在下一次进样前必须使用较高柱温把这些物质从色谱柱中赶出来，延长了整个分析过程时间顶空（静态顶空）优点：简便、洁净、快速、不需要使用大量有机溶剂且易于实现仪器自动化，药品本身不进入气相色谱，只有易挥发性残留溶剂等杂质进入气相色谱进行分析缺点：灵敏度稍低，受各种原因影响（溶剂体系、基质效应等）三种气相色谱法比较化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第19页顶空（动态顶空）用流动气体将样品中挥发性成份“吹扫”出来，再用一个捕集器吸附吹扫出来物质，然后经热解析将样品送入气相色谱仪进行分析优点：灵敏度高，比静态顶空最少高1000倍，分析过程中不需要等候气体与样品基质之间平衡缺点：样品管较难清洗，重现性比静态顶空低，仪器复杂，不便于推广固相微萃取技术灵敏度高，已经逐步成为药品中残留溶剂分析新选择化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第20页顶空气相色谱法及其在残留溶剂测定中应用现实状况顶空气相色谱法(headspacegaschromatography,HS-GC)是用气体对液体或固体样品中挥发性组分进行萃取一个预处理方法。将含有挥发性组分样品置于密闭系统中，在一定温度下使样品中挥发性组分在气-液或气-固两相甚至气-液-固三相中分配到达平衡，然后取凝聚相上端气体送入气相色谱仪进行分析，即可间接测定样品中挥发性组分当前药品管理部门和各国药典推荐使用检测药品中残留溶剂最适合技术为静态顶空气相色谱法化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第21页1物质专属性2顶空平衡温度3溶剂体系4样品溶液体积5盐析效应顶空气相色谱法灵敏度影响原因顶空灵敏度化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第22页色谱柱选择残留溶剂检验大多需要较高分离度和检测灵敏度，通常采取毛细管色谱柱。填充柱口径大，造成溶剂峰扩散，检测灵敏度低实践证实，使用非极性至中等极性色谱柱，配适当当柱温梯度可分离大部分有机溶剂。通常待查溶剂数目仅两、三种时，可用极性较强色谱柱，出峰快，分析时间短；当溶剂数目较多时，还是优选非极性至中等极性柱，分离很好。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第23页非极性柱弱极性柱中低极性柱中等极性柱商品名DM-1,DB-1,HP-1,SPB-1,BP-1,SE-30,Rtx-1,ZB-1,AT-1,CP-Sil5CB等DM-5,DB-5,HP-5,SPB-5,BP-5,SE-52,Rtx-5,ZB-5,PE-5,SE-54,CP-Sil8CB等DM-35,DB-35,HP-35,SPB-35,BP-35,Rtx-35,ZB-35,等DM-1701,HP-1701,SPB-7,ZB-1701,Rtx-1701,CP-Sil19CB等化学成份100％二甲基聚硅氧烷5%苯基-甲基聚硅氧烷35%苯基65%甲基聚硅氧烷14%氰苯基86%甲基聚硅氧烷化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第24页中等/强极性极性柱极性柱商品名DB-225,HP-225,SP-225,BP-225,DB-23，Rtx-225,AT-225,OV－225等DB-WAX,HP-INNOWAX,DB-WAXetr,CP-WAX,ZB-WAXDB-FFAP,HP-FFAP,CP-FFAP，OV-3501等化学成份50％氰丙基甲基聚硅氧烷聚乙二醇（PEG）硝基对苯二酸改性聚乙二醇化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第25页

溶媒选择选择标准：溶解样品，并对色谱柱无损坏，不干扰测定。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第26页顶空进样溶媒首选水，其次DMF、DMSO、不挥发酸碱溶液，不可使用盐酸溶液和氨水，可选择在80～90℃加热能溶解样品试剂。如待查成份为苯、甲苯、三氯甲烷等水溶性不好溶剂，可采取混合液，即先用少许乙醇或甲醇溶解待查溶剂再用水稀释。当待测溶剂在有机相中分配系数显著大于水相（比如三氯甲烷），对顶空进样来说采取有机相如DMF为溶剂不是很好选择；假如样品也只能在有机相中溶解，提议采取混合液。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第27页直接进样溶媒水、适当有机溶媒或混合液。对于非极性色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱使用寿命。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第28页色谱柱：初温应靠近样品中最轻组分沸点，而终温则取决于最重组分沸点，升温速率则要依样品复杂程度。进样口：普通靠近沸点最高组分，但要低于易分解组分分解温度。惯用条件是200～250℃。检测器：标准是防止流出众谱柱组分冷凝。FID检测器通常设置为250～300℃。温度选择化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第29页FID（火焰电离）——质量型检测器，适合用于有机物NPD（热表面电离）——氮/磷化合物ECD（化学电离）——半选择性检测器，适合用于电负性物质（卤代烃）。多数情况下，三氯甲烷、DMF、DMSO均用FID检测，但需采取一些办法提升检测灵敏度。四氯化碳则必须用ECD检测器。检测器选择化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第30页平行配制两种溶液,制备方法保持一致,这么能够防止基质效应。假如采取研磨、超声、加热等方法增加样品溶解性,需要经过方法学研究来确证方法可行性。供试品溶液和对照品溶液制备化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第31页溶剂残留分析方法方法学验证化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第32页点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本专属性检测限线性与范围定量限重复性中间精密度准确度耐用性方法学验证化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第33页专属性要求空白无干扰、各溶剂峰之间分离度因符合要求化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第34页检测限与定量限检测限：依据信噪比（S/N）≈3对应浓度确定定量限：依据信噪比（S/N）≈10对应浓度确定化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第35页线性与范围线性和范围：在LOQ浓度至不低于150%指标浓度范围内取几个浓度点进行研究。线性关系以测得响应信号（峰面积）对被分析物浓度函数作图，用最小二乘法进行线性回归，最少汇报相关系数R来证实良好线性关系。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第36页重复性重复性：配制6个供试品溶液，依法测试，定量限以上溶剂峰RSD不得小于10%（如采取内标法在RSD不得小于5%）。也能够配制含有100%指标浓度各溶剂供试品溶液，测定6次来验证。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第37页中间精密度中间精密度：不一样试验人员在不一样时间使用不一样分析仪器重复测试6份样品，要求与重复性试验结果共12份样品结果RSD不得小于10%，以验证中间精密度良好。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第38页准确度准确度：经过在供试品中加入80%、100%、120%指标浓度测得回收率所得，要求回收率在80%~120%之间。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第39页耐用性普通考查项目：顶空平衡温度、顶空平衡时间、色谱柱温度、柱流量、不一样品牌色谱柱、溶液稳定性等。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第40页研究结果分析及质量标准制订化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第41页残留溶剂表示方法BAA、允许日接触量B、浓度程度

两种表示方法比较

PDE值是绝对值，也就是说不论原料药、辅料和制剂，只要能明确各成份溶剂残留量，以PDE值来计算是很准确；而对于某一详细制剂来说，因为极难确定处方中各活性成份和各辅料残留溶剂水平，所以以浓度程度来计算更为简便，只要日摄入总量不超出10g，就无需深入计算。综合以上情况并考虑程度表示方式是当前更为简便可行。当然，在一些原料、辅料或当前国内实际情况，因为大多数药品日摄入量不会超出10g（包含活性成份和辅料），浓度制剂残留溶剂不符合浓度程度时，可依据实际测定各种残留溶剂量及使用方法用量计算实际日接触量，并与PDE值比较，如符合限量要求则也属可行。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第42页对于第一类溶剂中苯、四氯化碳、1，2-二氯乙烷、1，1-二氯乙烯，因为其显著毒性，不论在合成过程中哪一步骤使用，均需将残留量检验订入质量标准，程度需符合要求。通常，能够依据临床前残留溶剂研究结果制订临床研究用质量标准。为保障临床用药安全性，普通情况下，对于有残留有机溶剂，提议将其残留量检验订入临床研究用质量标准，程度需符合要求。第三类溶剂

通常，能够依据临床前残留溶剂研究结果制订临床研究用质量标准，普通情况下，对于有残留有机溶剂，提议将其残留量检验订入该质量标准，程度需符合要求。第一类溶剂第二类溶剂第三类溶剂质量标准制订普通标准及阶段性要求化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第43页需要关注几个问题01附录中无程度要求和未收载有机溶剂对于当前尚无足够毒性资料溶剂,在附录中未列出其PDE值和浓度限制。另外，还有一些在药品制备过程中可能用到溶剂未在附录中列出。若在药品制备过程中使用到了这类溶剂，提议药品研发者尽可能检索相关毒性等研究资料，关注其对临床用药安全性和药品质量影响。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第44页02未知有机挥发物在进行检测时，有时可能会出现一些未知色谱峰，提议对这些未知色谱峰尽可能进行定性研究，并进行定量控制。有时候定性研究是比较困难，提议可参考对未知杂质限量控制方法，控制未知有机挥发物总程度。化学药品溶剂残留研究探讨专家讲座第45页03各种有机溶剂综合影响在药品合成过程中，通常会使用各种有机溶剂，当前对残留溶剂控制基本是控制每种溶剂残留量不超出各自浓度程度，也就是说暂时